A. 病毒浓缩，除了低温超离心还有没有别的方法
没有了，你是没有超速离心机吧！这就没办法了
B. 如何使用超速离心机浓缩慢病毒
你好，慢病毒转染细胞的操作步骤如下：
1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。
2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。
3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polybrene。
4、继续培养24小时，用新鲜培养基替换含有病毒的培养基。
5、继续培养。如果慢病毒含有荧光蛋白，一般转染48小时后可见明显荧光表达，72小时后更加明显。如需FACS检测转染效率，可在转染后72-96小时进行。如果慢病毒含有抗性基因并且需要加药筛选，可以在转染3-4天后开始加药。
二、慢病毒转染悬浮细胞实验方法
1、在2×10^5/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒，充分混匀。37℃孵育。或者150g室温离心4小时(选作，部分难转染的细胞系采用此步骤可以提高转染效率)。
2、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后(或离心结束后)加入等体积新鲜培养基以稀释polybrene。
3、继续培养3-4天。中间视细胞生长情况可传代或换液。
C. 超滤浓缩离心管使用前要怎么处理
可能不来同厂家的产品保存运输条源件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。
D. 超滤膜能过滤掉水中的细菌和病毒吗
超滤膜能过滤掉水中的细菌和病毒
超滤膜是一种孔径规格一致，额定孔径范围为0.001-0.02微米版（即权1——20纳米）的微孔过滤膜。在膜的一侧施以适当压力，就能筛出小于孔径的溶质分子，以分离分子量大于500道尔顿、粒径大于2～20纳米的颗粒。
细菌的大小因种类而差别很大，球菌大小以直径表示；杆菌、螺菌用长度和宽度表示。螺菌的长度一般以菌体两端的距离计算，但按螺旋的直径和圈数计算才是螺菌的真正长度。测量细菌大小一般用显微镜测微尺，常用的单位是微米（micrometer，μm，1μm＝10-3mm）。最小的细菌只有0.2微米，最大的可长达80微米，但最常见的多数细菌为：球菌0.5～1微米，杆菌0.2～1.0×0.7～3微米，螺菌0.3～10×1.0～50微米。
病毒比细菌小得多。直径在20～40纳米之间。大的如痘病毒，大小为200×250-350纳米，与小的细菌相近；小的如口啼疫病毒，直径只有22纳米
E. 超滤的工作原理是什么
超滤的工作抄原理
超滤属于袭一种分离技术，将压力专为动力膜分离的过程，过滤的精度在0.01-0.005um的范围之内。它可高效的去除水中的细菌、病毒、悬浮物、胶体等颗粒状物质，已经广泛应用于物质的分离、浓缩、提纯等，效果非常好。同时在PH值为2-11的条件下能够连续的使用。
超滤膜一种孔径规格一致，额定孔径范围为0.001-0.02微米的微孔过滤膜。采用超滤膜以压力差为推动动力的膜过滤方法为超滤膜过滤。超滤膜大多由醋酯纤维或与其性能类似的高分子材料制得。最适于处理溶液中溶质的分离和增浓，也常用于其他分离技术难以完成的胶状悬浮液的分离，其应用领域在不断扩大。
F. 超滤膜可以阻挡病毒吗
超滤膜是一种抄孔径规格一致，额定孔径范围为0.001-0.02微米（即1——20纳米）的微孔过滤膜。在膜的一侧施以适当压力，就能筛出小于孔径的溶质分子，以分离分子量大于500道尔顿、粒径大于2～20纳米的颗粒。
细菌的大小因种类而差别很大，球菌大小以直径表示；杆菌、螺菌用长度和宽度表示。螺菌的长度一般以菌体两端的距离计算，但按螺旋的直径和圈数计算才是螺菌的真正长度。测量细菌大小一般用显微镜测微尺，常用的单位是微米（micrometer，μm，1μm＝10-3mm）。最小的细菌只有0.2微米，最大的可长达80微米，但最常见的多数细菌为：球菌0.5～1微米，杆菌0.2～1.0×0.7～3微米，螺菌0.3～10×1.0～50微米。
病毒比细菌小得多。直径在20～40纳米之间。大的如痘病毒，大小为200×250-350纳米，与小的细菌相近；小的如口啼疫病毒，直径只有22纳米，所以，超滤膜能过滤掉水中的细菌和病毒
G. 超滤膜能过滤掉水中的细菌和病毒吗
一般现在抄采用超滤膜或袭RO膜作为过滤介质的比较多。当然，这两样过滤膜出来的水都是可以达到无菌的，因为他们的过滤孔径都是比细菌小10倍以上，细菌经过膜的时候，是没办法钻过过滤孔的，这个原理就跟家里的蚊帐一样，因为蚊帐的孔一般都小于蚊子，这样蚊子就没办法进入里面，
H. 如何获得浓缩的细菌病毒
细菌可以以无性或者遗传重组两种方式繁殖,最主要的方式是以二分裂法这种无性繁殖的方式：一个细菌细胞细胞壁横向分裂,形成两个子代细胞.并且单个细胞也会通过如下几种方式发生遗传变异：突变（细胞自身的遗传密码发生随机改变）,转化（无修饰的DNA从一个细菌转移到溶液中另一个细菌中）,转染（病毒的或细菌的DNA,或者两者的DNA,通过噬菌体转移到另一个细菌中）,细菌接合（一个细菌的DNA通过两细菌间形成的特殊的蛋白质结构,接合菌毛,转移到另一个细菌）.细菌可以通过这些方式获得DNA,然后进行分裂,将重组的基因组传给后代.许多细菌都含有包含染色体外DNA的质粒.
