先装部分液体吗,然后倒入色谱填料(色谱调料配置成悬浮液),倒的时候注意液面在填料上面,防止产生气泡。色谱柱可以适当放液,增加填料的沉积速度
② 色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱
阳离子是指功能基团,有很多选择,强阳弱阳;基质又有多种,主要可分为硅胶和聚合物,聚合物种类比较多,如PSDVB,聚甲基丙烯酸酯等。
③ 强阳离子交换(SCX)色谱柱与以强阳离子交换键和硅胶为填充剂的柱子有什么区别
强阳离子交换(SCX)色谱柱与以强阳离子交换键和硅胶为填充剂的柱子有什么区别
④ 离子交换色谱柱和离子排阻色谱柱分离物质原理的区别
色谱过程的本质是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程,不同的物质在两相之专间的分配属会不同,这使其随流动相运动速度各不相同,随着流动相的运动,混合物中的不同组分在固定相上相互分离。根据物质的分离机制,又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。 吸附色谱利用固定相吸附中心对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离,吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程
⑤ 聚合物填料色谱柱适合分离什么样品
液相色谱柱的分类:(按色谱固定相基质分)
一.硅胶基质:
1.反相色谱柱:
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
2.正相色谱:
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
3.离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)
二 .聚合物基质:
聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
三.其他无机填料:
其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,
氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。
但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。
⑥ 磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂的色谱柱有吗
原理:
离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。
装置:
(1)分离柱 装有离子交换树脂,如阳离子交换树脂、阴离子交换树脂或螯合离子交换树脂。为了减小扩散阻力,提高色谱分离效率,要使用均匀粒度的小球形树脂。最常用的阳离子交换树脂是在有机聚合物分子(如苯乙烯-二乙烯基苯共聚物)上连接磺酸基官能团(─SO3─)。最常用的阴离子交换剂是在有机聚合物分子上连接季铵官能团(─NH4)。这些都是常规高交换容量的离子交换树脂,由于它们的传质速度低,使柱效和分离速度都低。C.霍瓦特描述了一种薄膜阴离子交换树脂,它是在苯乙烯-二乙烯基苯共聚物核心上沉淀一薄层阴离子交换树脂,就象鸡蛋有一薄层外皮那样,离子交换反应只在外皮上进行,因此缩短了扩散的路径,所以离子交换速度高,传质快,提高了柱效。同样,在小颗粒多孔硅胶上涂一薄层离子交换材料也可得到相同类型的树脂。螯合离子交换树脂具有络合某些金属离子而同时排斥另一些金属离子的能力,因此这种树脂具有很高的选择性。除了离子交换柱外,其他高效液相色谱柱也可用于分离离子。
(2)抑制柱和柱后衍生作用 常用的检测器不仅能检测样品离子,而且也对移动相中的离子有响应,所以必须消除移动相离子的干扰。在离子色谱中,消除(抑制)移动相离子干扰的常用方法有两种。
①抑制反应,用抑制反应来改变移动相,使移动相离子不被检测器测出。离子色谱通常使用电导检测器。在抑制反应中??缍匝衾胱佣?裕?把高电导率移动相的氢氧化物转变成水,而样品离子则转变成它们相应的酸:
NaOH+H+─→Na++H2O
NaX+H+─→HX+Na+
在装有强酸性阳离子交换树脂的柱中进行抑制反应,使用一段时间后,这种树脂就需要再生,很不方便。改用连接有磺酸基(─SO3H)的离子交换膜(阳离子交换膜)或用连接有铵基(─NH4)的离子交换膜(阴离子交换膜),就可以连续进行抑制反应。例如,阳离子交换膜可使阳离子通过它扩散过去,而阴离子则不能扩散过去。
1981年,T.S.史蒂文斯和斯莫尔等报道了中空纤维抑制法。这种纤维是由阳离子交换膜材料拉制而成。用这种方法不仅不需要再生抑制柱而且减小了峰的加宽,提高了柱效。一种比较新的膜技术是加一电场以加速离子的传递,该法与中空纤维法比较,其优点是反应时间短、交换能力高,并且可以用于阳离子和阴离子两者。
②柱后衍生作用,将从柱子流出的洗出液与对被测物有特效作用的试剂相混合,在一反应器中生成带色的络合物(见配位化合物)。对衍生试剂最重要的要求是它们与被测物能生成络合物,但不与移动相生成络合物。柱后衍生法能用于测定重金属离子,所用的衍生试剂有茜素红S等。
