Ⅰ 大豆异黄酮的工艺路线
为了使ISO与其它非异黄酮成分分开，以期得到高纯度的ISO和ISO中的相关单体化
合物，有必要对ISO的粗提物进一步分离纯化。目前ISO的纯化方法主要有传统柱色
谱法、大孔吸附树脂法、高速逆流色谱法、固相萃取、膜分离技术等。 2.1 传统柱色谱法
硅胶柱、聚酞胺柱及葡聚糖凝胶柱色谱在分离纯化中药有效成分中广泛应用，它
们同样也可用于大豆异黄酮的分离纯化。姚开等比较了这三种不同柱层析法对ISO
主要单体的分离效果，采用300～400目硅胶，用氯仿和甲醇以5:1的混合溶液洗脱
可使染料木苷、大豆苷、染料木素和大豆素4种单体组分分离；采用聚酰胺柱层析
时，用不同浓度的甲醇洗脱，可得到极性较大的结合型ISO，含量分别为85．3%的
大豆苷和87.0%的染料木苷；采用LH-20葡聚糖凝胶柱，用90%甲醇作洗脱剂，可得
到含量高达95%以上的大豆苷和染料木苷。徐德平等分别对ISO进行乙酸乙酯和正丁
醇萃取后，将乙酸乙酯部分进行硅胶柱层析，用氯仿、乙醇梯度洗脱，可得到大豆
素和染料木素；将正丁醇部分进行Sephadex LH-20柱层析，用甲醇、水洗脱，可得
到大豆苷和染料木苷。但实验中都需要反复上柱，操作较为烦琐。在ISO的体内代
谢研究中，也可应用传统柱色谱法富集后检测，Satu-Maarit等应用Sephadex LH-
20对ISO的体内代谢产物进行纯化，检测到原形大豆异黄酮和其新的代谢产物。
2.2 大孔吸附树脂法
由于采用硅胶柱层析和葡聚糖凝胶柱层析时，多使用有毒性的有机溶剂且操作过程
较为复杂，因此目前大多选择大孔吸附树脂柱层析来分离纯化ISO，它具有选择性
好、解吸容易、无毒、无污染等优点。潘廖明等比较了9种不同型号的弱极性大孔
吸附树脂对ISO的吸附性能。研究表明LSA-8型树脂对ISO具有较好的选择性和解吸
能力，该树脂在35℃时，对ISO有较好的吸附效果，其动态最大吸附量为204.6 mg
/g干树脂，采用70%乙醇溶液解吸5 h，ISO的含量达到57.0%，比原来提高了4.8倍
。郭文勇等研究了采用大孔吸附树脂分离、纯化淡豆豉中ISO的工艺，比较了7种大
孔树脂对大豆素的吸附性能，结果表明，905型大孔吸附树脂对大豆素的吸附性能
优于其它，在pH＝5.0，温度为室温时，大豆素得率大于
8％。
2.3高速逆流色谱法
高速逆流色谱法(HSCCC)是一种不需固态载体的液液分配色谱技术，该技术与传
统方法比较具有分离效率高、操作简便、可避免因不可逆吸附而引起的样品损失等
无可比拟的优
点，因此已被广泛应用于天然产物有效成分的分离制备当中。目前在HSCCC中用来
对ISO中各成分进行分离的溶剂体系有氯仿-甲醇-水（4:3:2，v/v），主要用于分
离制备极性较小的异黄酮，如glycitein、daidzein、acetylgenistin、acetylda
idzin;氯仿-甲醇-正丁醇-水（4:3:0.5:2, v/v）主要用于分离制备极性稍大的异
黄酮，如genistin、glycitin、daidzin;而genistin和glycitin,则可使用甲基叔
丁基醚-四氢呋喃-0.5%三氯醋酸-水（2:2:0.15:4，v/v）的溶剂体系分离得到。也
有报道，使用正己烷-乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-醋酸-水（12:1:1:5:1，v/v）的溶剂
体系，可从3 g ISO粗提物中一次分离得到203 mg daidzin, 241 mg genis-tin，
158mg 6"-0-malonyldaidzin，135mg 6"-0-malonyl-genistin，纯度均在90%以上
，以上表明HSCCC
适合于ISO中各单体成分大规模的生产制备。
2.4 固相萃取
固相萃取（SPE）技术是由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来的预处
理技术，用SPE可以有效地将分析物与干扰组分分离，Mauricio等对大豆样品进行
了固相萃取，并将样品在8种不同SPE填料中进行了回收率比较，结果显示，使用S
