㈠ 怎么用离子交换层析分离等电点分别为4，6，7， 9 的蛋白质
6．洗脱：用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02M
Tris-HCL
缓冲液
pH7.4(内含0.
等电聚焦电泳
（IEF）分离蛋白及测定
蛋白质等电点
一、原理
等电点聚焦
（IEF）
㈡ 离子交换 稳定性 等电点 强弱作用 为什么用
等电点（pI,isoelectric point）
例如：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及回程度相等，所带净电答荷为零，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。
两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。
㈢ 用离子交换剂测定蛋白质的等电点时,为什么一定要用强性离子交换剂
选用纤维素离子交换剂抄。因为蛋白质不能扩散到树脂的链状结构中，而纤维素离子交换剂交换容量大。选用ph为5.0的磷酸盐缓冲溶液和强酸型阳离子交换剂如SE-纤维素。装柱氢氧化钠处理，0.1mol/L起始缓冲液平衡，上样，吸附目标蛋白，0.15mol/L缓冲液洗脱，之后再选用ph6.5,8.0的缓冲液梯度洗脱。等电点=4.0的蛋白质在5.0缓冲液中带负电，不能被吸附，直接分离。随后6.0的蛋白质被洗脱出来。再用ph6.5,8.0的缓冲液梯度洗脱。
㈣ 求设计一用离子交换法分离蛋白质的试验方案.
你的目标蛋白是什么抄？五中蛋白中应该只有一种才是目的蛋白，其余是杂质啊
例如阴离子交换介质吸附的是阳离子，即蛋白质处于一个PH比其自身等电点低的环境中。
装柱 氢氧化钠处理 磷酸盐缓冲液平衡 上样 吸附目标蛋白 流穿峰出现 磷酸盐缓冲液洗脱 不同离子强度的氯化钠洗脱（分段、梯度）
收集 检测蛋白质纯度含量等
㈤ 为什么将牛磺酸提纯时调成等电点ph=5再过离子交换树脂
是因为氨基酸各种成分的等电点不同,调节PH值时,可以改变不同氨基酸的带内电形式,使其在离子容交换树脂上的吸附分配能力变化,从而进行氨基酸的分离纯化.在PH为5的时候,可以分离纯化出98%以上的牛磺酸晶体.
㈥ 某种蛋白质，其等电点为6.4，利用其电离性质，可采用哪些方法将其分离纯化
蛋白质等电点为6.4
利用其电离性质，一般采用的就是离子交换层析。
当环境pH大于6.4时（比6.4高1到1.5个单位），理论上此时该蛋白质可以结合阴离子交换层析，比如Q或者DEAE。
当环境pH小于6.4时（比6.4低1到1.5个单位），理论上此时该蛋白质可以结合阳离子交换层析，比如SP或者CM。
可以通过阴阳离子交换层析组合使用分离纯化出该蛋白
需注意结合离子交换层析都是理论情况，因为实际结构的问题可能会和理论值有偏差，要通过具体实验结果分析。
㈦ 离子交换怎么试验
离子交换法是一种借助于离子交换剂上的离子和废水中的离子进行交换反应而除去废水中有害离子的方法。离子交换是一种特殊吸附过程，通常是可逆性化学吸附；其特点是吸附水中离子化物质，并进行等电荷的离子交换。
离子交换剂分无机的离子交换剂如天然沸石，人工合成沸石，及有机的离子交换剂如磺化煤和各种离子交换树脂。
在应用离子交换法进行水处理时，需要根据离子交换树脂的性能设计离子交换设备，决定交换设备的运行周期和再生处理。通过本实验希望达到下述目的：
1) 加深对离子交换基本理论的理解；学会离子交换树脂的鉴别；
2) 学会离子交换设备操作方法；
3) 学会使用手持式盐度计，掌握pH计、电导率仪的校正及测量方法。
二、实验内容和原理
由于离子交换树脂具有交换基因，其中的可游离交换离子能与水中的同性离子进行等当量交换。 用酸性阳离子交换树脂除去水中阳离子，反应式如下：
nRH + M+n → RnM + nH+
M——阳离子 n——离子价数
R——交换树脂
用碱性阴离子交换树脂除去水中的阴离子，反应式如下：
nROH + Y−n → RnY + nOH-
Y——阴离子
离子交换法是固体吸附的一种特殊形式，因此也可以用解吸法来解吸，进行树脂再生。
本实验采用自来水为进水，进行离子交换处理。因为自来水中含有较多量的阴、阳离
子，如Cl¯， NH4+，Ca，Mg，Fe，Al，K，Na等。在某些工农业生产、科研、医疗卫生等工作中所用的水，以及某些废水深度处理过程中，都需要除去水中的这些离子。而采用离子交换树脂来达到目的是可行的方法。
㈧ 某蛋白质等电点为8.14,如采用离子交换色谱法来纯化,如何选择填料和缓冲体系
我的话，第一步会选择pH7.0-7.4左右过阴离子交换，让大多数杂蛋白（大多数杂蛋白pI在6左右）、核酸、色素等杂质结合，收集流穿液，此时蛋白溶液的纯度和澄清度会大大提高，再校pH7.0或更低pH过阳离子交换进行纯化。讲究一点的话，在缓冲选择上可以区分一下阴阳离子缓冲，多数情况影响不大，不必纠结。
㈨ 设计一个利用阴离子交换柱纯化一个等电点为7.5的蛋白质的实验
既然是抄阴离子交换，就要让目标蛋白带负电，那么缓冲液PH就要大于等电点。缓冲体系的选择也很重要，一般用TRIS-HCl，特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液，否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白。一般用NaCl平衡后上样进行离子交换，然后再用较强的阴离子洗脱。
㈩ 请问：等电点是10.9,ph缓冲溶液是8,应该选择什么离子交换分离
PH比等电点低，带正电，应该选择阳离子交换