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考馬斯亮藍g250怎麼過濾

發布時間:2021-02-08 21:25:07

A. 用考馬斯亮藍法g250測定蛋白質含量的操作過程中應注意什麼

1.大量的去污劑如TritonX-100、SDS等嚴重干擾測定.2.蛋白質與考馬斯亮藍G-250結合的回反應十分迅速,在2min左右反應達答到平衡;其結合物在室溫下1h內保持穩定.因此測定時,不可放置太長時間,否則將使測定結果偏低.

B. 我配的考馬斯亮藍G250測蛋白,零點吸光度太高,無法調零,請問該怎麼解決

零點吸光度高,請問你是用的多少吸光值?另,濃度太高的情況下吸光值也很高,你可以再稀釋10倍~進行嘗試~

C. 考馬斯亮藍g250測定蛋白質含量應該注意些什麼

大量的去污劑如TritonX-100、SDS等嚴重干擾測定.2.蛋白質與考馬斯亮藍G-250結合的反應十分迅速,在2min左右版反應達權到平衡;其結合物在室溫下1h內保持穩定.因此測定時,不可放置太長時間,否則將使測定結果偏低.考馬斯亮藍和皮膚中蛋白質通過范德華。

D. 怎樣配製 考馬斯亮藍G250蛋白染色劑

考馬斯亮藍G-250的配製:

1.稱取100 mg考馬斯亮藍G-250,溶於50 mL 90%乙醇中,

2.加入85%的磷酸100 mL,

3.最後用蒸餾水定容到1 000 mL。

此溶液在常溫下可放置一個月。

(4)考馬斯亮藍g250怎麼過濾擴展閱讀

考馬斯亮藍有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍G250由於與蛋白質的結合反應十分迅速,常用來作為蛋白質含量的測定。考馬斯亮藍R250與蛋白質反應雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來對電泳條帶染色。

考馬斯亮藍法測定蛋白質含量流程:

該方法用於大多數蛋白質的定量是比較精確的,但不適用於小分子鹼性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測定結果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

1.Bradford濃染液的配製:將100mg考馬斯亮藍G-250溶於50ml 95%乙醇,加入100ml85%的磷酸,然後,用蒸餾水補充至200ml,此染液放4℃至少6個月保持穩定。

2.標准曲線蛋白質樣本的准備:盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標准品,例如測定抗體,可用純化的抗體作為標准。如果待測樣本是未知的,也可用抗體作為標准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標准曲線。

3.將待測樣本溶於緩沖溶液中,該緩沖溶液應與製作標准曲線的緩沖溶液相同(最好用PBS)。

4.按1:4用蒸餾水稀釋濃染料結合溶液,如出現沉澱,過濾除去。

5.每個樣本加5ml稀釋的染料結合溶液,作用5~30min。染液與蛋白質結合後,將由紅色變為藍色,在595nm波長下測定其吸光度。注意,顯色反應不得超過30min.

6.根據標准曲線計算待測樣本的濃度。

E. 考馬斯亮藍g250和什麼去垢劑

R250中的R代表Red,偏紅,R250屬於慢染,脫色脫的完全,主要用於電泳染色 λmax=560―590nm.染色靈敏版度比氨基黑權高5倍.尤其適用於SDS電泳微量蛋白質染色.但蛋白質濃度超出一定范圍時,對高濃度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析時要注意. G250。

F. 急急急 考馬斯亮藍G250 的配置過程的顏色問題

配置溶液的容器未洗干凈,可能沾有蛋白質類葯品。
我上次配也這樣了,不過後來重配了,用乙醇把容器全部認真的洗干凈後就配成功了。
不過你配好之後需要過濾才可以用哦

G. 考馬斯亮藍g250為什麼要過濾 配製考馬思量藍溶液時要用濾紙過濾,為什麼是不是和它的溶解度有關

不過濾會有凝塊,其濃度比溶液大,這樣給蛋白染色的時候會出現染色不均的現象

H. 考馬斯亮藍g250配製,溶解時間

一般攪拌20分鍾吧,完全溶解不太可能,攪拌後加上水會容的更多一些,最後要過濾的

I. 考馬斯亮藍g250為什麼要過濾

不過濾會有凝塊,其濃度比溶液大,這樣給蛋白染色的時候會出現染色不均的現象

J. 考馬斯亮蘭R250液體,怎麼配置測蛋白質濃度。

R250不能用來測蛋白質濃度的,G250用來測蛋白質濃度
100mg考馬斯亮藍G-250溶於50 ml 95%乙醇,加入100 ml磷酸然後補加水至1 L,Whatman1號濾紙過濾。

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