㈠ 多糖分离纯化—离子交换层析和柱层析
多糖，与蛋白质一样，对生命过程起着关键作用，其复杂结构直接决定了其特性和功能。要深入理解多糖，分离纯化步骤至关重要。其中，离子交换层析和凝胶层析是常用的手段。
离子交换层析在多糖纯化中应用广泛，其根据多糖特性，选择合适的阳离子、阴离子或硼砂交换剂，如DEAE cellulose、DEAE Sephadex（葡聚糖）、DEAE Sepharose（琼脂糖）系列。以DEAE cellulose-52为例，它作为阴离子交换柱，其填料二乙氨乙基纤维素带有正电荷，能有效分离中性和酸性多糖，如果胶，通过盐溶液洗脱，中性糖先被洗脱，阴离子多糖随后。通过检测洗脱液糖含量，形成洗脱曲线，实现不同多糖的分离。
相比之下，凝胶层析则侧重于分子量的分离。其原理是利用分子筛特性，大分子先流出，小分子后流出，如Sephadex G系列填料，如G-15、G-25用于寡糖分离，G-100和G-200则适用于大分子多糖。通过观察洗脱曲线，可以精确收集不同分子量的样品。