『壹』 超滤法提取外泌体的原理和操作要点是什么
外泌体是细胞分泌的一种微小囊泡，具有重要的生物学功能。超滤法是提取外泌体的常用方法之一，以下是其原理和操作要点：
原理
超滤法是利用超滤膜对不同大小分子进行选择性分离的技术。超滤膜具有一定的孔径范围，当含有外泌体的生物样品通过超滤膜时，小于膜孔径的物质如小分子代谢物、盐离子、缓冲液等可以自由通过膜孔，而外泌体的粒径通常在 30 - 150nm 之间，大于超滤膜的孔径，因此被截留在膜的一侧，从而实现外泌体与其他杂质的分离和浓缩。
操作要点
样品准备
确保生物样品的新鲜度，尽量减少外泌体的降解和聚集。例如，对于血液样本，应在采集后尽快离心分离血清或血浆，并避免反复冻融。
对样品进行预处理，如过滤或低速离心，以去除细胞碎片、大的蛋白质聚集体等杂质，防止它们堵塞超滤膜。
选择合适的超滤膜
根据外泌体的大小和特性，选择具有合适孔径的超滤膜。一般来说，截留分子量为 100 - 300kDa 的超滤膜较为常用，对应的孔径可有效截留外泌体。
考虑超滤膜的材质，如聚醚砜（PES）、再生纤维素等，材质应具有良好的生物相容性、化学稳定性和低蛋白吸附性，以减少对外泌体的吸附和破坏。
超滤操作
将预处理后的样品加入到超滤装置中，注意避免气泡的产生，因为气泡可能会影响超滤效果并导致外泌体损失。
选择合适的超滤方式，如搅拌式超滤或切向流超滤。搅拌式超滤适用于小体积样品，通过搅拌可以减少浓差极化现象；切向流超滤则更适合大规模样品的处理，能有效提高超滤效率和膜的使用寿命。
控制超滤的压力和流速，避免过高的压力导致外泌体变形或破裂。一般来说，操作压力应控制在 0.5 - 2 bar 之间，流速根据具体装置和样品体积进行调整。
在超滤过程中，可适时补充缓冲液或生理盐水，以维持样品的渗透压和体积，防止外泌体因浓缩过度而发生聚集。
外泌体收集和保存
超滤完成后，小心收集截留在外泌体浓缩液，避免污染。
如需长期保存，应将外泌体浓缩液分装成小份，避免反复冻融，可在 - 80℃冰箱中保存。同时，可加入适量的保护剂如甘油、BSA 等，以稳定外泌体的结构和功能。
在整个超滤法提取外泌体的过程中，要严格遵守无菌操作原则，防止微生物污染，同时注意操作的温和性，以保持外泌体的完整性和生物学活性。
『贰』 平压式超滤膜比外压式超滤膜优势大吗
平压式超滤膜与外压式超滤膜
1.可去除各种原水中污染物的外压超滤膜。它回还具有极强答的物理耐久性和耐化学腐蚀性能。
2.采用特殊的制造方法制成，可提供高过滤通量，并能针对不同水源稳定运行，并在正常工作条件下确保高完整性和耐用性。
3.超滤膜元件具有盘管结构，中空结构，独特的排气端盖设计，较宽的通道网格，确保膜元件具有更高的抗冲击性，抗污染性能。
超滤膜过滤的优点如此之多，相信很多人都不知道。