trata X填料，ISO中各成分回收率最高，平均回收率为99.37%，并且具有污染小、
可处理小
体积试样等优点，可用于大豆产品中异黄酮的分离纯化。但SPE具有多步操作、样
品前处理时间较长等缺点。固相微萃取（SPME）是集采样、萃取和富集于一体的新
的样品前处理方法，该方法样品用量少，灵敏度高。Mary等采用固相微萃取与高效
液相色谱联用技术对生物样品中的大豆素和染料木素进行了检测，并讨论了测定模
式、萃取头、萃取时间、解吸时间等对萃取效率的影响。结果发现:使用CW-TPR的
效果最好，萃取5 min、解吸6 min时
即达到检测要求，大豆素和染料木素的最低检测限分别为25.4 pg/mL和2.70 pg/m
L,均低于使用其它方法测得的检测限浓度。可见，SPME可用于生物样品中微量ISO
成分的分离纯化。
2.5 膜分离技术
膜分离技术(MS)是近年来迅速崛起的一项新技术，它作为一种新的分离纯化和浓缩
方法，具有耗能低、分离效率高、无二次污染、工艺简单等优点。Lei等采用超滤
和渗滤相结合的方法从豆制品加工废液中回收ISO，超滤技术将蛋白质等大分子物
质截留，使ISO等低分子物质和盐类随水分子一起透过膜孔，结合渗滤技术后，使
ISO的纯度和收率提高，再通过反渗透技术将ISO浓缩，最终ISO的回收率可以达到
50%以上。本方法也可以用于从脱脂大豆产品中回收ISO。
3 结语
天然产物的提取方法正向着操作简便、高效率、无污染的方向发展。ME、SE、SFE
、HSCCC、MS、SPE等技术为ISO的提取、分离及纯化提供了有力的手段。随着现代
新型技术的涌现，天然产物中的ISO成分将更进一步的被人们所认知并加以开发利
用。
技术的确是花样繁多，但是目前的国内生产水平来看，大多数生产者都会选择成本
较低的技术，一些成本较高的技术设备的添置尚需实力和金钱说话。
Ⅱ 膜分离技术可以完成糖类物质分离吗
到现在为止膜分离技术暂时不可以完成糖类物质分离。
可以完成糖类物质分离的方法： 分步沉淀法、柱层析法、阴离子交换法、凝胶色谱法、大孔树脂柱色谱、超滤法
先将糖类物质提取出来
分步沉淀法
多糖的结构和分子量不同，其极性大小不同，在有机溶剂（如醇或酮）中的溶解度不同，根据这一原理，可以依次增加醇浓度，从而将多糖按分子量从大到小的沉淀出来。仍需要借助柱层析法等进一步纯化，方可得到均一性的多糖。
柱层析法
要获得均一性的多糖，一般是先经过阴离子交换柱进行粗步纯化，然后再用凝胶柱进一步纯化。有些多糖也采用大孔树脂柱进行纯化。下面对这三种柱层析法进行详细介绍。
阴离子交换法
一般使用阴离子交换柱对真菌、藻类和高等植物的多糖进行初步分离。阴离子交换色谱常用的介质有DEAE-纤维素、DEAE-琼脂糖凝胶、DEAE-葡萄糖凝胶。
凝胶色谱法
凝胶色谱法根据被分离组分尺寸大小与凝胶的孔径关系实现分离，类似于分子筛的作用。常用的凝胶有葡聚糖凝胶（SephadexG）、Sephadex LH-20、聚丙烯酸凝胶Toyopearl HW等。多糖的进一步分离往往会选择用各种凝胶进行分离纯化。
大孔树脂柱色谱
大孔树脂柱色谱是利用大孔树脂的选择性吸附作用和分子筛作用分离纯化多糖。比如用AB-8大孔树脂从青钱柳叶中分离纯化出均一性多糖。
超滤法
超滤是以压力为推动力的膜分离技术，应用膜分离原理将小分子溶质和溶剂除去而留下大分子溶质，从而使大分子物质得到纯化。
Ⅲ 怎样提取那么小的病毒
提取小病毒的方法可以用超滤法：
1、超滤法的关键是超滤膜，可以简单理解为孔径极小的筛子。
2、当含有病毒的溶液通过超滤膜时，病毒就被留在了筛子上，而溶质和小分子物质如各种无机盐等就被滤过了，之后再拿一定体积的液体把病毒从筛子上溶解下来，就实现了浓缩。
要求获取的浓缩病毒大分子杂质含量很低时，就可以选择超离法超速离心了：
超速离心简单说，就是利用变态的重力把含病毒溶液里的病毒甩下来。
在病毒纯化时,常用的方法是密度梯度离心法：
1、首先，在离心管中按浓度低至高配置离心介质
2、然后放到变态离心机里高速甩俩小时候，要分离的样品里的物质就按密度排列在离心管里了。这时再按密度取出需要的条带并重新溶解就好了。
