⑴ 我们实验室要合成多肽,我想知道哪里合成多肽比较好
你才啊猫啊狗呢。自己网上查查就知道了。
我们实验室的多肽主要是在吉尔生化那里合成的,质量不错,价格便宜,比现在外面公司合成多肽要便宜不少。
⑵ 多肽合成的介绍
多肽合成是一个来固相合成源顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种:固相合成和液相多肽合成。
⑶ 多肽合成有哪些原材料
现在,人们已经发现和分离出一百多种存在于人体的肽,对于多肽的研究和利用,出回现了一个空前答的繁荣景象。多肽的全合成不仅具有很重要的理论意义,而且具有重要的应用价值。通过多肽全合成可以验证一个新的多肽的结构;设计新的多肽,用于研究结构域功能的关系;为多肽生物合成反应机制提供重要的信息;建立模型酶以及合成新的多肽药物等。二、合成方法多肽的合成主要有两种途径:化学合成和生物合成。化学合成主要通过氨基酸缩合反应来实现。为得到具有特定顺序的合成多肽,当合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体时,应将不需要反应的基团暂时保护起来,然后再进行连接反应,以保证合成的定向进行。多肽的化学合成有固相合成和液相合成,其主要的区别在于是否使用固相载体。多肽液相合成主要有逐步合成和片段组合两种策略,
⑷ 多肽合成方法有哪些
多肽合成方法:
酰基叠氮物法
早在1902年,TheodorCurtius就将酰基叠氮物法引入到肽化学中,因此它是最古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中,除了与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽以外,氨基酸酯可用于有机溶剂中。与其他许多缩合方法不同的是,它不需要增加辅助碱或另一等当量的氨基组分来捕获腙酸。
长期以来,一直认为叠氮物法是唯一不发生消旋的缩合方法,随着可选择性裂解的氨基酸保护基引入,该方法经历了一次大规模的复兴。该方法的起始原料分别是晶体状的氨基酸酰肼或肽酰肼64,通过肼解相应的酯很容易得到。在-10℃的盐酸中,用等当量的亚硝酸钠使酰肼发生亚硝化而转化为叠氮化物65,依次洗涤、干燥,然后与相应的氨基组分反应。有些叠氮化物可用冰水稀释而沉淀出来。 二苯磷酰基叠氮化物(DPPA)也可以用于酰基叠氮化物的合成。Honzl-Rudinger方法采用亚硝酸叔丁作为亚硝化试剂,并且使叠氮缩合反应可在有机溶剂中进行。因酰基叠氮化物的热不稳定性,缩合反应需在低温下进行。当温度较高时,Curtius重排,即酰基叠氮转化为异氰酸酯的反应成为一个主要的副反应,最终导致生成副产物脲。由于反应温度低(如4℃)而导致反应速率相当慢,使得肽缩合反应通常需要几天才能完全。 对于较长的N端保护的肽链,酯基的肼解一般比较困难,因此,使用正交的N保护肼衍生物是一种选择。在肼基的选择性脱除后,按倒接(backing-off)策略组合的肽片段可以用于叠氮缩合。
如前所述,虽然叠氮法一直被认为是消旋化倾向最小的缩合方法,但在反应中,过量的碱会诱发相当大的消旋。因此,在缩合反应期间要避免与碱接触,例如,氨基组分的铵盐应采用N,N-二异丙胺或N-烷基吗啉代替三乙胺来中和。
虽然有上述局限性,但该方法仍很重要,尤其对于片段缩合而言,因为该方法具有较低的异构化倾向,适用于羟基未保护丝氨酸或苏氨酸组分时,Nˊ保护的本行酰肼还具有多种用途。