(3)检测器 分为通用型和专用型。通用型检测器对存在于检测池中的所有离子都有响应。离子色谱中最常用的电导检测器就是通用型的一种。紫外-可见分光光度计是专用型的检测器,对离子具有选择性响应。可变波长紫外检测器与电导检测器联用,能帮助鉴定未知峰,分辨重叠峰和提供电导检测器不能测定的阴离子,如硫化物及亚砷酸中的阴离子的检测。
在离子色谱中,电导检测法总是和抑制反应配合使用。这种检测器对分子不响应,如水、乙醇或者不离解的弱酸分子等。对于电导检测器,一个重要的条件是温度要稳定,所以检测池要放在恒温箱中,1982年H.萨托设计一种双示差电导检测器,消除了温度变化对检测的影响,可测定10-9摩尔的阴离子。
应用:
离子色谱主要用于测定各种离子的含量,特别适于测定水溶液中低浓度的阴离子,例如饮用水水质分析,高纯水的离子分析,矿泉水、雨水、各种废水和电厂水的分析,纸浆和漂白液的分析,食品分析,生物体液(尿和血等)中的离子测定,以及钢铁工业、环境保护等方面的应用。离子色谱能测定下列类型的离子:有机阴离子、碱金属、碱土金属、重金属、稀土离子和有机酸,以及胺和铵盐等。
⑦ 液相色谱C18色谱柱特点及相关参数
GP-C18 Bio-C18 Amethyst(紫晶) 色谱柱-美国赛分-sepax-北京康农兴牧
常规用途分析型液相色谱柱 >> 反相液相色谱柱(RPLC)介绍:
GP-C18色谱柱(GP-C8,GP-C4详见产品手册) •方法开发的首选柱,
•高度可控的单分子层形成和封尾技术
•高的柱间重现性
•高的选择性和分离效率
•适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多药物、多肽等
•推荐使用有机溶剂或有机溶剂/水体系的流动相
可替代Symmetry C18、LunaTMC18、Symmetry Shield RP18、LunaTMDiscoveryTMC18、Zorbax Eclipse XDB C18、Inertsil ODS-2 ODS-3、SupelcosilTMLC-18-DB、Kromasil C18、lTSKgel ODS-100Z
GP-C18以全覆盖的键合硅胶为填料,具有优异的稳定性。独特的单官能团化学键合技术可避免形成复合的C18分子层。均匀的涂层确保了固定相具有高选择性和高效率的分离特点。
GP-C18填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(<10ppm金属杂质)
孔径:120Å
粒径:1.8、2.2、3、4、5、7和10µm
孔体积:1.0mL/g
比表面积:300m²/g
固定相结构:单层全封尾
碳载量:17%
PH值范围:2-11
HP-C18色谱 柱
•可使用100%的水相做流动相
•高度可控的单分子层形成和封尾技术
•高的柱间重现性
•高的选择性和分离效率
•适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多药物、多肽等
可替代AquasilC18、ArlantisTM、Zorbax SB-Aq SynergiHydro-RP、HydroBondPS C18、HydroBond AQ、UltraAqueous C18、ProntoSIL C18 AQ、YMC-Pack ODS-AQ、EliteSino ChromODSBP TSKgelODS100V HP-C18填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(<10ppm金属杂质)
孔径:120Å / 200Å(用于大分子)
粒径:3、4、5、7、10µm / 3、5、10µm
孔体积:1.0mL/g
比表面积:300m²/g /200m²/g
固定相结构:单层全封尾
碳载量:17% / 10%
PH值范围:2.0-9.0
BR-C18色谱柱
•高度可控的单分子层形成和封尾技术
•高的柱间重现性
•高的选择性和分离效率
•宽的pH适用范围1.5-10.5
•适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多多肽和蛋白等
可替代Zorbax Extend C18 Vydac218TP C18; ;Jupite300 C18 BR-C18填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(<10ppm金属杂质)
孔径:120Å
粒径:3、5和10µm
孔体积:1.0mL/g
比表面积:350m²/g
固定相结构:单层全封尾
碳载量:19.5%
PH值范围:1.5-10.5
Bio-C18色谱柱
Bio-C18填料有200和300Å两种孔径规格,适合于肽段的指纹图谱识别,天然和人工合成多肽以及低分子量蛋白等的分离。所采用的化学键合技术可以确保ODS单分子层不会在纯水溶液中发生塌陷。
•高度可控的单分子层形成和封尾技术
•高的柱间重现性
•高的选择性和分离效率
•可使用纯水作为流动相
•适合分离多肽、蛋白以及许多药物等
可替代XterraC18;XbridgeC18 Bio-C18填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(<10ppm金属杂质)
孔径:200Å / 300Å
粒径:3、4、5和10µm / 3和5µm
孔体积:1.0mL/g / 0.95mL/g
比表面积:200m²/g / 105m²/g
固定相结构:单层全封尾
碳载量:10% / 7%
PH值范围:2.0-9.0
Amethyst(紫晶) P分析型液相色谱柱
通用型C18,推荐中药分离选择此柱。
• 采用高度可控的单官能团键合和封尾技术
