㈠ 青黴素的提取、精製及萃取率的計算實驗方案。 快。急急急
一、原理:
萃取過程是利用在兩個不混溶的液相中各種組分溶解度的不同,從而達到分離組分的目的。當pH=2.3時,青黴素在乙酸丁酯中比在水中溶解度大,因而可以將乙酸丁酯加到青黴素溶液中,並使其充分接觸,使青黴素被萃取濃集到乙酸丁酯中,達到分離提純的目的。
青黴素萃取率(%)=(萃取前青黴素含量-萃取後青黴素含量)/萃取前青黴素含量
萃取前後青黴素含量的測定採用的是碘量法。碘量法的基本原理為青黴素類抗生素經鹼水解的產物青黴噻唑酸,可與碘作用(1mol青黴噻唑酸可與8mol碘原子反應,即青黴素:I2=1:4),根據消耗的碘量可計算青黴素的含量。利用碘量法測定青黴素含量時,為了消除供試品中可能存在的降解。剩餘的碘用Na2S2O3滴定(Na2S2O3:I2=2:1)。
二、實驗材料
1、器材 :
150ml棕色瓶(2個)、分液漏斗、100ml量筒、100ml燒杯(2個)、玻璃棒、酸式滴定管、鐵架台、1ml移液管、10ml移液管、洗耳球、100ml容量瓶、精密pH試紙(包括pH2.4)。
2、試劑:
青黴素鈉、K2Cr2O3、Na2S2O3、無水Na2CO3、碘、KI、無水乙酸鈉、冰醋酸、NaOH、濃HCl、可溶性澱粉、乙酸丁酯、濃硫酸。
(1)Na2S2O3(0.1mol/L):
取Na2S2O3約2.6g與無水Na2CO3 0.02g,加新煮沸過的冷蒸餾水適量溶解,定容到100ml。
(2)碘溶液(0.1mol/L):
取碘1.3g,加KI 3.6g與水5ml使之溶解,再加HCl 1~2滴,定容到100ml。
(3)乙酸乙酸鈉(pH4.5)緩沖液100ml:
取83g無水乙酸鈉溶於水,加入60ml冰醋酸,定容1L。
(4)NaOH(1mol/L)4g/100ml
(5)HCl(1mol/L)9ml/100ml
(6)H2SO4(1mol/L)55.5ml/L
(7)澱粉指示劑:
稱取可溶性澱粉0.5g,置於瑪瑙研缽中,加少量除鹽水研磨成糊狀物,徐徐加入到100mL煮沸的除鹽水中,繼續煮沸1min,冷卻後備用。該試劑不宜存放,應在使用時配製。 四、三、實驗步驟
1、Na2S2O3的標定:
取K2Cr2O3 0.15g於棕色瓶中,加入50ml水使之溶解,再加KI 2g,溶解後加入稀H2SO4 40ml,搖勻,密塞,在暗處放置10min。取出後再加水25ml稀釋,用Na2S2O3滴定臨近終點時,加澱粉指示劑3ml,繼續滴定至藍色消失,記錄消耗的體積。
2、青黴素的萃取
(1)用電子天平稱取0.12g青黴素鈉,溶解後定容到100ml(以此模擬青黴素發酵液進行實驗操作)。
(2)准確移取10ml青黴素鈉溶液,用稀H2SO4調節pH2.3~2.4,取15ml乙酸丁酯液,與青黴素鈉溶液混合,置分液漏斗中,搖勻,靜置30min。
(3)溶液分層後,將下方萃余相置於燒杯中備用,將上方萃取液回收。
3、萃取率的測定
(1)測定萃取前青黴素鈉溶液消耗的碘
取5ml定容好的青黴素鈉溶液於棕色瓶中,加1ml NaOH(1mol/L)後放置20min,再加1ml HCl(1mol/L)與5ml乙酸-乙酸鈉緩沖液,精密加入碘滴定液(0.1mol/L)5ml,搖勻,密塞,在20~25℃暗處放置20min,用Na2S2O3滴定液(0.1mol/L)滴定,臨近終點時加澱粉指示劑3ml,繼續滴定至藍色消失,記錄Na2S2O3消耗的體積(V前)。
(2)測定空白消耗的碘
另取5ml定容好的青黴素鈉溶液於棕色瓶中,加入5ml乙酸-乙酸鈉緩沖液,再精密加入碘滴定液(0.1mol/L)5ml,搖勻,密塞,在20~25℃暗處放置20min,用Na2S2O3滴定液(0.1mol/L)滴定,臨近終點時加澱粉指示劑3ml,繼續滴定至藍色消失,記錄Na2S2O3消耗的體積(V空白)。
(3)測定萃取後萃余相中青黴素鈉消耗的碘
取萃余相5ml於棕色瓶中,按步驟1的方法進行測定,記錄Na2S2O3消耗的體積(V後)
。
㈡ 青黴素的提煉過程是怎樣的
首先取出冷藏保存的培養液調節至PH2.0,然後加入香蕉精(醋酸戊酯)不斷輕搖,含有青黴素的香蕉精就會浮到表面,與下層的菌液分離後,把提取部分再用PH7.0的蒸餾水提取幾次,然後用木炭脫色,再用氯仿提煉後溶於水,就是青黴素液。
