㈠ 離子交換色譜柱和離子排阻色譜柱分離物質原理的區別
色譜過程的本質是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質在兩相之專間的分配屬會不同，這使其隨流動相運動速度各不相同，隨著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據物質的分離機制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。 吸附色譜利用固定相吸附中心對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離，吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程
㈡ 我想買Merck默克液相色譜柱，但不清楚默克液相色譜柱具體有哪些類型產品，求解答，謝謝
1 液-固吸附色譜
固定相：固定吸附劑為，如硅膠、氧化鋁等，較常使用的是5~10μm的硅膠吸附劑;
流動相：各種不同極性的一元或多元溶劑。
分離原理：組分在固定相吸附劑上的吸附與解吸；
適用於分離相對分子質量中等的油溶性試樣，對具有官能團的化合物和異構體有較高選擇性；
缺點：非線形等溫吸附常引起峰的拖尾；
2 液-液分配色譜
固定相與流動相均為液體（互不相溶）
分離原理：組分在固定相和流動相上的分配
流動相：對於親水性固定液，採用疏水性流動相，即流動相的極性小於固定液的極性（正相 normal phase），反之，流動相的極性大於固定液的極性（反相 reverse phase）。正相與反相的出峰順序相反；
固定相：早期塗漬固定液，固定液流失，較少採用
化學鍵合固定相：（將各種不同基團通過化學反應鍵合到硅膠（擔體）表面的游離羥基上。C-18柱（反相柱）
3 離子交換色譜
固定相：陰離子離子交換樹脂與陽離子離子交換樹脂
流動相：陰離子離子交換樹脂作固定相，採用酸性水溶液；陽離子離子交換樹脂作固定相，採用鹼性水溶液
分離原理：組分在固定相上發生的反復離子交換反應；組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑、電荷、存在形式等有關。親和力大，保留時間長；
陽離子交換：R-SO3H+M+ = R-SO3M+ H+
陰離子交換：R-NR4OH + X - =R-NR4X+ OH-
應用：離子及可離解的化合物，氨基酸，核酸等。
4 離子色譜
離子色譜是在20世紀70年代中期發展起來的一種技術，其與離子交換色譜的區別是其採用了特製的、具有較低交換容量的離子交換樹脂作為柱填料，並採用淋洗液抑制技術和電導檢測器，是測定混合陰離子的有效方法。
固定相：交換容量非常低的特製離子交換樹脂
分離原理：離子交換原理
5 離子對色譜
分離原理：將一種（或多種）與溶質離子電荷相反的離子（對離子或反離子）加到流動相中使其與溶質離子結合形成疏水性離子對化合物，使其能夠在兩相之間進行分配
陰離子分離：常採用烷基銨類，如氫氧化四丁基銨或氫氧化十六烷基三甲胺作為對離子
陽離子分離：常採用烷基磺酸類，如己烷磺酸鈉作為對離子
反相離子對色譜：非極性的疏水固定相（C-18柱），含有對離子Y+的甲醇-水或乙腈-水作為流動相，試樣離子X-進入流動相後，生成疏水性離子對Y+X-後：在兩相間分配
6 排阻色譜
固定相：凝膠（具有一定大小孔隙分布）
分離原理：按分子大小分離。小分子可以擴散到凝膠孔隙，由其中通過，出峰最慢。中等分子只能通過部分凝膠孔隙，中蘇通過；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶劑分子小，故在最後出峰。
全部在死體積前出峰；
可對相對分子質量在100-105范圍內的化合物按質量分離。
7 親和色譜
分離原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某種特異性親和力，進行選擇性分離。
先在載體表面鍵合上一種具有一般反應性能的所謂間隔臂（環氧、聯胺等），再連接上配基（酶、抗原等），這種固載化的配基將只能和具有親和力特性吸附的生物大分子作用而被保留，改變淋洗液後洗脫。
具體信息請參考：http://www.labgou.com/ke/?p=247
