1. 血清是怎么提炼出来的
血清是血液沉降之后把血细胞分离开的上层清液。
你可以采血后把血液放进离心管中，1500~2000r/min，去上层清液就是血清！
2. 如何获取血清问题
serum，血清，详细资料见网络http://ke..com/view/42775.htm?fr=aladdin
先纠错，红细胞是血细胞而非生物大分子。
严格的讲，添加了抗凝剂的血液在高速离心机离心后得到的上清液为血浆而非血清，前者与后者相比含有多种凝血因子比如纤维蛋白原或纤维蛋白。离心的方法可以使血液分层，使血细胞（红细胞、白细胞）、血液中的其他成分（血小板、血浆清蛋白、球蛋白等）沉淀于管底，从而获取新鲜血浆。血清可以用离心新鲜胶冻状血凝块获得。
常用的注射器过滤器一般是0.46um和0.22um两种规格，可以过滤掉部分细菌、液体中的杂质等，理论上可以通过过滤方式得到血浆，但实际上没人这么做——因为红细胞直径为6~9um很快就能堵塞过滤器滤孔，使得过滤没法进行；手术中自体血液回输机的过滤不同于普通的注射器过滤器。
综上所述，用注射器过滤得到的血浆和离心机获得的差异不大，但注射器过滤基本上是不可能实现的。
3. 怀疑血清染菌，想用滤膜过滤一下，可否自己用0.22μm滤膜过滤
0.22μm滤膜可以除去细菌的。不会影响其他成分。但是如果有细菌分泌物（比如毒素），则不能去除。建议更换。
4. 请问细胞培养中胎牛血清过滤的详细步骤,
胎牛血清买回来先化开，然后56度半小时灭活，在正常过滤就行。如果你用一次性滤器，内那就先准备容20或50ml的注射器，用注射器抽取，拔掉针头，再把一次性滤器插入注射器出口，把滤出的血清放灭过菌的容器就行，我一般放50ml离心管中，用时也方便，否则血清反复冻融不好，也容易染菌。
5. 细胞培养基加了血清后还可以过滤么
1、血清要做灭活处理；
2、灭活后的血清要经过.45和.22虑膜过滤；
3、培养基是不可以紫回外照射的。
还要答注意一点的是血清一般不推荐直接过滤除菌的，如果怀疑血清染菌，过滤时要把血清按比例加入到培养液中，然后才可以过滤除菌！！
6. 全血分离获得血清的方法及步骤 谢谢
材料与方法
1.1 血清采集 MG患者全血来自～2005年就诊于辽宁中医学院附属医院的门诊患者。根据典型临床表现、新斯的明试验、低频重复电刺激及单纤维肌电图等确诊，无其他自身免疫性疾病，未经其他免疫抑制治疗，并参照1994年版《中医病证诊断疗效标准》辨证为脾肾虚型。正常人血清取自同时期健康志愿者。-70 ℃冰箱冷冻保存备用。
1.2 主要试剂 固相pH梯度干胶条IPG strip（Amersham公司产品， 非线性pH 3～10， 7 cm）。3-〔3-（胆酰胺基丙基）二甲氨基〕丙磺酸盐｛3-〔（3-cholamidopropyl） dimethylamino〕-1-propanesul-fonate， CHAPS｝，二硫苏糖醇（DL-dithiothreitol， DTT），三丁基膦（tributyl phosphine， TBP），尿素，硫脲，碘乙酰胺（iodoacetamide， IAA），丙烯酰胺（acrylamide）、甲双丙烯酰胺（N， N'-methylenebi-sacrylamide），四甲基乙二胺（N， N， N， N-tetram-ethyl-ethylenediamine， TEMED），过硫酰胺（am-monium persulfate， APS），三羟甲基氨基甲烷〔tris （hydroxymethyl） aminomethane〕、甘氨酸（glycine， Gly）和十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfate， SDS）均为Bio-Rad公司产品。琼脂糖为华美生物公司产品。其他试剂均使用国产分析纯试剂。所有溶液均用MilliQ水配制。
1.3 主要仪器 高速冷冻离心机，德国Eppendorf公司产品;EttanTMIPGphorⅡ，Amersham Biosci-ences公司产品;P-2000分光光度仪，Hitachi公司产品;SE-600电泳仪，Amersham公司产品;纯水装置，Millipore公司产品;GS-710光密度扫描仪，Bio-Rad公司产品;冷却水循环系统，Cole-Parmer公司产品;Bruker-Daltonics AutoFlex TOF-TOF LIFTMass Spectrometer，美国Bruker-Daltonics公司产品;LCQ Deca XP Plus，美国Thermo Finnigan公司产品。
1.4 双向电泳
1.4.1 血清总蛋白质的提取及定量 血清-70 ℃反复冻融4次后，用Agilent Multiple Affinity Re-moval Column处理去除高丰度蛋白。使用Agilent 5K超滤管进行浓缩除盐，冻干回收的样品，-70 ℃保存。用裂解液（9 mol/L 尿素、4% CHAPS、 65 mmol/L DTT和cocktail酶抑制剂）进行复溶，并采用考马斯亮蓝法进行蛋白质定量。
1.4.2 等电聚焦 自-20 ℃取出的胶条，室温下平衡10 min，以500 μg上样量在每份样本中加入上样缓冲液（8 mol/L尿素、2% CHAPS、1% Bio-lyte和1% TBP）以及标准蛋白质分子，上样于泡胀槽中，加入矿物油覆盖。程序设置如下:30 V 12 h，500 V 1 h，1 000 V 1 h，8 000 V 6 h。恒温20 ℃。等电聚焦电泳后IPG胶条在平衡液1（Tris-base 50 mol/L 、尿素 6 mol/L、甘油 30%、SDS 2%、溴酚蓝0.002%和DTT 100 mg）中于振荡器上振荡 15 min; 然后置入平衡液2（成分同平衡液1，用 400 mg 碘乙酰胺代替100 mg DTT）同样于振荡器上振荡15 min。
1.4.3 SDS-PAGE垂直电泳 采用12.5%的均匀SDS2聚丙烯酰胺凝胶（水23.2 ml，30%丙烯酰胺溶液32.46 ml，1.5 mol/L Tris-HCl缓冲液pH 8.8 20 ml，10% SDS 0.8 ml，10% APS 0.4 ml，TEMED 3.76 μl，胶总体积80 ml）。将平衡后的IPG胶条移至凝胶的上方，胶条一端放入低分子量蛋白质标准，0.5%的琼脂糖封胶。上下槽加入电极缓冲液（Tris 5 mmol/L，Gly 192 mmol/L和SDS 0.1%）。初始电流为每块胶40 mA，电泳20 min，然后以每块胶60 mA电流，直至溴酚蓝前沿。
1.4.4 银染色 电泳结束后，采用硝酸银染色法，通过固定，硝酸银染色，显影，停显及脱色，至背景清晰。
1.5 图像分析 每个样品常规进行3次二维电泳，用GS-710光密度扫描仪对电泳后的胶图分别进行扫描，所得扫描图像输入计算机，采用Image-master软件对图像进行背景消减、蛋白质点检测和校正，获取蛋白质点的位置坐标和表达量等分析。选取 Ratio ≥1.5的蛋白质点认为有差异。所有数据的统计分析均采用SPSS 12.0软件，统计学分析采用 t 检验。