Ⅳ 求黄芩提取物的具体提取方法，水提还是醇提，说具体点，可以加分哦
黄芩提取方法有水提取酸沉淀法、超声法、超滤法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等，而常用的为水提取酸沉淀法，但水提取存在黄芩有效成分提取不完全、提取出的杂质较多等缺点。采用液-液双向萃取法提取黄芩有效成分[3]，并与常用的水提法进行比较|：
提取方法
1、液-液双向萃取 精密称取黄芩药材粉末约5g，以煮沸的pH=2的磷酸缓冲液30mL烫过，冷却至38℃左右接入液-液双向萃取仪中。从回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3处，a瓶浸入38℃左右的油浴中，b瓶进行加热搅拌，使乙酸乙酯形成回流。回流提取四小时后收集乙酸乙酯液，于旋转蒸发仪上回收乙酸乙酯，得药材提取物备用。
2、普通方法提取 精密称取黄芩药材粉末约5g，提取三次，第一次以10倍量沸水烫过煎煮2小时，第二、三次分别加8倍量水进行煎煮、每次1小时，合并煎液，滤过，滤液加2mol/L盐酸（80℃）调节pH值至2保温1小时，静置24小时，滤取沉淀，用水洗至pH5.0，继用70%乙醇洗涤至pH7.0，低温干燥，即得。
3.样品测定 样品提取物中加入少量70%乙醇微热使溶解，转入100 mL容量瓶中，超声溶解30min，以70%乙醇定容，滤过，弃去初滤液，精密吸取5.0mL续滤液以70%乙醇定容于50 mL量瓶中,精密吸取1.0 mL置于25mL容量瓶中，加入20mL0.2mol/L盐酸，再加70%乙醇至刻度，摇匀。于276nm波长处测定吸光度。
Ⅳ 蛋白质的分离方法有哪些它们各依据蛋白质的什么性质或特点
（一）水溶液提取法
稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解.提取的温度要视有效成份性质而定.一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间.但另一方面,温度升高会使蛋白质变性失活,因此,基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作.为了避免蛋白质提以过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等）.
下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择.
1、pH值
蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH
范围内.用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液.
2、盐浓度
稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用.同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔.升浓度为宜.缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液.
（二）有机溶剂提取法
一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶,不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂,它们具的一定的亲水性,还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液.但必须在低温下操作.丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越,一是因为丁醇亲脂性强,特别是溶解磷脂的能力强；二是丁醇兼具亲水性,在溶解度范围内（度为10%,40度为6.6%）不会引起酶的变性失活.另外,丁醇提取法的pH及温度选择范围较广,也适用于动植物及微生物材料.