㈢ 強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別
強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別
㈣ 磺酸基陽離子交換鍵合硅膠為填充劑的色譜柱有嗎
原理：
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。
裝置：
（1）分離柱 裝有離子交換樹脂，如陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂或螯合離子交換樹脂。為了減小擴散阻力，提高色譜分離效率，要使用均勻粒度的小球形樹脂。最常用的陽離子交換樹脂是在有機聚合物分子（如苯乙烯－二乙烯基苯共聚物）上連接磺酸基官能團（─SO3─）。最常用的陰離子交換劑是在有機聚合物分子上連接季銨官能團(─NH4)。這些都是常規高交換容量的離子交換樹脂，由於它們的傳質速度低，使柱效和分離速度都低。C.霍瓦特描述了一種薄膜陰離子交換樹脂，它是在苯乙烯－二乙烯基苯共聚物核心上沉澱一薄層陰離子交換樹脂，就象雞蛋有一薄層外皮那樣，離子交換反應只在外皮上進行,因此縮短了擴散的路徑,所以離子交換速度高，傳質快，提高了柱效。同樣，在小顆粒多孔硅膠上塗一薄層離子交換材料也可得到相同類型的樹脂。螯合離子交換樹脂具有絡合某些金屬離子而同時排斥另一些金屬離子的能力，因此這種樹脂具有很高的選擇性。除了離子交換柱外，其他高效液相色譜柱也可用於分離離子。
（2）抑制柱和柱後衍生作用 常用的檢測器不僅能檢測樣品離子，而且也對移動相中的離子有響應，所以必須消除移動相離子的干擾。在離子色譜中，消除(抑制)移動相離子干擾的常用方法有兩種。
①抑制反應，用抑制反應來改變移動相，使移動相離子不被檢測器測出。離子色譜通常使用電導檢測器。在抑制反應中??綞匝衾胱佣?裕?把高電導率移動相的氫氧化物轉變成水,而樣品離子則轉變成它們相應的酸：
NaOH+H+─→Na++H2O
NaX+H+─→HX+Na+
在裝有強酸性陽離子交換樹脂的柱中進行抑制反應，使用一段時間後，這種樹脂就需要再生，很不方便。改用連接有磺酸基(─SO3H)的離子交換膜(陽離子交換膜)或用連接有銨基(─NH4)的離子交換膜(陰離子交換膜)，就可以連續進行抑制反應。例如，陽離子交換膜可使陽離子通過它擴散過去，而陰離子則不能擴散過去。
1981年，T.S.史蒂文斯和斯莫爾等報道了中空纖維抑製法。這種纖維是由陽離子交換膜材料拉制而成。用這種方法不僅不需要再生抑制柱而且減小了峰的加寬，提高了柱效。一種比較新的膜技術是加一電場以加速離子的傳遞，該法與中空纖維法比較，其優點是反應時間短、交換能力高，並且可以用於陽離子和陰離子兩者。
②柱後衍生作用，將從柱子流出的洗出液與對被測物有特效作用的試劑相混合，在一反應器中生成帶色的絡合物（見配位化合物）。對衍生試劑最重要的要求是它們與被測物能生成絡合物，但不與移動相生成絡合物。柱後衍生法能用於測定重金屬離子，所用的衍生試劑有茜素紅S等。
（3）檢測器 分為通用型和專用型。通用型檢測器對存在於檢測池中的所有離子都有響應。離子色譜中最常用的電導檢測器就是通用型的一種。紫外－可見分光光度計是專用型的檢測器，對離子具有選擇性響應。可變波長紫外檢測器與電導檢測器聯用,能幫助鑒定未知峰,分辨重疊峰和提供電導檢測器不能測定的陰離子，如硫化物及亞砷酸中的陰離子的檢測。
在離子色譜中，電導檢測法總是和抑制反應配合使用。這種檢測器對分子不響應，如水、乙醇或者不離解的弱酸分子等。對於電導檢測器，一個重要的條件是溫度要穩定，所以檢測池要放在恆溫箱中，1982年H.薩托設計一種雙示差電導檢測器，消除了溫度變化對檢測的影響，可測定10-9摩爾的陰離子。
應用：
離子色譜主要用於測定各種離子的含量，特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子，例如飲用水水質分析，高純水的離子分析，礦泉水、雨水、各種廢水和電廠水的分析，紙漿和漂白液的分析，食品分析，生物體液(尿和血等)中的離子測定，以及鋼鐵工業、環境保護等方面的應用。離子色譜能測定下列類型的離子：有機陰離子、鹼金屬、鹼土金屬、重金屬、稀土離子和有機酸,以及胺和銨鹽等。
㈤ 高效液相色譜常用什麼色譜法
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。
