『壹』 電動車硅膠電池可以加蒸餾水嗎具體怎麼加
電動車冬季電池,是膠體電解液。沒有硅膠電池。
這種免維護電池,不可以加(蒸餾)水。
只有濕式電池,根據溫度不同,調整電解液(硫酸 蒸餾水 按照一定比重配比 )才可以添加蒸餾水。
『貳』 瓊脂糖電泳用什麼水配緩沖液
C 解析: 用電泳緩沖液溶解瓊脂糖,如TAE:Tris-乙酸、Tris-乙酸-CDTA。這樣就能保證膠中的離子濃度與電泳液中的離子濃度相同,在電場中活動一致。
『叄』 在進行瓊脂糖凝膠電泳前,用什麽溶液來溶解瓊脂糖 A蒸餾水 B自來水 C緩沖液 D甘糖溶液
C
『肆』 配置瓊脂糖膠時,可以用蒸餾水和高濃度的TAE液嗎
1.用蒸餾水將制膠工具洗干凈 准備好制膠平板 用瓊脂將模具邊緣封閉 架好梳回子
2.根據要分離的答樣品(DNA)大小配製合適濃度的瓊脂凝膠 准確的稱取一定量的瓊脂糖乾粉 加入到合適體積的錐形瓶中 加入一定量的電泳緩沖液(30ml左右TAE) 放入到微波爐內加熱融化 冷卻片刻(不燙手即可)
3.融化後的瓊脂溶液搖晃混勻 倒入電泳槽中 等其凝固
4.室溫下凝固30-40min左右 小心的拔出梳子 取出凝固好的凝膠放入電泳槽內 准備上樣
5.在電泳槽中倒入電泳緩沖液(TAE)沒過膠面1mm左右 去除膠孔內的氣泡
6.上樣 5ulDNA樣品加入1ul上樣緩沖液(loading buffer)和1ul的染料 用搶混勻後加入到凝膠孔內
.上樣結束 接通電源 紅色正極 黑色負極 DNA樣品有負極往正極運動 加樣孔側為負 40-50v電壓 電壓30敏左右即可(< 40min)
8.電壓結束 關閉電源 凝膠成像儀上觀察電壓位置並比對marker判斷大小
『伍』 聚丙烯醯胺凝膠電泳雙蒸水的使用
去離子水一般在電泳之後 剛把凝膠分離的時候 先用去離子水沖洗三次 然後再放入固定液 然後再用去離子水清洗三次 然後放入染色液 然後用去離子水清洗三次 一般就用這三次
『陸』 跑SDS-PAGE的電泳緩沖液需要什麼水來配製
1.配製電泳試劑用水蒸餾水就可以了就是單蒸水,如果條件允許的話,可以只用更好的當然純水是最好了;
2.一般實驗室都會有蒸餾水,雙蒸水,其實雙蒸水就能滿足大多數實驗室的要求,純水才是所謂的去離子水
『柒』 你知道變性聚丙烯醯胺凝膠電泳的那個膠是怎麼配置的需要哪些必備葯品還有用水平電泳可以嗎
我把我們實驗室的實驗講義發給你,供你參考。
你做的應該是蛋白質的電泳吧,只能用垂直電泳。水平電泳用於分離DNA或RNA。
實驗十一 SDS-PAGE檢測表達蛋白
1.目的
學習SDS-PAGE的基本操作,學會用SDS-PAGE檢測蛋白。
2.原理
蛋白質在加熱變性以後與SDS結合,帶上負電荷,在電場的作用下,向正極移動,結果按分子量大小排列在膠板上,含量多的蛋白帶紋粗。
3.器材
旋渦混合器,微量移液取樣器,移液器吸頭,1.5ml 微量離心管,雙面離心管架,台式冷凍離心機,製冰機,超聲波破碎儀,電磁爐,電泳儀,垂直電泳槽及配套的玻璃和密封條、梳子等,搖菌試管,三角燒瓶,接種環,飯盒。
4.試劑
SDS(十二烷基磺酸鈉),Acr(丙烯醯胺),Bis(N,N』-亞甲基雙丙烯醯胺),Tris(三羥甲基氨基甲烷),甘氨酸,鹽酸,Aps(過硫酸氨),TEMED(四甲基乙二胺),蛋白分子量標准(97.4,66.2,43,31,20.1,14.4 kDa),溴酚藍,甘油,冰醋酸,乙醇,b-2-巰基乙醇,考馬斯亮藍R250,甲醇,乙醇。
5.實驗准備
1.0mol/L Tris HCl,pH8.8(4°C保存);0.5mol/L Tris HCl,pH6.8(4°C保存);10%SDS(室溫保存);30%Acr/Bis(30g Acr+0.8g Bis dd water 定容至100mL,4°C保存);10%Aps (-20°C保存);2´上樣緩沖液(0.5mol/L Tris HCl,pH6.8 2mL,甘油2mL,20%SDS 2mL,0.1%溴酚藍 0.5mL,b-2-巰基乙醇 1.0mL,dd water 2.5mL,室溫存放);5´電泳緩沖液(Tris 7.5g ,甘氨酸36g,SDS 2.5g,加dd water至500mL,使用時稀釋五倍);考馬斯亮藍染色液(考馬斯亮藍R250 0.25g + 45ml甲醇+10mL冰醋酸,用dd water定容至100mL);脫色液(95%乙醇:冰醋酸:水= 4.5:0.5:5,體積比);
6.操作步驟
(1) 將表達後的菌體與2´上樣緩沖液按1:1混勻於微量離心管中。
(2) 用超聲波破碎儀脈沖10次,每次10秒。中間間隔時放入冰中降溫。注意一定要將超聲波探頭插入容液底部,在溶液表面或上部時容易起泡!
