⑴ 離子交換法提取谷氨酸為什麼當 ph 達 2.5-3.2 時,ga 含量最高
中最重要的一條是根據分離要求和分離環境保證分離目的物與主要雜質對樹脂的內吸
附力有足夠的差異容。當目的物具有較強的鹼性和酸性時,宜選用弱酸性弱鹼性的樹脂。
這樣有利於提高選擇性,並便於洗脫。如目的物是弱酸性或弱鹼性的小分子物質時,
往往選用強鹼、強酸樹脂。如氨基酸的分離多用強酸樹脂,以保證有足夠的結合力,便於分步洗脫。對於大多數蛋白質,酶和其它生物大分子的分離多採用弱鹼或弱酸性樹脂,以減少生物大分子的變性,有利於洗脫,並提高選擇性
⑵ 離子交換法提取的谷氨酸怎麼結晶呢
離子交換法提取谷氨酸是利用離子交換樹脂對發酵液中谷氨酸與其它同性離子吸附能力的差別 將這些離子選擇性地吸附到樹脂上 然後用洗脫劑先後洗脫 從而得到谷氨酸
谷氨酸是一種兩性電解質 其等電點 為pH3.22.當pH^3.2時 谷氨酸帶正電荷 呈陽離子狀態 它能被陽離子交換樹脂交換吸附
三 儀器與試劑(一)實驗器材 (1)玻璃層析柱 (2)試管 (3)移液管 (4)恆壓洗脫瓶 (5)部分收集器 (6)水浴鍋 (7)分光光度計 (8)電爐
(二)材料與試劑(1)苯乙烯磺酸鈉型樹脂(100~200目)(2)2mo1/L鹽酸溶液(3)2mo1/L氫氧化鈉溶液(4)標准氨基酸溶液 將天門冬氨酸和賴氨酸分別配成2mg/mL的0.1m1/L鹽酸溶液(5)顯色劑。2克水茚三酮溶於95%乙醇中 加水至100毫升
四 操作步驟
(1)樹脂的准備 樹脂過夜㓎泡 使樹脂膨脹 加2mo1/L NaOH至上述樹脂中攪拌2號傾棄鹼液 用蒸餾水洗滌至中性 加25m1 12mo1/L HC1攪拌2h 傾棄酸液 用蒸餾水充洗滌樹脂至中性
(2)層析柱的准備 將強酸性陽離子交換樹脂用HC1處理成H*型後洗至中性 攪拌1小時後裝入層析柱 使之自然降沉到一定高度
(3)加樣分離 將液面緩慢放至貼近層析柱表面 由柱上端仔細加入pH4.5的發酵液離心液3毫升 同時開始收集流出液 每管收集1毫升 測量收集液pH 洗脫液加入速度控制在0.5m1/mim 當樣品液彎月面靠近樹脂頂端時 立即加入發酵液 如此重復 不斷測量收集液的PH值 直至樹脂吸附飽和
(4)洗脫 加樣完畢後 用滴管小心注入60·C4%(或2%)氫氧化鈉溶液(切勿攪動床面)用試管收集洗脫液 每管收集1毫升 同時測量收集液pH 直至收集液