1．液固色譜法 使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附－解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5~10μm。適用於分離分子量200~1000的組分，大多數用於非離子型化合物，離子型化合物易產生拖尾。常用於分離同分異構體。
2．液液色譜法 使用將特定的液態物質塗於擔體表面，或化學鍵合於擔體表面而形成的固定相，分離原理是根據被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是一個分配平衡過程。
塗布式固定相應具有良好的惰性；流動相必須預先用固定相飽和，以減少固定相從擔體表面流失；溫度的變化和不同批號流動相的區別常引起柱子的變化；另外在流動相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復雜化。由於塗布式固定相很難避免固定液流失，現在已很少採用。現在多採用的是化學鍵合固定相，如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。
正相色譜法 採用極性固定相（如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相）；流動相為相對非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環已烷），常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物（如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等）。
反相色譜法 一般用非極性固定相（如C18、C8）；流動相為水或緩沖液，常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色譜中應用最為廣泛，據統計，它占整個HPLC應用的80%左右。
隨著柱填料的快速發展，反相色譜法的應用范圍逐漸擴大，現已應用於某些無機樣品或易解離樣品的分析。為控制樣品在分析過程的解離，常用緩沖液控制流動相的pH值。但需要注意的是，C18和C8使用的pH值通常為2.5~7.5（2~8），太高的pH值會使硅膠溶解，太低的pH值會使鍵合的烷基脫落。有報告新商品柱可在pH 1.5~10范圍操作。
正相色譜法與反相色譜法比較表
正相色譜法 反相色譜法
固定相極性 高～中 中～低
流動相極性 低～中 中～高
組分洗脫次序 極性小先洗出 極性大先洗出
從上表可看出，當極性為中等時正相色譜法與反相色譜法沒有明顯的界線（如氨基鍵合固定相）。
3．離子交換色譜法 固定相是離子交換樹脂，常用苯乙烯與二乙烯交聯形成的聚合物骨架，在表面未端芳環上接上羧基、磺酸基（稱陽離子交換樹脂）或季氨基（陰離子交換樹脂）。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進行可逆交換，根據各離子與離子交換基團具有不同的電荷吸引力而分離。
緩沖液常用作離子交換色譜的流動相。被分離組分在離子交換柱中的保留時間除跟組分離子與樹脂上的離子交換基團作用強弱有關外，它還受流動相的pH值和離子強度影響。pH值可改變化合物的解離程度，進而影響其與固定相的作用。流動相的鹽濃度大，則離子強度高，不利於樣品的解離，導致樣品較快流出。
離子交換色譜法主要用於分析有機酸、氨基酸、多肽及核酸。
4．離子對色譜法 又稱偶離子色譜法，是液液色譜法的分支。它是根據被測組分離子與離子對試劑離子形成中性的離子對化合物後，在非極性固定相中溶解度增大，從而使其分離效果改善。主要用於分析離子強度大的酸鹼物質。
分析鹼性物質常用的離子對試劑為烷基磺酸鹽，如戊烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉等。另外高氯酸、三氟乙酸也可與多種鹼性樣品形成很強的離子對。
分析酸性物質常用四丁基季銨鹽，如四丁基溴化銨、四丁基銨磷酸鹽。
離子對色譜法常用ODS柱（即C18），流動相為甲醇-水或乙腈-水，水中加入3~10 mmol/L的離子對試劑，在一定的pH值范圍內進行分離。被測組分保時間與離子對性質、濃度、流動相組成及其pH值、離子強度有關。
