『壹』 常用灭菌方法有哪些
常用灭菌方法主要包括：高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法、化学试剂灭菌法及过滤除菌法。
以下是对这几种灭菌方法的详细解释：
高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌法是最常用的灭菌方法之一。该方法利用高温高压的蒸汽环境，使微生物内部的酶活性破坏，从而达到灭菌的目的。这种方法适用于多种医疗用品的消毒，如敷料、器械等。其优点在于效果可靠，操作相对简便。
干热灭菌法
干热灭菌法主要是通过高温烘烤或灼烧的方式，使微生物蛋白质变性凝固，从而达到灭菌效果。此方法适用于一些耐高温的物体或设备的灭菌，如实验室中的玻璃器皿、金属器械等。但操作时需要特别小心，避免烫伤和火灾风险。
湿热灭菌法
湿热灭菌法是通过加热并增加物体内部压力，使微生物在较高的温度和压力下迅速死亡。这种方法常用于药品、生物制品等的生产过程中的灭菌操作。与高压蒸汽灭菌法相比，湿热灭菌法的温度通常较低，但对物品的湿度控制较为严格。
化学试剂灭菌法
化学试剂灭菌法是通过化学消毒剂的作用，破坏微生物的细胞结构或代谢过程，达到灭菌目的。常用的化学消毒剂包括酒精、过氧化氢等。这种方法适用于一些不耐高温的物品的消毒，但需要注意选择合适的消毒剂，避免对物品造成损害。
过滤除菌法
过滤除菌法是一种通过过滤介质去除液体中的微生物的方法。此方法常用于制药工业中无菌产品的生产，特别是针对一些小分子物质的除菌操作。通过选择合适的滤膜和过滤设备，可以有效地去除液体中的微生物，保证产品的无菌性。
以上就是常用的灭菌方法及其简要解释。不同的灭菌方法适用于不同的场景和物品，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的灭菌方法。
『贰』 请问制备培养基时如何过滤除菌
1、灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种，高压除菌及.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比，高压灭菌的工作强度小，成本较低，但易造成营养成分的流失，而且在多次加样（无菌谷氨酰胺溶液，无菌碳酸氢钠溶液等）过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1～0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌，并且已成为培养基除菌的发展方向，它可低限度地减少培养基的营养损失。
1.1 高压灭菌
某些培养基（如MEM）可进行高压灭菌，例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，一般是在培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺。
可高压灭菌的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失，不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果，灭菌设备的验证很关键。
1.2 过滤灭菌
可供过滤灭菌使用的滤膜很多，其材料多为polyethersulphone（PES）、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。一般情况下采取正压过滤，正压过滤较之负压过滤具有流速高、过滤快、不易污染，可避免蛋白质产生大量气泡等优点。一般使用过滤器可参照各供应商的产品说明书。
目前大多数实验室和制药企业采用微孔滤膜滤器（如Zeiss滤器）或立式微孔滤器（Millipore、Pall）除菌。微孔滤膜滤器为不锈钢，中间可夹放0.22um滤膜。使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。如在使用Zeiss滤器时，先要用培养用水将滤膜充分润湿，在安装滤膜时可在其上放置一层定性滤纸再固定。消毒时旋钮不要扭太紧，凡与空气接触部位都要包好（可用牛皮纸、纱布、无纺布等）；高压灭菌后，在无菌环境中立即将旋钮扭紧。过滤除菌结束后，要打开滤器，检查滤膜是否完整，如果滤膜破裂，需重新进行过滤除菌过程。立式微孔滤器可以选用不同的微孔滤柱体积，因为滤膜的折叠，膜面积显著增大，液体处理量大，而且不容易发生堵塞现象。