① 酪蛋白的制備中為什麼不能用大量的水洗滌沉澱
會溶解損失。
酪蛋白常溫下在水中可溶解0.8-1.2%,微溶於25℃水和有機溶劑,溶於稀鹼和濃酸中,能吸收水分。
從牛奶中分離酪蛋白和乳糖
一、引言
牛奶中主要的蛋白質是酪蛋白,含量約為35g/l。酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸鈣-磷酸鈣復合體膠粒存在,
膠粒直徑約為20~800納米,平均為100納米。在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白會沉澱,加工後可製得乾酪或乾酪素。本實驗利用加酸,當達到酪蛋白等電點ph=4.7時,酪蛋白沉澱。脫脂乳中除去酪蛋白後剩下的液體為乳清,在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白,還有溶解狀態的乳糖,乳中糖類的99.8%以上是乳糖,可通過濃縮、結晶製取乳糖。
二、實驗材料和試劑
脫脂乳或脫脂奶粉。
醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(ph=4.7),95%乙醇,乙醚,碳酸鈣粉末,苯肼試劑。
三、實驗步驟
1. 從牛奶中分離酪蛋白
在燒杯中加入2g脫脂奶粉,再加入40ml40℃,ph=4.7的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40ml,
用ph精密試紙檢驗液體的ph值。靜置冷卻至室溫,傾去上層清液(留作分離乳糖用),剩下的懸浮液分別裝入兩支離心試管中,用轉速為2000轉/分離心分離3~5分鍾,傾出上層清液,(合並於上一清液中),得酪蛋白粗品。於離心管中加入5ml蒸餾水,用玻棒充分攪拌,洗滌除去其中的水溶性雜質(如乳清蛋白,乳糖以及殘留的緩沖溶液),離心後棄去上層液,再用蒸餾水洗一次。於試管中加入5ml95%乙醇,充分攪拌,離心後棄去乙醇溶液,用乙醇洗滌主要是除去磷脂類物質。最後再用5ml乙醚以同樣方法洗滌,以除去脂肪類物質。將酪蛋白沉澱物涼干,稱重、並計算得率。
2. 從牛奶中分離乳糖
在除去酪蛋白的乳清中,加入1.5g caco3粉末,攪拌均勻後加熱至沸。加caco3的目的一方面是中和溶液的酸性,防止加熱時乳糖水解,另方面又能使乳白蛋白沉澱。過濾除去沉澱,在濾液中加入1~2粒沸石,加熱濃縮至3~5ml,加入10ml 95%乙醇(注意離開火焰)和少量活性炭,攪拌均勻後在水憨氦封教莩寄鳳犀脯簍浴上加熱至沸騰,趁熱過濾,濾液必須澄清。加塞放置過夜,乳糖結晶析出,抽濾,用95%乙醇洗滌產品。
3. 乳糖成脎試驗
取自製乳糖溶於少量水中,濃度約為5%,在試管中加入1ml乳糖溶液,1ml苯肼試劑①,搖勻,試管口用棉花塞住,在沸水浴中加熱,並不時振搖,加熱10~15分鍾後,取出放置冷卻,乳糖脎成結晶析出。取少量乳糖脎在顯微鏡下觀察其結晶形態,可證實為乳糖。
①苯阱試劑有毒,小心使用,勿觸及皮膚,如觸及皮膚先用稀醋酸洗,再用水洗。
② 在實驗室如何做酪蛋白的水解
水解酪蛋白來獲得氨基酸:
胰蛋源白酶液:稱取胰蛋白酶1g,用pH=7.0 0.2mol/L磷酸緩沖液100ml完全溶解,過濾,備用。
酪蛋白溶液:稱取酪蛋白1g,置於試管中,加適量1mol/LNaOH溶液,置於酒精燈上小心加熱直至酪蛋白完全溶解。過濾,定容至100ml。(用該法需要控制好火,否則容易使將酪蛋白燒焦。實際操作時也可以用磁粒旋轉儀選擇適當溫度和轉速進行溶解。)
然後將酶稀釋100倍,將酪蛋白溶液10倍時測分光度較准確。(當時我們測米氏常數,實驗後覺得這樣比較好。不知道你做什麼,或許這樣的濃度也能適合你的實驗。)
水解:酶液、底物混勻後,置40℃恆溫水浴保溫5min。
終止水解:加10%三氯乙酸溶液、混勻、置40℃恆溫水浴保溫10min,過濾、定容。