5．排阻色譜法 固定相是有一定孔徑的多孔性填料，流動相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進入孔中，滯留時間長；大分子量的化合物不能進入孔中，直接隨流動相流出。它利用分子篩對分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。常用於分離高分子化合物，如組織提取物、多肽、蛋白質、核酸等。
色譜法的基本原理
利用樣品混合物中各組分理、化性質的差異，各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當兩相相對運動時，各組分在兩相中反復多次重新分配，結果使混合物得到分離。
兩相中，固定不動的一相稱固定相；移動的一相稱流動相。
分類：
根據流動相分—以氣體作流動相—氣相色譜——固定相為液體 氣-液色譜
固定相為固體 氣-固色譜
—以液體作流動相—液相色譜——固定相為液體 液-液色譜
固定相為固體 液-固色譜
—當流動相是在接近它的臨界溫度和壓力下工作的液體時——超臨界色譜
根據固定相的附著方式
—固定相裝在圓柱管中—柱色譜
—固定相塗敷在玻璃或金屬板上—薄膜色譜（平板色譜）
—液體固定相塗在紙上—紙色譜（平板色譜）
根據分離機理
—分配色譜—樣品組分的分配系數不同
—吸附色譜— 樣品組分對固定相表面吸附力不同
—體積排阻色譜—利用固定相孔徑不同，把樣品組分按分子大小分開
—離子交換色譜—不同離子與固定相商相反電荷間的作用力大小不同
根據極性
—流動相極性＞固定相極性-反相色譜
—流動相極性＜固定相極性-正相色譜
氣相色譜只適合分析較易揮發、且化學性質穩定的有機化合物，而HPLC則適合於分析那些用氣相色譜難以分析的物質，如揮發性差、極性強、具有生物活性、熱穩定性差的物質。所以，HPLC的應用范圍已經遠遠超過氣相色譜。
一、吸附色譜（adsorption chromatography）
又叫液固色譜法：流動相是液體，固定相是固體。
分離原理：固定相是固體吸附劑，吸附劑是多孔性微粒物質表面有吸附中心。樣品組分與流動相競爭吸附中 心。各組分的吸附能力不同，使組分在固定相中產生保留時間不同和實現分離。
固定相： 固定相通常是強極性的硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚醯胺等固體吸附劑。活性硅膠最常用。
流動相： 弱極性有機溶劑或非極性溶劑與極性溶劑的混合物，如正構烷烴（己烷、戊烷、庚烷等）、二氯甲 烷/甲醇、乙酸乙酯/乙腈等。
應用： 對於極性，結構異構體分離和族分離仍是最有效的方法，如農葯異構體分離、石油中烷、烯、芳烴的 分離。 缺點是容易產生不對稱峰和拖尾現象。
二、分配色譜
原理： 固定液機械的吸附在惰性載體上，樣品分子依據他們在流動相和固定相間的溶解度不同，分別進入兩相分配而實現分離。
固定相：將一種極性或非極性固定液吸附在惰性固相載體上。如全多孔微粒硅膠吸附劑。
根據極性不同分類：正相分配色譜—固定相載體上塗布的是極性固定液；
流動相是非極性溶劑；
可分立極性較強的水溶性樣品；
弱極性組分先洗脫出來。
反相分配色譜—固定相載體上塗布的是非極性或弱極性固定液；
流動相是極性溶劑；
強極性組分先洗脫出來。
液-液分配色譜固定相中的固定液體往往容易溶解到流動相中去，所以重現性很差，且不能進行梯度洗脫，已經不大為人們所採用。
三、鍵合相色譜
考慮分配色譜法中固定液的缺點，因此將各種不同的有機關能團通過化學反應共價結合到固定相惰性載體上，固定相就不會溶解到流動相中去了。
鍵合固定相優點：○ 對極性有機溶劑有良好的化學穩定性
○使色譜柱的柱效高、壽命長
○實驗重現性好
○幾乎適於各種類相的有機化合物的分離，尤其是k』寬范圍的樣品
○可以梯度洗脫
根據極性不同分類：正相鍵合相色譜—固定相極性＞流動相極性
固定相：二醇基、醚基、氰基、氨基等極性基團的有機分子。
適於分離脂榮、水溶性的極性、強極性化合物
反相鍵合相色譜—固定相極性＜流動相極性
固定相：烷基、苯基等非極性有機分子。如最常用的ODS柱或C18柱就 是最典型的代表，其極性很小。
適於分離非機性、弱極性離子型樣品，
是當今液相色譜的最主要分離模式。
正相HPLC（normal phase HPLC）：
