1. 配备液体培养基时硫酸亚铁为什么要过滤除菌
硫酸亚铁加热过滤会分解。
FeSO4 =加热= FeS + 2O2↑ 2. FeSO4 =加热= FeO + SO2↑ 3. 2FeSO4 =加热= Fe2O3 + SO2↑+ SO3↑
所以如果用加热除菌的方法,那么硫酸亚铁就在培养基中起不到作用。因此采用过滤除菌的方法。用滤器把杂质和细菌清楚出去,保证无菌状态,也没有破坏硫酸亚铁的成分。
硫酸亚铁的实验室制法:
1、可以用铁粉与稀硫酸反应直接制得。Fe+H2SO4(稀)=H2↑+FeSO4
2、可以用硫酸铜溶液与铁反应获得,反应方程式为:CuSO4+Fe=FeSO4+Cu(此反应类型为置换反应)
2. 细胞培养过滤培养基和PBS时所用的0.22的滤膜是水膜还是有机膜或者是混合膜
0.22um除菌滤膜有多种不同的材质,常用的有醋酸纤维素、聚醚砜、PVDF、聚四氟乙烯、尼龙等。若过滤水溶液的滤膜为疏水材质,滤膜表面一般有一层亲水配体。过滤细胞培养基常用的滤膜材质为醋酸纤维素和聚醚砜。希望对你有帮助。GOOD LUCK :)
3. 在培养基上接种微生物时的 过滤风 是啥,有啥用
一) 实验室要求: 1实验室环境应清洁、卫生、安静,实验室内严禁吸烟和饮食。 2实验人员必须穿戴工作衣帽,工作服经常洗涤、消毒、保持清洁。 3操作前后或离开实验室必须用肥皂或消毒液洗手。 4发生菌液污染台面或地面,应立即用3%甲醛或5%碳酸等消毒液由外向内倾覆其上,1小时后再擦拭,如为破伤风梭菌,则应隔夜后再擦洗。 5工作衣、帽、口罩受到菌液污染时,应立即脱下使污染部位包裹在内部,高压灭菌后再清洗。 6如有传染性培养物污染手部,应先用75%乙醇棉球擦拭,再浸入01新洁尔灭消毒液内泡手,然后再用肥皂及清水彻底洗干净。 7接种环(针),每次使用前后,必须通过火焰灭菌,冷却后方可接种培养物,接种带有蜡质、油质的培养物或菌苔残留多时,不应立即在火焰上灼烧,应先在内焰里将油质培养物烘干后再移至火焰上灭菌,以免活菌外溅污染环境及感染操作者。 8带菌的吸管应浸泡在5%甲酚消毒液内24h后取出清洗,带菌的试管或培养物应在121℃高压灭菌后再取出清洗。 9在接种霉菌、放线菌时应在铺有浸过消毒液的纱布上操作,防止孢子散落传播。 10凡带活菌的物品,必须消毒后才能清洗,严禁污染下水道。 (二) 无菌操作要求: 无菌操作是指在无菌的环境条件下,使用无菌器材,防止微生物污染的操作技术。即保持待检样品在操作时不被污染,又要防止被检的微生物及阳性对照菌在操作中污染环境或感染操作人员。从事无菌及微生物操作的工作人员必须经过无菌技术及基础微生物学专业知识的学习及培训才具备上岗操作的资格,微生物专业检验人员也不应该频繁地变换工作岗位。 1无菌室应每次使用前后用01新洁尔灭消毒液或2%甲醛液擦拭工作台面及可能污染的死角,湿拖地面,打开无菌空气过滤器及超净工作台的开关30分钟,紫外线杀菌灯照射1小时。 2操作人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋,用75%乙醇棉球擦手,穿戴工作衣帽、口罩。将所需物品剥去牛皮纸及外包装,从传递窗移入操作间,再用01新洁尔灭泡手后进入操作间,在乙醇(或煤气灯)火焰区(火焰高度3-5cm)操作。 3供试品表面消毒,如为安瓿先用砂轮划痕后用2%碘酒棉球擦拭,再用75%乙醇棉球擦拭、待干,也可以用消毒液浸泡消毒。
4. 请问制备培养基时如何过滤除菌
1、灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。
1.1 高压灭菌
某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,一般是在培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可高压的谷氨酸盐(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)可代替L-谷氨酰胺。
可高压灭菌的培养基在121℃、15psi,15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失,不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果,灭菌设备的验证很关键。
1.2 过滤灭菌