酸酐法
在多肽合成中,最初考虑应用酸酐要追溯到1881年TheodorCurtius对苯甲酰基氨基乙酸合成的早期研究。从氨基乙酸银与苯甲酰氯的反应中,除获得苯甲酰氨基乙酸外,还得到了BZ-Glyn-OH(n=2-6)。早期曾认为,当用苯甲酰氯处理时,N-苯甲酰基氨基酸或N-苯甲酰基肽与苯甲酸形成了活性中间体不对称酸酐。 大约在70年后,TheodorWieland利用这些发现将混合酸酐法用于现代多肽合成。目前,除该方法外,对称酸酐以及由氨基酸的羧基和氨基甲酸在分子内形成的N-羧基内酸酐(NCA,Leuchsanhydrides)也用肽缩合。最后应该提到,不对称酸酐常常参与生化反应中的酰化反应。
混合酸酐法
有机羧酸和无机酸皆可用于混合酸酐的形成。然而,仅有几个得到了广泛的实际应用,多数情况下,采用氯甲酸烷基酯。过去频繁使用的氯甲酸乙酯,目前主要被氯甲酸异丁酯所替代。
由羧基组分和氯甲酸酯起始形成的混合酸酐,其氨解反应的区域选择性依赖依赖于两个互相竞争的羰基的亲电性和(或)空间位阻。在由N保护的氨基酸羧酸盐(羧基组分)和氯甲酸烷基酯(活化组分,例如源于氯甲酸烷基酯)形成混合酸酐时,亲核试剂胺主要进攻氨基酸组分的羧基,形成预期的肽衍生物,并且释放出游离酸形式的活性成分。当应用氯甲酸烷基酯(R1=异丁基、乙基等)时,游离的单烷基碳酸不稳定,立即分解为二氧化碳和相应的醇。然而,对于亲核进攻的区域选择性,也有一些相反的报道,产物为氨基甲酸酯和原来的N保护氨基酸组分。 为了形成混合酸酐,将N保护的氨基酸或肽分别溶于二氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环、乙腈、乙酸乙酯或DMF中,用等当量的三级碱(N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、N-乙基吗啉等)处理。然后,在-15℃--5℃,剧烈搅拌的同时加入氯甲酸烷基酯以形成不对称酸酐(活化)。经短时间活化后,加入亲核性氨基酸组分。如果作为铵盐使用(需要更多的碱),必须避免碱的过量使用。如果严格按照以上的反应条件,混合酸酐法很容易进行,是最有效的缩合方法之一。
对称酸酐法
Nα-酰基氨基酸的对称酸酐是用于肽键形成的高活性中间体。与混合酸酐法相反,它与胺亲核试剂的反应没有模棱两可的区域选择性。但肽缩合产率最高,为50%(以羧基组分计)。
虽然由对称酸酐氨解形成的游离Nα-酰基氨基酸可以和目标肽一起,通过饱和碳酸氢钠溶液萃取回收,但在最初,这种方法的实用价值极低。对称酸酐可以用Nα-保护氨基酸与光气,或方便的碳二亚胺反应制得。两当量的Nα-保护氨基酸与-当量的碳二亚胺反应有利于对称酸酐的形成,对称酸酐可以分离出来,也可不经纯化而直接用于后面的缩合反应。基于Nα-烷氧羰基氨基酸的对称酸酐对水解稳定,可采用类似上述纯化混合酸酐的方法进行纯化。
由于Boc-保护氨基酸的商品化和合理的价格,在肽链的逐步延长中,使用对称酸酐法日益受到重视。虽然可以买到晶状的对称酸酐,但原位制备仍然是一种不错的选择。
碳二亚胺法