是由極性固定相和非極性（或弱極性）流動相所組成的HPLC體系。其代表性的固定相是改性硅膠、氰基柱等，代表性的流動相是正己烷。吸附色譜也屬正相HPLC。
反相HPLC（reversed phase HPLC）：
由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系，與正相HPLC體系正好相反。其代表性的固定相是十八烷基鍵合硅膠(ODS柱，Octa Decyltrichloro Silane)，代表性的流動相是甲醇和乙腈。
四、體積排阻色譜（SEC，size exclusion chromatograghy）
（又稱凝膠色譜和分子篩色譜）
原理： 以多孔凝膠（如葡萄糖，瓊脂糖，硅膠，聚丙烯醯胺等）作固定相，依據樣品分子量大小達到分離目 的。大分子不進入凝膠孔洞，沿多孔凝膠膠粒間隙流出，先被洗脫；小分子進入大部分凝膠孔洞， 在柱中被強滯留，後被洗脫。
根據樣品性質分類：凝膠過濾（GFC）—用於分析水溶性樣品，如多肽、蛋白、生物酶、寡聚核苷酸、多聚核 苷酸、多糖。
凝膠滲透（GPC）—用於分析脂溶性樣品，如測定高聚物的分子量。
SEC主要依據分子量大小進行分離，因此與樣品、流動相間的相互作用無關。因此不採用改變流動相的組成來改善分離度。
五、離子交換色譜
（ion exchange chromatography, IEC）
分離原理：使用表面有離子交換基團的離子交換劑作為固定相。帶負電荷的交換基團（如磺酸基和羧酸基）可以用於陽離子的分離；帶正電荷的交換基團（如季胺鹽）可以用於陰離子的分離。不同離子與交換基的作用力大小不同，在樹脂中的保留時間長短不同，從而被相互分離
㈥ 離子交換色譜柱分離極弱酸陰離子時為什麼要使用鹼性淋洗液
就得抄知道其原理：襲
離子色譜是利用相反電荷之間的相互作用來分離的,當檢測物質帶負電荷時,要選擇陰離子色譜柱,陰離子色譜柱帶正電荷的配基,進行陰離子-陽離子交換,結合帶負電荷的分子
我們的瑞伊締洗液也是弱鹼性
㈦ 色譜柱的填料有哪些陽離子交換柱
陽離子是指功能基團，有很多選擇，強陽弱陽；基質又有多種，主要可分為硅膠和聚合物，聚合物種類比較多，如PSDVB，聚甲基丙烯酸酯等。
㈧ 怎樣查找usp葯典上使用的色譜柱
根據下面色譜柱系列的編號，就可以在USP葯典上查到需要的色譜柱：
L1：十八烷基鍵合多孔硅膠或無機氧化物微粒固定相，簡稱ODS柱 L2：30～50mm表面多孔薄殼型鍵合十八烷基固定相，簡稱C18柱 L3：多孔硅膠微粒，即一般的硅膠柱 L4：30～50mm表面多孔薄殼型硅膠柱 L5：30～50mm表面多孔薄殼型氧化鋁柱 L6：30～50mm實心微球表麵包覆磺化碳氟聚合物，強陽離子交換柱 L7：全多孔硅膠微粒鍵合C8官能團固定相，簡稱C8柱 L8：全多孔硅膠微粒鍵合非交聯NH2固定相，簡稱NH2柱 L9：強酸性陽離子交換基團鍵合全多孔不規則形硅膠固定相，即SCX柱 L10：多孔硅膠微球鍵合氰基固定相（CN），簡稱CN柱 L11：鍵合苯基多孔硅膠微球固定相，簡稱苯基柱 L12：無孔微球鍵合季胺功能團的強陰離子交換柱 L13：三乙基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相（C1），簡稱C1柱 L14：10mm硅膠化學鍵合強鹼性季銨鹽陰離子交換固定相，簡稱SAX柱 L15：已基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相，簡稱C6柱 L16：二甲基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微粒固定相 C2柱 L17：氫型磺化交聯苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,強陽離子交換柱 L18：3～10mm全多孔硅膠化學鍵合胺基（NH2）和氰基（CN）柱 L19：鈣型磺化交聯苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，強陽離子交換柱 L20：二羥基丙烷基化學鍵合多孔硅膠微球固定相（Diol），簡稱二醇基柱 L21：剛性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：帶有磺酸基團的多孔苯乙烯陽離子交換柱 L23：帶有季胺基團的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔離子交換柱 L24：表面含有大量羥基的半剛性聚乙烯醇親水凝膠柱 L25：聚甲基丙烯酸酯樹脂交聯羥基醚（表面含有殘余羧基功能團）樹脂。