1.6 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析 用手术刀片切下胶上目标条带，进行切胶、胶上胰蛋白酶酶解 20 h ，抽提酶解肽段，Zip Tip脱盐后点样，行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry， MALDI-TOF-MS）分析（飞行管长2.7 m，加速电压 20 kV ，反射电压23 kV）。将第1级质谱得到的肽片段质量指纹图谱、肽质量指纹图谱与第2级质谱得到的肽序列信息一起用来检索蛋白质数据库，找出匹配的蛋白质。
1.7 数据库检索 将质谱鉴定所得的肽质量指纹谱（peptide mass fingerprinting， PMF）数据于Bio-Works（Thermo Finnigan， San Jose， CA）软件搜索相应的库。搜索使用的数据库为IPI human蛋白库（SEQUEST结果过滤参数为:当Charge+1，Xcorr≥1.9;当Charge+2，Xcorr≥2.2;当Charge+3，Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1）以及NCBI上 Homo sapiens的非冗余蛋白库（rendant data-base）。检索参数为胰蛋白酶解;氨基酸固定修饰方式为脲甲基半胱氨酸;模式为单同位素峰;肽片断最大误差控制在100 ppm;肽片断最大分子量误差为±0.5 Da;每个肽允许有1个不完全裂解位点。
2 结果
2.1 脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱 的建立及分析 经2-DE技术及银染色后，得到了两组血清的双向凝胶电泳图，并于相同的条件下重复实验3次。在正常对照组细胞蛋白质组双向电泳图谱上可观察到1 463±179个蛋白点，而脾肾虚型重症肌无力组可见到1 508±89个蛋白点
7. 如何在血清中提取DNA
.dna提取的几种方法
(1).浓盐法
利用rnp和dnp在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1m
氯
纳提取化钠抽提,得到的dnp粘液与含有少量辛醇的
氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而dna位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将dna
钠盐沉淀出来.
也可用0.15
mnacl液反复洗涤细胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取dna
时,加入适量去污剂,如sds可有助于蛋白质与dna
的分离。在提取过程中为抑制组织中的dnase对dna
的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15mnacl,0.015m柠檬钠,并称ssc溶液,提取dna.
（2）.阴离子去污剂法:
用sds或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取dna
.由于细胞中dna与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取dna.
（3）.苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了dnase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与dna
联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而dna溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含dna
的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀dna
。此时dna是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的dna保持天然状态
.
（
4）.水抽提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去rna，然后将沉淀溶于水中，使dna充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6m.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%
٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得dna样品.此法提取的dna中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入sds.
8. 细胞培养时，为什么勿直接过滤血清
买来的就已经过滤过除菌了，如果污染了直接扔掉吧，血清过滤起来很费劲的
9. 如何用活性炭处理的血清
我找到的方法如下“
1 活性炭使用前先用预冷的消毒水洗两遍
2 用0.5%右旋糖苷T70配置5%的活性炭悬浮液
3 与血清同体积混合
4 1000g 离心10分钟
5 吸取上清（一部分血清与活性炭颗粒混合）
6 56℃，30分钟，每分钟4次混合这些混合物
7 1000g 20分钟离心这些悬液
8 重复离心两次，取上清液
9 0.22um滤器过滤，-20冻存
但是右旋糖苷T70价格很让人心疼啊，而且我就用一次。
10. 血清怎么从血里分离
人体的血液由有形成分和无形成分组成，白血球、红血球、血小板是有形成分，血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小板等有形成分，血清为去除纤维蛋白原后的无形成分，颜色微黄，透亮。
血清的基本成分是水，水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分，也溶有人体代谢产物。血清中有抗体，这是被称作免疫球蛋白的蛋白质。
你说的应该称抗毒血清。
因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子、马血管内，每日慢慢加大注射量，一定时间后，因该动物体内产生抗体，经检测，达到一定效价后，就可以抽血。血液分离血清后再经提纯，就成了抗毒血清。
如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备，用来治疗相应毒素反应。
该生物制剂是异种血清，对人会有过敏反应，注射前均要做皮试。阴性可注射，阳性必需作脱敏疗法才行。