碳二亚胺类化合物可用于氨基和羧基的缩合。在该类化合物中N,Nˊ-二环己基碳二亚胺(DCC)相对便宜,而且可溶于肽合成常用的溶剂。在肽键形成期间,碳二亚胺转变为相应的脲衍生物,N,Nˊ-二环己基脲可以从反应液中沉淀出来。显然,碳二亚胺活化后的活性中间体氨解和水解速率不同,使肽合成能在含水介质进行。经几个课题组的大量研究,确立了以碳二亚胺为缩合剂的肽缩合反应机理,羧酸根离子加成到质子化的碳二亚胺,形成高活性的O-酰基脲;虽然还没有分离出这个中间体,但通过非常类似的稳定化合物推断了它的存在。O-酰基脲与氨基组分反应,产生被保护的肽和脲衍生物。或者,与质子化形式处于处于平衡状态的O-酰基异脲,被第二个羧酸酯亲核进攻,产生对称的氨基酸酐和N,Nˊ-二取代脲。前者与氨基酸反应得到肽衍生物和游离氨基酸。在碱催化下,使用DCC的副反应使酰基从异脲氧原子向氮原子转移,产生N-酰基脲71,它不再发生进一步的氨解。不仅过量的碱可催化O-N的酰基转移,而且碱性的氨基组分或碳二亚胺也可催化该副反应。
另外,极性溶剂有利于这一反应途径。
⑸ 多肽合成中怎么定量树脂担载量
担载量的取值是要看你要和的肽链长度以及它的合成度来看的,一般的肽,如果是版二十个以下就取权0.6到0.8,很短的取1都可以,一般不能超过1,二十到三十一般就0.4到0.6,至于三十个以上你还是尽量调低一点
⑹ 什么是树脂取代度不同替代度对于多肽合成时氨基酸连接的影响该怎么选择谢谢!
通常树脂的参数有取代度(Loading),以及目数,以及规格如1%DVB.
取代度(Loading):单位是mmol/g 即每克树脂专有多少mmol的官能属团.
目数:颗粒大小 常用的是100-200Mesh 数值越大颗粒越细.
1%DVB: 交联剂二乙烯基苯在苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的比重.
⑺ 多肽如何选择合适的纯度
如何选择合抄适的多肽纯度
最佳答案
由于不同的实验对多肽纯度的要求各不相同,而且不同纯度在价格上差异很大,所以选择一个合理的纯度要求,是保证实验顺利进行的前提下能把经费利用最大化的重要因素。我们根据客户所反馈的情况,给您一下建议:粗品多肽可应用在以下领域(大规模功能性筛选,脱盐)。
>70%和>75%的多肽可应用在以下领域:(引起动物免疫和制备多克隆抗性血清;通过ELISA操作测定抗体的浓度)。
>80%,>85%和>90%的多肽可应用在以下领域:(非定量酶-底物研究;磷酸化研究;用作Western blotting的非定量研究和免疫组化研究及体外的生物学检测;在亲和层析中结合到色谱树脂上;用作细胞附着培养平板的组织包被;蛋白电泳)。
>95%和>98%的多肽可应用在以下领域:(ELISA和RIA标准定量操作;受体/配体相互作用的定量研究;细胞体外生物学检测;细胞体内研究;定量封闭和竞争性检测;蛋白酶定量研究;酶学研究;色谱标准品;核磁共振研究;单克隆抗体的生产制备)。
⑻ 合成 多肽选的是疏水性还是亲水性
何判复断合化合物亲脂性制亲水性
亲水性,或说亲水性部份,指其能力极化至能形氢键部位,并使其油或其疏水性溶液言,更容易溶解水面.亲水性疏水性别称极性非极性.
肥皂拥亲水性疏水性两端,使其溶解水,溶解油.,肥皂除掉水油间界面.
化,疏水性指(疏水物)与水互相排斥物理性质.
疏水性偏向于非极性,并较溶解性非极性溶液(机溶剂).疏水性水通聚团,水疏水性溶液表面则形接触角水滴状.举例说,疏水性包含烷烃、油、脂肪数含油脂物质.
⑼ 我要合成多肽,请问哪家的多肽合成仪器不错啊
你好,
我们是武汉鹏鑫科学仪器有限公司。我们这边有多肽合成的仪器回
如有想了解可以咨询。
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