能分離分子量100～5000MW范圍的水溶性中性、陽離子型及陰離子型聚合物（用聚氧乙烯測定）的固定相 L26：丁基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相，即C4柱 L27：30～50mm的全多孔硅膠微粒 L28：多功能載體，100Å的高純硅膠加以氨基鍵合以及C8反相鍵合的官能團 L29:氧化鋁,反相鍵合,含碳量低,氧化鋁基聚丁二稀小球,5mm，孔徑80Å L30:全多孔硅膠鍵合乙基硅烷固定相
太多了，沒有一一列舉了～～
㈨ 磺酸基陽離子交換鍵合硅膠色譜柱，怎樣維護保養及活化
首先在開始使用系統以前檢查柱子有否微生物生長，否則柱子會堵塞，柱壓會升高到無法接受的水平。然後，不接檢測器，正向安裝色譜柱，使用純甲醇以0.6ml/min流速沖洗約10倍柱體積。
再連接檢測器，用純甲醇以0.6ml/min流速沖洗約20倍柱體積。
然後使用去離子水以0.6ml/min流速沖洗約20倍柱體積。
最好再確保連接好保護柱（多使用相應柱製造商針對性提供的保護柱），再用選用的洗脫液以0.6ml/min流速平衡1h以上，進樣檢測。同樣，若洗脫液中含有緩沖鹽類，在用分析洗脫液平衡之前，先用不含緩沖鹽的同比例洗脫液過渡，沖洗約10倍柱體積，避免緩沖鹽在分析柱內析出。
特別注意：
①洗脫液要求是新制的緩沖液。對於陽離子交換柱，多用檸檬酸或酒石酸緩沖液（或其混合溶液）、鄰苯二甲酸緩沖液，pH范圍從2.5到6.5；對於陰離子交換柱，多用磷酸緩沖液、硝酸銨溶液（1mMol/L），鄰苯二甲酸緩沖液，pH范圍從2.5到6.5。絕對禁止使用水楊酸緩沖液，因水楊酸分解產物會改變固定相的性質。洗脫液在使用以前必須用0.45um濾膜過濾並徹底脫氣，以防止發生檢測和泵送問題。
②提倡在室溫環境使用，為了提高分析的穩定性，可以設置高於室溫5～10℃的柱溫，最好不要在40℃以上使用。
③使用過程中不要超過其耐受最高壓力。
④增加流速或者降低流速要採取小的間隔變化以防止柱床的擾動。更換柱子，必須先降低流量至0，等待洗脫液完全流出柱子，壓力變化到0（約2min）後再更換。
⑤必須防止將來自流動相或者樣品中的疏水性或與流動相極性差別很大的化合物進入色譜柱，特別地，要絕對禁止導入顆粒雜質，以防止操作壓力增高，污染物難以或者不能去除。
（6）分析完畢，凈化程序基本同C18柱，先用去離子水以0.6ml/min流速沖洗約20倍柱體積。然後用甲醇以0.6ml/min流速沖洗約10倍柱體積，純甲醇飽和後密封保存即可。（注意：一定要確保在柱子內沒有緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的情況下保存色譜柱。）
（7）長時間保存後重新使用，重復上述（1）～（6）即可。
㈩ sax 色譜柱和離子色譜柱可以通用嗎
sax 色譜柱和離子色譜柱可以通用
高效色譜柱可以通過陰陽離子交換色譜方式進行分析和分離生物分子的.在任何一種離子交換模式下,產品既有甲基丙烯酸基體,又有硅膠基體的色譜柱.蛋白質、多肽、DNA和寡核苷酸衍生出來的RNA以及其它的核酸片斷是TSK-GE陰離子交換分析和分離的典型樣品.
我公司提供分析柱（4.6和7.5mm內徑）和半制備柱（21.5和55mm內徑）.顆粒范圍從快速質量控制和工藝檢測的2μm到工藝規模分離的20μm大型顆粒.由於陰離子交換柱是基於聚苯烯基體材料,他們最適合用於分析小分子量的糖類氨基酸類、核酸鹼基,以及小的備選葯物.
TSK-GEL 離子交換色譜柱特性及優點
TSK-GEL 陽離子交換色譜柱特點：
TSKgel BioAssist S 色譜柱具有獨特的孔結構和結合特性,對中到大分子量的蛋白質具有較高的結合容量.
BioAssist 色譜柱有內徑為4.6mm或者10mm的PEEK 材質,也有分析,半制備和制備應用的玻璃柱和不銹鋼柱.
TSKgel CM-3SW 色譜柱具有小孔徑和較大的表面積,對小到中等分子量的蛋白質的結合量近似為TSKgel CM-5PW色譜柱的兩倍.
TSKgel SP-5PW有內徑為2mm的色譜柱,可應用於LC-MS分析.