(3) 將上述微量離心管插入水漂中,放在電磁爐鍋里的沸水中煮3~5min。然後立即插入冰中。(可在-20°C冰櫃中保存)。
(4) 組裝電泳玻璃並用細橡膠管密封底部和側面然後用夾子夾住(觀察教師的演示)。插入梳子後在玻璃上距離梳子齒底部1cm的地方做一個標記。
(5) 配製10%分離膠。按順序和量取下列溶液混在一個50mL的小燒杯中(注意Tris為 pH8.8):
Acrylamide-bis 3.96 mL
1M Tris PH8.8 4.38 mL
d.d Water 3.432 mL
10% SDS 118.8 mL
TEMED 9.9 mL
10%APS 118.8 mL
(6) 加完APS後拿起燒杯輕輕轉動幾下底部將溶液混勻後,立刻緩緩倒入玻璃夾縫中,直到液面與所作的標記齊平。剩下的膠液留在小燒杯中,傾斜放置。然後在上部用1000ml微量移液器輕輕地沿玻璃壁來回移動加滿dd water(盡可能不破壞下面的膠液)。然後靜置30min。直到燒杯中剩餘的溶液凝固。倒出蒸餾水,並倒置玻璃盡可能將水倒盡。
(7) 配支持膠。按順序和量(注意體積單位!)取下列溶液混在一個50mL的小燒杯中(注意Tris為 pH6.8):
Acrylamide-bis 0.675 mL
0.5M Tris pH6.8 0.563 mL
dd water 3.165 mL
10% SDS 45 mL
TEMED 7.5 mL
10% APS 45 mL
(8) 加完APS後拿起燒杯輕輕轉動幾下底部將溶液混勻後,立刻倒入玻璃夾縫中,液面與玻璃上邊緣齊平。然後再慢慢插入梳子,靜置約20min。燒杯中剩下的溶液傾斜放置直到溶液凝固。(此狀態可以用塑料薄膜包起來放入冰箱過夜)。
(9) 小心拔出梳子以後,用注射器針頭(剪平尖部)吸取梳子齒形成的加樣槽中的水,並修平加樣槽底部的膠面。
(10) 選取幾個形態好的加樣槽,在一張紙上做好對應的標記,用微量移液器在側面的一個加樣槽中加入20mL 蛋白分子量,其它槽中加入10~20mL自己製作的樣品。
(11) 加完樣品後,再用微量移液器吸取電泳緩沖液小心把加樣槽液面都補平。電泳槽上部倒滿電泳緩沖液(約250ml,淹沒過加樣槽的液面!),電泳槽的下部倒入一半電泳緩沖液(約180ml)。
(12) 接好電極,將電流調至10mA,待溴酚藍移到分離膠後,在將電流調至18mA,電泳約2~3h,期間隨時觀察電泳槽上部的液體是否有泄漏(泄漏導致液面下降,電流中斷)!當溴酚藍移到玻璃距底部0.5cm時切斷電源。
(13) 在一個搪瓷盤里准備適量的考馬斯亮藍染色液。
(14) 倒掉電泳槽中的緩沖液,取下玻璃,小心用鏟子從下部將帶有缺口的玻璃板撬起(切不可損壞膠!)。用鏟子切去上部的支持膠,並把分離膠從玻璃上剝離倒染液搪瓷盤里(切不可損壞膠!)。
(15) 染色2h後,在將染液倒回瓶子里以備重復使用。在飯盒裡倒入脫色液,過夜。
(16) 觀察脫色後膠里的藍色帶紋,與對照比較或尋找異常粗的帶紋,並比較其分子量,判斷是否是預期的基因產物。
(17) 清理桌面,寫實驗報告。
『捌』 做聚丙烯醯胺凝膠電泳制膠時能用蒸餾水代替去離子水嗎
可以,沒問題的。
『玖』 為什麼不可以用蒸餾水配置瓊脂糖凝膠
因為配置的瓊脂膠主要要求是達到無菌。因此普通的蒸餾水就不合適了。要採用無菌水來進行配置。這樣可以防止配置好的瓊脂中不會產生雜菌。