❶ 實驗2中加入蒸餾水的目的
A、由以上分析可知,圖1、2中加入蒸餾水的目的不相同,A錯誤;
B、圖1中完成回過濾之後要保留濾液答,而圖2中加水後DNA逐漸析出,因此過濾後要去除濾液,B錯誤;
C、圖2中過濾時的鹽溶液濃度約為0.14mol/L(此時DNA的溶解度最低),C錯誤;
D、嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解去除蛋白質,因此在圖1濾液中加入少許嫩肉粉有助於去除雜質,D正確.
故選:D.
❷ bca法測定蛋白質的含量實驗報告設置5組標准液的目的是什麼
掌握BCA法測定蛋白質濃度岩豎的方法。BCA法測定蛋白質的含量實驗報告,設置5組標准液的目的,是掌握BCA法測定蛋白質濃度的方法及原理,掌握722型分光光度計移液管的正確使用。蛋白質,由多個氨基酸組成,也是粗枝大人體的主要組成部分及食物的重要成搭敗分之一,體內的肌肉、骨骼和內臟主要是由蛋白質組成的。
❸ 質粒提取為什麼加蒸餾水
質粒提取加蒸餾水是因為:稀釋層析液,更有利於色素擴散。
葉綠體色素在葉綠體內以其親水部分與蛋白質結合,親脂部分與類脂結合,純的有機溶劑不能打破色素與蛋白質的聯系,所以必須用能與水混溶的有機溶劑並有少量水存在時,才能將葉綠素提取出來。
加蒸餾水是為了促進血細胞破裂,使DNA從細胞核中釋放出來。加蒸餾水降低NaCl溶液濃度,使DNA析出。關鍵要理解實驗原理。
實驗原理
提取質粒DNA的方法有很多種,從提取產量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取,從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取,從具體操作方法分可以分為鹼裂解法、煮沸法、牙簽法等,各種不同的方法各有其優缺點,根據不同的實驗目的可以採用合適的提取方法。詳細內容請參考《分子克隆實驗指南》。
以上內容參考:網路-質粒抽提
❹ bca法測蛋白濃度為什麼稀釋蛋白質濃度
BCA法測定蛋白質濃度原理:
BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即 BCA 工作試劑。在鹼漏虛性條件下,BCA 與蛋白質結合時,蛋白質將 Cu2+ 還原為 Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。
BCA 蛋白濃度測定試劑返橡燃盒,Abbkine的蛋白質定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單,快捷,兼容去污劑的方法,准確定量總蛋白。
成分:
試劑 A,100 mL
試劑 B,2 mL
標准蛋白(BSA)1 mL×2,1 mg/mL
保存條件運輸溫度:室溫(標准蛋白 4~8 ℃ 運輸)
保存溫度:室溫(標准蛋白 -20 ℃ 保存)
有效日期:12 個月
使用方法:
方法一:96 孔板
1.配製 BCA 工作液:根據標准品和樣品數量,按 50 體積試劑 A,1 體積試劑 B 配製適量 BCA 工作液。充分混勻。
2.將蛋白標准品按 0 μL,1 μL,2 μL,4 μL,6 μL,8 μL,10 μL 加入 96 孔板的蛋白標准品孔中。加滅菌雙蒸水補足到 10 μL。取 10 μL 待測樣品加入 96 孔板的待測樣品孔中。每個測定要做 2~3 個平行。
3.向待測樣品孔和蛋白標准品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即樣品與工作液的體積比為 1:20),混勻。
4.37 ℃ 溫如御浴 30 min。冷卻至室溫。
5.酶標儀 562 nm 波長下測定吸光度。
6.製作標准曲線。從標准曲線中求出樣品濃度。
❺ bca法測蛋白濃度原理
BCA蛋白濃度檢測是一個實驗,是根據吸光液念值可以推算出蛋白濃度.鹼性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,兩分子BCA螯合一個Cu+。將該水溶性復合物在562nm處的吸收值,與標准曲線對比,即可計算待測蛋白的埋弊濃度。
實驗試劑
(1) BCA試劑的配製
① 試劑A,1L:分別稱取10g BCA (1%),20g Na2CO3·H2O(2%),1.6g Na2C4H4O6·2H2O(0.16%),4g NaOH (0.4%) ,9.5g NaHCO3(0.95%) ,加水至1L,用NaOH或固體NaHCO3調節pH值至11.25。
②試劑B,50ml:取2g CuSO4·5H2O (4%),加蒸餾水至50ml。
③BCA試劑:取50份試劑A與1份試劑B混合均勻。此試劑可穩定一周。
(2)標准蛋白質溶液:稱取0.5g牛血清白蛋白,溶於蒸餾水中並定容至100ml,製成5mg/ml的溶液。用時稀釋十倍。
❻ BCA蛋白濃度檢測的實驗操作
繪制標准曲線:
取96孔酶標板,按下表加入試劑。
管號
1
2
3
4
5
6
7
8
標准蛋白溶液(μl)蒸餾水(μl)
BCA試劑(伍逗μl)
蛋白質濃蘆嘩度(mg/ml)
0
20
200
0
1
19
200
0.025
2
18
200
0.05
4
16
200
0.1
8
12
200
0.2
12
8
200
0.3
16
4
200
0.4
20
0
200
0.5
上述試劑加完後,准確吸取20μl樣品溶液於酶標孔中,加入BCA試劑200μl,輕搖,於37℃保溫30-60min,冷卻至室溫後,以空白為對照,在酶標儀上590nm處比色,以牛血清白蛋白含量為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪制標准曲線。以標准曲線空白為對照,根據樣品的吸光值從標腔嘩賣准曲線上查出樣品的蛋白質含量。
❼ bca蛋白質定量實驗中為什麼要加蒸餾水
一般來說BCA蛋白定量法中的BSA及樣品都是用蒸餾水稀釋就可以了。假如沒有蒸餾水,也可以用過濾除菌的去離子水代替也是沒有太大問題的。
❽ BCA蛋白濃度檢測的實驗試劑
Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白濃度檢驗方法之一BCA法基礎上改進而成。其原理與Lowery法蛋白定量相似,即在鹼性環境下游閉裂蛋白質與Cu 2+ 絡合並將Cu 2+ 還原成Cu + 。兩分子BCA與一個Cu + 螯合形成穩定的紫藍色復合物,在562 nm處有高的光吸收值並與蛋白質濃度成正比,據此可測定蛋白質濃度。
組成與儲存:
組分名稱 規格 保存
BCA Reagent 100ml 2-8℃
Cu Reagent 3.0ml 2-8℃
BSA標准液5 mg/神閉ml 1ml -20ºC凍存
可進態迅行500T微板(microplate)測定或50T2ml比色杯測定。