㈢ 如何用簡單的方法製造青黴素
原理:首先收集大量青黴,用營養液培養,接著講培養液過濾,加上菜籽油並攪拌。攪內拌之後將水分容(精製培養液)抽取出來。通過上面的方法就將大部分的不溶性物質和脂溶性物質去除了。
將炭磨成粉末,加入精製培養液,讓炭吸收青黴素。培養基營養成分含量應較豐富,以確保一定的營養菌體生長量,能保持生長過程中pH穩定。
將吸收了青黴素的炭放在分離管柱之類的容器內,以蒸餾水及酸性水洗凈,然後用鹼性水沖洗。那麼分劃出來的青黴素便會被分劃在某個部分,濃縮再溶解出來,這就是分離管柱色層分離法。以瓊脂培養基去培養葡萄球菌,進行葯劑感受性測試,就可以將效果顯著的分劃判斷出來。
(3)青黴素可以蒸餾分離嗎擴展閱讀:
青黴素的副作用中,過敏性休克是致命的,常引起人們的注意,而表現為腦病及周圍神經損害的神經毒性作用易被忽略。
必須打消以往認為青黴素只要不過敏,就很少有中毒的觀念,千萬不要大劑量濫用青黴素(包括其它抗生素),必須用時,盡量少用靜脈輸注,老年人、小兒尤應慎用;此外,還須注意,青黴素與氨苄青黴素合用時,更易引起青黴素腦病的發生。
㈣ 青黴素是用什麼造的
天然青黴素
青黴素G生產可分為菌種發酵和提取精製兩個步驟。①菌種發酵:將產黃青黴菌接種到固體培養基上,在25℃下培養7~10天,即可得青黴菌孢子培養物。用無菌水將孢子製成懸浮液接種到種子罐內已滅菌的培養基中,通入無菌空;氣、攪拌,在27℃下培養24~28h,然後將種子培養液接種到發酵罐已滅菌的含有苯乙酸前體的培養基中,通入無菌空氣,攪拌,在27℃下培養7天。在發酵過程中需補入苯乙酸前體及適量的培養基。②提取精製:將青黴素發酵液冷卻,過濾。濾液在pH2~2.5的條件下,於萃取機內用醋酸丁酯進行多級逆流萃取,得到丁酯萃取液,轉入pH7.0~7.2的緩沖液中,然後再轉入丁酯中,將此丁酯萃取液經活性炭脫色,加入成鹽劑,經共沸蒸餾即可得青黴素G鉀鹽。青黴素G鈉鹽是將青黴素G鉀鹽通過離子交換樹脂(鈉型)而製得。
半合成青黴素
以6APA為中間體與多種化學合成有機酸進行醯化反應,可製得各種類型的半合成青黴素。
6APA是利用微生物產生的青黴素醯化酶裂解青黴素G或V而得到。酶反應一般在40~50℃、pH8~10的條件下進行;近年來,酶固相化技術已應用於6APA生產,簡化了裂解工藝過程。6APA也可從青黴素G用化學法來裂解製得,但成本較高。側鏈的引入系將相應的有機酸先用氯化劑製成醯氯,然後根據醯氯的穩定性在水或有機溶劑中,以無機或有機鹼為縮合劑,與6APA進行醯化反應。縮合反應也可以在裂解液中直接進行而不需分離出6APA。
㈤ 怎麼提取青黴素
天然青黴素
青黴素G生產可分為菌種發酵和提取精製兩個步驟。①菌種發酵:將產黃青黴菌接種到固體培養基上,在25℃下培養7~10天,即可得青黴菌孢子培養物。用無菌水將孢子製成懸浮液接種到種子罐內已滅菌的培養基中,通入無菌空氣、攪拌,在27℃下培養24~28h,然後將種子培養液接種到發酵罐已滅菌的含有苯乙酸前體的培養基中,通入無菌空氣,攪拌,在27℃下培養7天。在發酵過程中需補入苯乙酸前體及適量的培養基。②提取精製:將青黴素發酵液冷卻,過濾。濾液在pH2~2.5的條件下,於萃取機內用醋酸丁酯進行多級逆流萃取,得到丁酯萃取液,轉入pH7.0~7.2的緩沖液中,然後再轉入丁酯中,將此丁酯萃取液經活性炭脫色,加入成鹽劑,經共沸蒸餾即可得青黴素G鉀鹽。青黴素G鈉鹽是將青黴素G鉀鹽通過離子交換樹脂(鈉型)而製得。
半合成青黴素
以6APA為中間體與多種化學合成有機酸進行醯化反應,可製得各種類型的半合成青黴素。
6APA是利用微生物產生的青黴素醯化酶裂解青黴素G或V而得到。酶反應一般在40~50℃、pH8~10的條件下進行;近年來,酶固相化技術已應用於6APA生產,簡化了裂解工藝過程。6APA也可從青黴素G用化學法來裂解製得,但成本較高。側鏈的引入系將相應的有機酸先用氯化劑製成醯氯,然後根據醯氯的穩定性在水或有機溶劑中,以無機或有機鹼為縮合劑,與6APA進行醯化反應。縮合反應也可以在裂解液中直接進行而不需分離出6APA。
㈥ 青黴素粉劑可以用蒸餾水溶解嗎
口服的話可以,如果是注射應採用滅菌注射用水溶解。