二、蛋白质的分离纯化
蛋白质的分离纯化方法很多,主要有：
（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法
1、蛋白质的盐析
中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶；当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子（如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之“失水”,于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出.盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好.由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样,因此调节混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀.
影响盐析的因素有：（1）温度：除对温度敏感的蛋白质在低温（4度）操作外,一般可在室温中进行.一般温度低蛋白质溶介度降低.但有的蛋白质（如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白）在较高的温度（25度）比0度时溶解度低,更容易盐析.（2）pH值：大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低.（3）蛋白质浓度：蛋白质浓度高时,欲分离的蛋白质常常夹杂着其他蛋白质地一起沉淀出来（共沉现象）.因此在盐析前血清要加等量生理盐水稀释,使蛋白质含量在2.5-3.0%.
蛋白质盐析常用的中性盐,主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等.
其中应用最多的硫酸铵,它的优点是温度系数小而溶解度大（25度时饱和溶液为4.1M,即767克/升；0度时饱和溶解度为3.9M,即676克/升）,在这一溶解度范围内,许多蛋白质和酶都可以盐析出来；另外硫酸铵分段盐析效果也比其他盐好,不易引起蛋白质变性.硫酸铵溶液的pH常在4.5-5.5之间,当用其他pH值进行盐析时,需用硫酸或氨水调节.
蛋白质在用盐析沉淀分离后,需要将蛋白质中的盐除去,常用的办法是透析,即把蛋白质溶液装入秀析袋内（常用的是玻璃纸）,用缓冲液进行透析,并不断的更换缓冲液,因透析所需时间较长,所以最好在低温中进行.此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐,所用的时间就比较短.
2、等电点沉淀法
蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用.
3、低温有机溶剂沉淀法
用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨力比盐析高,但蛋白质较易变性,应在低温下进行.
（二）根据蛋白质分子大小的差别的分离方法
1、透析与超滤
透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开.
超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质.
2、凝胶过滤法
也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一.柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶（Sephadex
ged）和琼脂糖凝胶（agarose gel）.
（三）根据蛋白质带电性质进行分离
蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开.
1、电泳法
各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开.值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,到达各自等电点的pH位置就停止,此法可用于分析和制备各种蛋白质.
2、离子交换层析法
离子交换剂有阳离子交换剂（如：羧甲基纤维素；CM-纤维素）和阴离子交换剂（二乙氨基乙基纤维素；DEAE?FONT
FACE="宋体"
LANG="ZH-CN">纤维素）,当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来.（详见层析技术章）
（四）根据配体特异性的分离方法－亲和色谱法
亲和层析法（aflinity
chromatography）是分离蛋白质的一种极为有效的方法,它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且纯度很高.这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体(Ligand）的分子能特异而非共价地结合.其基本原理：蛋白质在组织或细胞中是以复杂的混合物形式存在,每种类型的细胞都含有上千种不同的蛋白质,因此蛋白质的分离（Separation）,提纯（Purification）
和鉴定（Characterization）是生物化学中的重要的一部分,至今还没的单独或一套现成的方法能移把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来,因此往往采取几种方法联合使用.
细胞的破碎
1、高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度.此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等.
2、玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织.
3、超声波处理法：用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施.对超声波敏感和核酸应慎用.
4、反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.
5、化学处理法：有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好.
无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取.
浓缩、干燥及保存
一、样品的浓缩
生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩.常用的浓缩方法的：
1、减压加温蒸发浓缩
通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩.
2、空气流动蒸发浓缩
空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液,表面不断通过空气流；或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室,用电扇对准吹风,使透过膜外的溶剂不沁蒸发,而达到浓缩目的,此法浓缩速度慢,不适于大量溶液的浓缩.