可供过滤灭菌使用的滤膜很多,其材料多为polyethersulphone(PES)、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。一般情况下采取正压过滤,正压过滤较之负压过滤具有流速高、过滤快、不易污染,可避免蛋白质产生大量气泡等优点。一般使用过滤器可参照各供应商的产品说明书。
目前大多数实验室和制药企业采用微孔滤膜滤器(如Zeiss滤器)或立式微孔滤器(Millipore、Pall)除菌。微孔滤膜滤器为不锈钢,中间可夹放0.22um滤膜。使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。如在使用Zeiss滤器时,先要用培养用水将滤膜充分润湿,在安装滤膜时可在其上放置一层定性滤纸再固定。消毒时旋钮不要扭太紧,凡与空气接触部位都要包好(可用牛皮纸、纱布、无纺布等);高压灭菌后,在无菌环境中立即将旋钮扭紧。过滤除菌结束后,要打开滤器,检查滤膜是否完整,如果滤膜破裂,需重新进行过滤除菌过程。立式微孔滤器可以选用不同的微孔滤柱体积,因为滤膜的折叠,膜面积显著增大,液体处理量大,而且不容易发生堵塞现象。
5. DMEM培养基为什么要通过0.2um微膜过滤
DMEM培养基中含有大量的不耐高压高温的有机物,无法通过温度来灭菌,只能通过过滤除菌,而过滤除菌通常采用0.2微米孔径的过滤膜过滤。
6. 培养基过滤
WC型微孔滤膜使用说明书
本厂用二醋酸——三醋酸纤维素为基材,以流涎法制成微孔滤膜(简称MC滤膜),是现在国内新型的一个品种,它克服了目前常用的硝酸—酸酸混合纤维素微孔滤膜(简称混合滤膜)的质脆、易断裂、有静电吸引、易燃,遇75%以上酒精易膨胀与溶解及在偏碱性溶液中易产生有毒的硝酸根和亚硝酸根等的不足之处。本厂MC滤膜在国内上百家药厂、医院、科研所等广泛用于大输液、针剂及各种溶液精滤,使用效果极佳,澄明度合格率普遍提高。目前该产品畅销全国,深受用户欢迎。同时微孔滤膜不但用于制药业,而且在生物制品、医学微生物学、化工、电子工业、冶金工业、临床化验、酿造、钟表、航空等工业方面超纯水的制备、空气净化、医药用油、润滑、燃料用油及科研实验化验室滤除细菌和微粒方面等将有越来越广泛的推广和应用。
一、 要用途
(1) 医药工业:用于水针剂,大输液及结晶前溶液的微粒和细菌过滤,抗菌素、球蛋白,疫苗血清及组织培养等过滤。
(2) 电子工业:用于半导体器件和集成电路车间的空气净化,制备洗涤用的高纯水质,对溶剂、显影剂、光刻胶等进行净化处理。
(3) 日化工业:用于日用化妆品中含乙醇和油脂类溶液的微粒过滤。
(4) 公共卫生:用于饮水过滤,河塘水质细菌过滤检查、工作地区粉尘微粒过滤检验。
(5) 食品工业:饮料果汁、酒类、油类等的灭菌和悬浮杂质的过滤。
(6) 亦可用于无菌检查——滤膜过滤法及其它科学研究中的分析测定等。
二、 MC型滤膜性能介绍
(1) 孔径均匀:用汞压法测定额定孔径分布均匀,并用放大电镜扫描图象分析,额定孔径基本一致。
(2) 孔隙率高:每平厘米滤膜中可包含一千万至一亿个额定微孔,以孔隙率测定法测得孔隙率在80%以上。
(3) 滤膜透水率高、滤速快:用透水率测定法测得0.8UM微孔滤膜透水率可达215亳升/平方厘米。分,1.2UM透水率可达311亳升/平方厘米。分。
(4) 强度高有韧性,因MC型滤膜生产过程中的三醋酸纤维素分子乙酰化完全、张力强度高,爆破强度法测定厚度0.10~0.15毫米膜,爆破强度≥3公斤/平方厘米,膜有韧性,即使对折数次也不易断裂,所以使用寿命长。
(5) 滤膜的各向同性:MC型滤膜为各向同性,不分正反面,对额定孔径以上的固体微粒能起到绝对截留作用。
(6) 热稳定性:在120度热压灭茵30分钟,热稳定性良好。
(7) 化学稳定性:可过滤PH2~11各种药液,还可过滤仪表油、5%醋酸、6N硫酸、6N氢氧化钾、无水乙醇、丙三醇、甲醇、正丙醇、导丙醇、偏笨三酸三辛酯、聚乙二醇、各种酒类、饮料、醋等。
(8) MC型滤膜还具有无毒、无媒质迁移等优点。
三、 可供规格
孔径(微米):0.22 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2 3~5
直径(毫米):Ф25 Ф35 Ф50 Ф100 Ф150 Ф200 Ф300 Ф400 (如需特殊规格可定制)
各种孔径适用范围
(1)滤除微粒:应选用0.65um 0.8um 1.2um的滤膜.
