㈠ 凝膠過濾層析如何實現樣品濃縮、脫鹽、更換緩沖液謝謝各位啊!
你的問題很不明確,用sephadexLH-20純化除了有一部分凝膠過濾外,還有一些分配色譜的作回用,所以這個介質答和sephadax G15 是不太一樣的,你純化出多少峰都應該進行抑菌實驗,否則很難知道你要的組分在哪裡.既然這個分子量這么小,那你上sephadex G200,估計你的目標多肽在最後面,所以你得到的那個峰不一定有你要的東西,而在後面,我是這樣猜測的,關鍵你要測定活性,所以你再純化也沒有活性,問題在於你沒有時時做活性檢測,填料選擇不很正確,檢測波長我不清楚對不對,關鍵你要選擇合適的柱子,同時每一步都做活性檢測.
我確實是對每個峰都作了抑菌實驗,Sephadex G15的每個峰都有抑菌活性.粗提物上G200隻得到了一個吸收峰,要是我要的組分在後面,可它連個小峰都沒有呀.。此外,有人建議我,先使用硅膠柱對粗提物進行處理,請問可供選擇的柱子有哪些?謝謝。
那你沒有說明G200的峰是不是有活性,你也可以考慮硅膠填料,那得選擇c8或者c4的反相硅膠的柱子,可以做HPLC,這樣也是不錯的選擇,畢竟通常的凝膠柱子很難有很好的分離效果。