细胞培养基过滤装置

『壹』 请问制备培养基时如何过滤除菌

1、灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种，高压除菌及.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比，高压灭菌的工作强度小，成本较低，但易造成营养成分的流失，而且在多次加样（无菌谷氨酰胺溶液，无菌碳酸氢钠溶液等）过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1～0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌，并且已成为培养基除菌的发展方向，它可低限度地减少培养基的营养损失。
1.1 高压灭菌

某些培养基（如MEM）可进行高压灭菌，例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，一般是在培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺。
可高压灭菌的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失，不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果，灭菌设备的验证很关键。
1.2 过滤灭菌
可供过滤灭菌使用的滤膜很多，其材料多为polyethersulphone（PES）、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。一般情况下采取正压过滤，正压过滤较之负压过滤具有流速高、过滤快、不易污染，可避免蛋白质产生大量气泡等优点。一般使用过滤器可参照各供应商的产品说明书。
目前大多数实验室和制药企业采用微孔滤膜滤器（如Zeiss滤器）或立式微孔滤器（Millipore、Pall）除菌。微孔滤膜滤器为不锈钢，中间可夹放0.22um滤膜。使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。如在使用Zeiss滤器时，先要用培养用水将滤膜充分润湿，在安装滤膜时可在其上放置一层定性滤纸再固定。消毒时旋钮不要扭太紧，凡与空气接触部位都要包好（可用牛皮纸、纱布、无纺布等）；高压灭菌后，在无菌环境中立即将旋钮扭紧。过滤除菌结束后，要打开滤器，检查滤膜是否完整，如果滤膜破裂，需重新进行过滤除菌过程。立式微孔滤器可以选用不同的微孔滤柱体积，因为滤膜的折叠，膜面积显著增大，液体处理量大，而且不容易发生堵塞现象。

『贰』 细胞培养滤器一次可滤多少培养基

单纯培养基的话，大概300ml吧，我感觉，我们是加血清的培养基然后才滤的，所以不一样，加20%血清的基本上120ml就得换

『叁』 细胞培养瓶密封盖和过滤盖的区别

Corning
和Costar
细胞培养瓶有多种规格和多种瓶盖类型可提供,以满足用户的不同需求.由高质量的原生聚苯乙烯(PS)制作,表面经过TC处理,促进细胞的贴壁生长,生产批号可追踪,100%通过完整性检测,无热原,均为无菌包装.
密封盖(Plug
seal
caps)：Corning经典瓶盖类型.一次成形不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性；旋松瓶盖时也可用于开放培养.
聚酯盖(Phenolic
style
caps)：常用于开放培养(需要旋松瓶盖).只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换.
透气盖(Vent
caps)：瓶盖带有0.2μm疏水滤膜,提供无菌气体交换,减少污染的风险.常用于开放培养,推荐用于CO2培养箱培养,尤其适用于需要长期培养的实验.
隔垫盖(Septum
caps)：隔垫带有预切割口,可承受多次穿插.可使用吸嘴(或者5ml以下规格的移液管)穿插隔垫进行加液、吸液或者收获细胞,减少污染的机会,维持RoboFlask
培养瓶封闭无菌的环境
直颈(Straight
neck)：直颈的设计可减少培养基因晃动而流到瓶里.
斜颈(Canted
neck)：易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体.是Corning公司经典的设计.
角度颈(Angled
caps)：移液管或者细胞刮易于进入瓶身,并且可减少培养基因晃动而流到瓶盖.
三角形(Triangular
and
modified
triangular)：移液管或细胞刮更易达到瓶角,宽底增加稳定性.
矩形(Rectangular)：斜颈的矩形培养瓶瓶底至瓶颈是一个坡度设计,易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体,大部分斜颈瓶都有一个裙边以增加稳定性.直颈和角度颈的矩形培养瓶整个瓶底都是培养面,节省空间并减少培养基因晃动而流到瓶盖.
RoboFlask
培养瓶(RoboFlask
vessels)：微孔板尺寸的培养瓶,兼容自动操作的培养系统,92.6cm2生长面积.

『肆』 细胞培养过滤培养基和PBS时所用的0.22的滤膜是水膜还是有机膜或者是混合膜

0.22um除菌滤膜有多种不同的材质，常用的有醋酸纤维素、聚醚砜、PVDF、聚四氟乙烯、尼龙等。若过滤水溶液的滤膜为疏水材质，滤膜表面一般有一层亲水配体。过滤细胞培养基常用的滤膜材质为醋酸纤维素和聚醚砜。希望对你有帮助。GOOD LUCK :)

『伍』 细胞培养基用过滤器是304材质还是316材质

304和316都可以，大多企业的纯化水管道都是304材质，国外进口过滤器一般为316材质。

『陆』 细胞培养液过滤器有哪些规格的

有40um 70um 和100um的 实验室用的40um百千生物的 挺好的

『柒』 哪家公司的正压过滤器好用呢，主要用于细胞培养基的过滤

用于过滤培养基之类的量小就用一次性膜式滤器。
量大的话一般都用是专不锈钢的膜式滤器。
你网络一属下不锈钢滤器，或者打电话给仪器公司都会有的，进口的质量会好点，国产的其实也能用，哪个公司的都差不多，只是你用的时候注意流速压力。