处于有利环境中时,细菌可以形成肉眼可见的集合体,例如菌簇.
细菌以二分裂的方式繁殖,某些细菌处于不利的环境,或耗尽营养时,形成内生孢子,又称芽孢,是对不良环境有强抵抗力的休眠体,由于芽胞在细菌细胞内形成,故常称为内生孢子.
芽孢的生命力非常顽强,有些湖底沉积土中的芽抱杆菌经500-1000年后仍有活力,肉毒梭菌的芽孢在pH 7.0时能耐受100℃煮沸5-9.5小时.芽孢由内及外有以下几部分组成：
1．芽孢原生质（spore protoplast,核心core）：含浓缩的原生质.
2．内膜（inner membrane）：由原来繁殖型细菌的细胞膜形成,包围芽孢原生质.
3．芽孢壁（spore wall）：由繁殖型细菌的肽聚糖组成,包围内膜.发芽后成为细菌的细胞壁.
4．皮质（cortex）：是芽孢包膜中最厚的一层,由肽聚糖组成,但结构不同于细胞壁的肽聚糖,交联少,多糖支架中为胞壁酐而不是胞壁酸,四肽侧链由L-Ala组成.
5．外膜（outer membrane）：也是由细菌细胞膜形成的.
6．外壳（coat）：芽孢壳,质地坚韧致密,由类角蛋白组成(keratinlike protein),含有大量二硫键,具疏水性特征.
7．外壁（exosporium）：芽孢外衣,是芽孢的最外层,由脂蛋白及碳水化合物(糖类)组成,结构疏松.
I. 【求助】超滤能否脱盐和浓缩一步完成啊
昨天有个millipore的技术人员就是这样说的~HarveyWang(站内联系TA)本人主要是从发酵液中提取酶,文献上一般的步骤是先用硫酸铵沉淀,然后透析,再用超滤浓缩,最后冷冻干燥, 这要看你需要做多大的体积了。:) (1)硫酸铵沉淀法：我的观点是，如果你1000 mL的发酵液的话，硫酸铵沉淀可以用，但是这浪费多少硫酸铵啊？！做学术研究可以，如果你的课题是计划做提取酶的工艺和中试的话，这种硫酸铵沉淀并不有太大的实用性。 （2）超滤步骤的选用要看你的酶溶液有多大的体积。 如果发酵液的酶的量并不是很浓的话，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用这种超滤膜会损失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很难洗下来（稀的NaOH可以）。不能轻信某品牌销售说的话，用用就知道了。如果你的浓缩液体积比较大，例如100-500 mL，酶的浓度也很高，这是可以用超滤膜的。 （3）对于小体积的脱盐透析，透析袋很好用的。这里是指10 mL-100 mL。从操作方便性上看，这个在小型试验中我最喜欢用。好简单啊。。。。 自己顶一个,解答的详细的有重奖!(金币可以再加) （1）发酵液的酶蛋白浓度大约是多少，纯度是多少？发个SDS-PAGE看看，注明上样量。 （2）硫酸铵沉淀后和透析后可上离子交换，这可以浓缩10-1000倍，还可以有纯化效果，然后再冷冻浓缩啊。HarveyWang(站内联系TA)哈哈哈哈，回帖就有金币拿:Ddaidai0124(站内联系TA)本人现在只是小规模的提取酶,马上要上发酵罐,需要大规模的提取酶液,不是做酶学性质,所以酶的纯度要求不高,和工业用酶的纯度差不多就可以了!希望大家推荐个适合工业化提取酶液的工艺,主要考虑成本问题.请版主帮忙在增加悬赏金币20个lvgl158(站内联系TA)起码知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一个膜 如果小于一万可能就有点难度 可以先用少量的硫酸铵澄清 离心后 进行超滤 在超滤前 必须的保证液体 清澈hezhao999(站内联系TA)体积的在200ml以上用超滤仪，200ml以下可以用超滤离心管，如果不知分子量选用1000的膜完全可以了，如果知道分子量，则选择酶分子量1/5的超滤膜。zhaocy8903(站内联系TA)多大规模的发酵 多大规模的发酵
J. 什么是超滤，超滤是如何工作的
超滤是一种膜分离技术，(UItrafil-tration 简称UF)。能够将溶液净化，分离或者浓缩。超滤是介于微专滤与纳滤之间，属且三者之间无明显的分界线。一般来说，超滤膜的孔径在0.05 um–1 nm之间，操作压力为0.1–0.5 Mpa。主要用于截留去除水中的悬浮物、胶体、微粒、细菌和病毒等大分子物质。超滤膜根据膜材料，可分为有机膜和无机膜。按膜的外型，又可分为：平板式、管式、毛细管式、中空纤维和多孔式。
超滤是如何工作的？
超滤膜的工作以筛分机理为主，以工作压力和膜的孔径大小来进行水的净化处理。以中空纤维为例，以进水方式可分为外压式：原水从膜丝外进入，净水从膜丝内制取。反之则为内压式。内压式的工作压力较外压式要低。超滤膜在饮用水深度处理，工业用超纯水和溶液浓缩分离等许多领域中，得到了广泛应用。