水解成多肽就不知道是怎麼做了。我想可能把反應時間縮短成1min甚至更少或許能行。
③ 牛奶里酪蛋白的提取實驗里遇到一個問題
冷靜下來,好好考慮一下過去所學的知識及技能,我不相信你沒辦法做下去。
沒有乙醚可以不做專這一步,乙醇也能部屬分去脂;沒有離心更好,免得離心後產品因離心在試管底部緻密沉積,採用震盪的方法處理,時間延長;震盪後傾入濾紙過濾即可乾燥。
④ 酪蛋白氨基酸在水裡能溶解么
酪氨酸是一種白色結晶體或結晶粉末,無味,易溶於甲酸,難溶於水,不溶於乙醇和乙醚的化學品。
⑤ 酪蛋白水解物可以高溫高壓滅菌嗎
過濾滅菌,這種蛋白經不起高溫滅菌的,損失會很多,用過濾滅菌,估計抽的時候不好抽,因為絡蛋白溶在水裡較稠,當時我就是過濾滅菌的。過濾頭好像是0.22微米的孔徑
⑥ 酪蛋白終止反應後怎麼離心或過濾
酪蛋白的制備方法: (1)新鮮牛奶脫脂,加酸(乳酸、乙酸、鹽酸或硫酸),將pH調至4.8,使乾酪版素微膠粒失去電荷權而凝固沉澱。
用這種方法得到的乾酪素稱為酸酪蛋白,加酸的種類不同得到的酸酪蛋白卻幾乎毫無區別。酸酪蛋白是白色至淡黃色粉末或顆粒,。
⑦ 從牛奶中提取酪蛋白實驗中為什麼調整溶液的PH可將酪蛋白沉澱出來
牛奶是我們經常喝的一種健康飲品,營養也非常豐富。那麼牛奶可以補碗是真的嗎?牛奶可以補碗的原理是什麼?看下文介紹吧。
原來牛奶可以補碗,啤酒洗鑽戒,番茄醬除垢等,其實生活中有很多小知識和技巧是等待我們發現的。那麼牛奶可以補碗是真的嗎?
牛奶可以補碗是真的嗎
牛奶作粘合劑在原理上可行,並且早有應用。
粘合劑的工作原理,是利用粘合劑分子滲入待粘合物表面的孔洞中,通過物理化學作用,形成分子間作用力/共價鍵,從而形成宏觀上的連接。很多生物大分子比如蛋白質本身就是長鏈多聚物,其中的一些由於結構組成特殊,更容易形成分子間力/共價鍵,故而可以起到粘合作用。
牛奶可以補碗的原理
牛奶實際上是各種乳脂(~3%)和乳蛋白(~3%)分散在水(~88%)中形成的膠狀懸浮體系。而乳蛋白中超過~80%的成分是酪蛋白(casein),其它~20%的蛋白成分為乳清蛋白(whey protein)。酪蛋白粘合劑的一大優點是取材容易且制備簡單。酪蛋白的等電點pI是4.6,所以在牛奶中加入酸使pH低於pI就可使酪蛋白凝結析出,通過過濾去除水分和脂類。之後再加入鹼並加熱使凝塊重新液化並且蛋白變性成為酪蛋白粘合劑。不過由於其天然成分,酪蛋白粘合劑的保存時間較短,容易腐敗。
如何選購牛奶
鼻嗅
新鮮優質牛奶應有鮮美的乳香味,不應該有酸味、魚腥味、酸敗臭味等異常氣味。
口味
正常鮮美的牛奶滋味是由微微甜味、酸味、鹹味和苦味4種滋味融合而成的渾然一體,但不應該嘗出酸味、鹹味、苦味、澀味等異味。
眼觀
先觀察包裝是否有脹包,奶液是否是均勻的乳濁液。如發現奶瓶上部出現清液,下層呈豆腐腦沉澱在瓶底,說明奶已經變酸、變質了。
攪拌
用攪拌棒將奶汁攪勻,觀察奶液是否帶有紅色、深黃色,有無明顯的不溶雜質,有無發粘或者凝塊現象,如果有以上現象,說明奶中摻入澱粉等物質。
⑧ 牛奶中酪蛋白提取過程沒有抽濾 ,對產率有影響嗎
酪蛋白的提前應該要用冰醋酸調節到酪蛋白的等電點然後讓酪蛋白析出,這個時候你不抽濾還能怎麼處理?普通過濾,那樣會很慢,而且酪蛋白黏性很大的,很難濾下去的
⑨ 已配製好的酪蛋白溶液4℃可以最多可以存放多長時間,保持溶液不變質
利用等電來點時溶解自度最低的原理,將牛乳的PH調到4.7時最後酪蛋白沉到最下面,最上邊是脂肪可以用鹽析法,加重金屬離子、有機酸、有機溶劑等,都可以使蛋白質沉澱下來。蛋白質沉澱後,離心10分鍾(3000r/min)。水洗兩次,離心10分鍾(3000r/min)。加入乙醇,攪拌,懸濁液轉移至布氏漏斗中抽濾。用乙醇—乙醚混合液洗沉澱2次。最後用乙醚洗沉澱兩次,抽干。沉澱風干,得酪蛋白純品。加入有機溶劑是除去脂類雜質。
⑩ 請問怎麼溶解酪蛋白
酪蛋白易溶於有機溶劑,不易溶於水,所以只與水難溶,與其他都易溶