• 高的柱间重现性
• 高的选择性和分离效率
• 可在pH 1.5-9.0范围内使用
• 适合分离许多药物分子以及多肽等
• 可用100%水作为流动相
Amethyst C18-P填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(金属杂质<10ppm)
孔径:120Å
粒径:3、5和10µm
孔体积:1.0mL/g
比表面积:300m²/g
固定相结构:单官能团全封尾
碳载量:20.0%
pH值范围: 1.5-9.0
Amethyst(紫晶) H分析型液相色谱柱
Amethyst C18-H 一般用途C18 ,推荐西药如抗生素药的分离选择此柱。
• 采用高度可控的单分子层形成和封尾技术
• 高的柱间重现性
• 高的选择性和分离效率
• 最高可耐受pH值至11
• 可在pH 1.5-10..5范围内使用
• 适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及多肽和蛋白等 Amethyst C18-H填料技术参数
硅胶:球形,高纯度(金属杂质<10ppm)
孔径:120Å
粒径:3、5和10µm
孔体积:1.0mL/g
比表面积:350m²/g
固定相结构:三官能团单分子层全封尾
碳载量:19.0%
pH值范围: 1.5-10.5
Sapphire(宝石)分析型液相色谱柱
Sapphire C18 复杂样品的分离
• 采用高度可控的单分子层形成和封尾技术
• 高的柱间重现性
• 对疏水和亲水化合物都具有高选择性和分离效率
• 与其它C18填料相比具有更大的比表面积,更长的样品保留时间,以及更高的上样量
• 特为碱性化合物如胺类等的分离而设计
• 可用纯水作为流动相
• 适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及许多药物分子和多肽等 Sapphire C18填料技术参数
硅胶: 球形,高纯度(金属杂质<10ppm)
孔径:100Å
粒径:3、5和10µm
孔体积:1.05mL/g
比表面积:450m²/g
固定相结构:单官能团全封尾
碳载量:17.0%
pH值范围: 1.5-9.0
体积排阻柱 SRT-SEC SRT-SEC 可完全替代TSK 凝胶柱。
SRT SEC固定相是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,表面化学键合有一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。该固定相的合成采用赛分公司独有的表面化学键合技术,可确保柱与柱之间的高度重现性。SRT SEC固定相具有高的化学和机械稳定性,与生物分子等之间的非特异性相互作用也很小。孔径规格有100、150、300、500、1000和2000Å,可确保高分离容量分辨率
Nanofilm-SEC Nanofilm-SEC 针对柱容性蛋白,解决TSK 寿命问题的色谱柱,使用寿命更长。
Nanofilm SEC固定相是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,表面化学键合有一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。该固定相的一个特点是可使用低盐浓度,或含有机溶剂的缓冲液作为流动相进行生物样品的分离,并具有高的分辨率和样品回收率。该色谱填料为窄粒径分布的球形硅胶颗粒。孔径规格有150、250、450和950Å。
离子交换柱 硅胶基质 HP-SCX 推荐用于盐酸二甲双胍的分析新康泰克药物的分析
HP-SAX 推荐用于核苷类物质的分析草柑膦的分析
聚合物基质 Proteomix离子交换色谱柱
推荐用于蛋白质、低聚核苷酸和多肽的分离而设计,具有高分辨率、高效率和高回收率的特点。
Sepax 首创1μm颗粒制造技术。专利技术的表面修饰,不但消除固定相与提高了生物分子之间的非特异性互相作用同时有效的无孔填料的吸附容量,从而使色谱柱在应用中具有极高的柱效和回收率
⑧ 色谱柱区别,请问:ODS-C18,C18和RP-C18 区别,价钱大概多少哦
你提的这三个东西,其实都是指一样东西,就是指反相色谱的C18色谱柱。价格大约在1500-3000元一根。
⑨ 液相色谱柱的填料有哪些
液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困专难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔属结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。
北京路达恒宇科技有限公司PLRP-S液相色谱柱刚性聚合物固定相机械强度高,适合酸性/中性/碱性所有化合物,方便再生,恢复原有柱效和压力,保留稳定,重复性好,寿命长。
⑩ 什么叫色谱柱,什么叫离子交换剂,什么叫固定相啊
色谱是利用待抄分离组分在两种萃取剂中的分配比差异来进行分离的。 实际操作中,会把一种萃取剂装填到一根玻璃管或者不锈钢管里,加上待分离组分以后,用另一种萃取剂去洗脱。 这根装有萃取剂的管子就是色谱柱,里面填充的萃取剂因为不会移动,就叫做固定相。聪明的你一定就明白另一种用来洗脱的萃取剂就叫做流动相了。
在离子色谱里不是这么简单的吸附-洗脱过程 ,而是用离子交换的过程来替代,因此用到的就是离子交换剂,其实也是固定相,但是利用的是离子交换速率的差异了。