(2)滤除细菌:应选用0.45um 0.3um 0.22um的滤膜.
四、 使用方法
(1) 将滤膜于70度左右的蒸馏水中浸泡4小时以上,使用前再用适量新鲜蒸馏水冲洗一二次,然后装入已洗过的滤器中备用。
(2) 过滤方法:可采用加压法、真空法或位差液压法、加压法的滤速随着压力提高而加快,一般不超过3~4公斤/平方厘米,采用抽气过滤时应防止外界空气的细菌、微粒污染。利用位差过滤,一般位差应考虑在3~5米以上(约相当于0.5个大气压),否则影响滤速。
五、 注意事项
(1) MC型滤膜适宜于PH2~11,对强酸强咸或某些有机溶剂不宜使用。
(2) 本品一般耐温120度,热压30分钟,耐2~4公斤/平方厘米。
(3) 微孔滤膜只能作为最后过滤阶段,滤液必须经过沙滤棒、滤纸、滤球等粗过滤材料,可避免滤膜堵塞。
(4) 操作MC型滤膜时不可触及尖硬物品,以免引起穿孔现象。在装滤膜前要严格检查微孔滤膜是否有漏孔,不合格不得使用。
混合纤维素酯微孔滤膜使用说明书
混合纤维素制成的薄膜滤材,经有关单位多次广泛使用,质量符合标准,其产品表面平滑、质地轻薄、孔隙率高、且微孔结构均匀,因此且有流速快,不易吸附的特点。
一. 用途
本品用于制药业、生物制品、矿泉饮料、酿造、电子等工业方面的水质、医药用油、润滑用油、燃料用油及科研实验化验室等滤除细菌和微粒,一般0。65微米以上可除微粒,0。45以下可滤除细菌。
二. 规格
混合纤维素酯微孔滤膜各种规格如下:
公称孔径(直径微米)0.2 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2
膜片直径(毫米)25 35 50 60 100 150 200 300 400
(如需特殊规格另行定制)
三. 使用方法
1. 将滤膜平放于清洁盛器内,用70度左右的蒸馏水浸泡,使全部润湿,数小时后(约4小时以上)倾去水,再用上法浸泡过夜,使用前再用适量温蒸馏水清洗一次。
2. 将洗清的滤膜(湿)装入适宜的滤器中,防止周围漏液,自进液口放进滤液,并在:排气口排出空气,即可进行过滤。
四. 注意事项
1. 水膜片适宜于PH2-9的药液,对强酸碱或有机溶剂包括酒精等不宜使用。
2. 本品一般能耐温120度,耐压3~4公斤/平方厘米。
3. 微孔滤膜只能作为最后阶段过滤,滤液必须先经过沙棒或其它滤材预过滤,以免滤膜堵塞。
上述使用方法,仅适用于水剂药液或其它水溶剂的过滤。
7. 配好的细胞培养基用过滤么
孔径为0.22微米的滤膜
这种滤膜可以过滤掉细菌和病毒。
孔径0.45微米的滤膜已经可以过滤掉细菌,但是不能过滤病毒。
为了防止噬菌体污染,一般还是用0.22微米的滤膜比较好。