3、冰冻法
生物大分子在低温结成冰,盐类及生物大分子不进入冰内而留在液相中,操作时先将待浓缩的溶液冷却使之变成固体,然后缓慢地融解,利用溶剂与溶质融点介点的差别而达到除去大部分溶剂的目的.如蛋白质和酶的盐溶液用此法浓缩时,不含蛋白质和酶的纯冰结晶浮于液面,蛋白质和酶则集中于下层溶液中,移去上层冰块,可得蛋白质和酶的浓缩液.
4、吸收法
通过吸收剂直接收除去溶液中溶液分子使之浓缩.所用的吸收剂必需与溶液不起化学反应,对生物大分子不吸附,易与溶液分开.常用的吸收剂有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝胶等,使用聚乙二醇吸收剂时,先将生物大分子溶液装入半透膜的袋里,外加聚乙二醇复盖置于4度下,袋内溶剂渗出即被聚乙二醇迅速吸去,聚乙二醇被水饱和后要更换新的直至达到所需要的体积.
5、超滤法
超滤法是使用一种特别的薄膜对溶液中各种溶质分子进行选择性过滤的方法,不液体在一定压力下（氮气压或真空泵压）通过膜时,溶剂和小分子透过,大分子受阻保留,这是近年来发展起来的新方法,最适于生物大分子尤其是蛋白质和酶的浓缩或脱盐,并具有成本低,操作方便,条件温和,能较好地保持生物大分子的活性,回收率高等优点.应用超滤法关键在于膜的选择,不同类型和规格的膜,水的流速,分子量截止值（即大体上能被膜保留分子最小分子量值）等参数均不同,必须根据工作需要来选用.另外,超滤装置形式,溶质成份及性质、溶液浓度等都对超滤效果的一定影响.Diaflo
超滤膜的分子量截留值：
膜名称分子量截留值孔的大的平均直径
XM－300300,000140
XM－200100,00055
XM－5050,00030
PM－30 30,00022
UM－2020,00018
PM－1010,00015
UM－21,00012
UM05500 10
用上面的超滤膜制成空心的纤维管,将很多根这样的管拢成一束,管的两端与低离子强度的缓冲液相连,使缓冲液不断地在管中流动.然后将纤维管浸入待透析的蛋白质溶液中.当缓冲液流过纤维管时,则小分子很易透过膜而扩散,大分子则不能.这就是纤维过滤秀析法,由于透析面积增大,因而使透析时间缩短10倍.
二、干燥
生物大分子制备得到产品,为防止变质,易于保存,常需要干燥处理,最常用的方法是冷冻干燥和真空干燥.真空干燥适用于不耐高温,易于氧化物质的干燥和保存,整个装置包括干燥器、冷凝器及真空干燥原理外,同时增加了温度因素.在相同压力下,水蒸汽压随温度下降而下降,故在低温低压下,冰很易升华为气体.操作时一般先将待干燥的液体冷冻到冰点以下使之变成固体,然后在低温低压下将溶剂变成气体而除去.此法干后的产品具有疏松、溶解度好、保持天然结构等优点,适用于各类生物大分子的干燥保存.
三、贮存
生物大分子的稳定性与保存方法的很大关系.干燥的制品一般比较稳定,在低温情况下其活性可在数日甚至数年无明显变化,贮藏要求简单,只要将干燥的样品置于干燥器内（内装有干燥剂）密封,保持0－4度冰箱即可,液态贮藏时应注意以下几点.
1、样品不能太稀,必须浓缩到一定浓度才能封装贮藏,样品太稀易使生物大分子变性.
2、一般需加入防腐剂和稳定剂,常用的防腐剂有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等.蛋白质和酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等,如酶也可加入底物和辅酶以提高其稳定性.此外,钙、锌、硼酸等溶液对某些酶也有一定保护作用.核酸大分子一般保存在氯化钠或柠檬酸钠的标准缓冲液中.
3、贮藏温度要求低,大多数在0度左右冰箱保存,有的则要求更低,应视不同物质而定.