deae纤维素离子交换层析柱

1. DEAT-纤维素离子交换层析法可用于分离纯化蛋白质，主要是由于 A蛋白质的溶解度不同

D.

DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素，是阴离子交换剂。
其原理基内于离子交换层析容：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。
由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的pH条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质，结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

http://ke..com/view/81714.htm

2. DEAE纤维素阴离子交换柱，看到很多地方讲到流穿模式，什么叫做流穿模式呢

流穿模式指的是样品没挂柱，都留下来了。

3. DEAE纤维素离子交换层析法 可用于分离春花蛋白质的原因，主要是由于什么

蛋白质所带电荷不同

4. DEAE纤维素柱层析分离多糖的过程中遇到了很多问题，请做过的同学看看我的问题出在哪里，谢谢谢谢。。。。

.1...DEAE是要先泡，然后碱酸碱的顺序洗涤的， 每次都要洗涤到中性才能进行下一个步骤，你洗涤的时候可以使劲的搅拌， 然后静置。麻烦你多泡 多搅拌。自然会开的
2如果静置上面还有漂浮物可以考虑不要！
3，你要多看资料，人家抽滤只是为了抽干（不是绝对的干），然后方便换水洗涤，这样能减少静置时间，所以不是绝对的干啊，你给抽滤的漏斗底下加上滤纸。
4. 经过这些处理后肯定是会 沉淀的，我觉得你是急性子，这些东西和后来你需要的凝胶装柱子都是湿法装住，都需要慢慢装，过一会才会沉淀下来，不要看你随便倒一些进柱子，就感觉已经满了，你过一会看就发现，在柱子最底下其实只慢慢沉淀了一点。

5. 生化试验:sephadex G25层析和DEAE-纤维素离子交换层的固定相和流动相是什么

双蒸水，缓冲液pH8.4的(Tris)，梯度盐溶液（最好不超过1mol/ml）

6. 用过的sephadex G-25层析柱和DEAE纤维素离子交换柱再生的方法为什么不一样

飞秒检测发现sephadex G-25层析柱填料是葡聚糖交联的凝胶柱，G-X, X：（1）交联度。X越小，交联度越大，网孔越小，适用于分离低分子量产品，反之亦然。（2）吸水量。为凝胶得水值的10倍.例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克.凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。若使用数次，就需要再生处理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素，是阴离子交换剂。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂；而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的pH条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质，结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生。如离子交换纤维素可用2mol/：NaCl淋洗柱，若有强吸附物则可用0.1mol/LNaOH洗柱；若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生，也可用乙醇洗涤，其顺序为：0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存离子交换剂时要加防腐剂。对阴离子交换剂宜用0.002%氯已定（洗必泰），阳离子交换剂可用乙基硫柳汞（0.005%）。有些产品建议用0.02%叠氮钠。
两种填料的抗酸碱性和抗腐蚀性能不同。

7. DEAE-纤维素离子交换层析法可用于分离纯化蛋白质，主要是由于：

答案D
分配层析利用来样自品各组分在固定相和流动相间溶解度的不同(分配系数不同)来进行分离；吸附层析法利用吸附剂表面对样品组分吸附能力强弱不同来进行分离；亲和层析由于配体与待分离物质进行特异性结合；DEAE-纤维素离子交换层析法利用样品组分对离子交换剂静电力的差异来进行分离。

8. DEAE纤维素柱的原理

DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤回维素组成。

阴离子答交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。

(8)deae纤维素离子交换层析柱扩展阅读：

基本信息：

性状：干燥纤维状。

用途：用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料。

保存：常温干燥封袋保存。

DEAE—纤维素的使用方法：

称取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸馏水浸泡过夜，观察溶胀后DEAE的体积。根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE的用量，称取所需DEAE用蒸馏水浸泡过夜，其间换几次水，每次除去细小颗粒。

抽干，改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上，抽干（可用布氏漏斗），用无离子水漂洗，使pH至8左右（用pH试纸检查）。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上，去酸溶液，用无离子水洗至pH6左右。本实验中在用前应以0.0175mol/L，pH6.7磷酸盐缓冲液，浸泡平衡后使用。

9. deae-阴离子纤维素的使用方法

DEAE－纤维素的处理及装柱
（1）处理
本实验采用的是DEAE－纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂，具体处理方法为：先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中，去除杂质；再在0.5N的HCL溶液中浸泡1－2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上，并将其在抽滤漏斗中抽干；将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1－2h，再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。
（2）装柱
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有适宜浓度的柱材，轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部，凝胶沉积直到离层析柱上端1.5－2cm处，停止装柱。层析柱上端进液口连接恒流泵，下出口连接蛋白质监测仪，待层析柱的平衡。
（3）平衡
在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡，所谓平衡就是将层析柱中的溶液用层析过程的缓冲液（洗脱液）置换出来，使层析柱中的缓冲系统与柱层析过程中的系统一致。其方法是：利用层析柱上端的恒流泵将平衡缓冲液泵入到层析柱内，打开层析柱下端的出口，平衡液流速在0.5-1ml/min，当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时，层析柱达到了平衡。在本实验中，用0.002M Tris-HCL缓冲液PH7.4(内含0.0001M EDTA)，预先将DE-52柱进行平衡。

10. DEAE纤维素离子交换柱后面的数字意义

DEAE-纤维素 DEAE cellulose DEAE-纤维素 DEAE cellulose 二乙氨乙基纤维素阴离交换纤维素 DEAE—纤维素化：称取IgDEAE32或52放入5ml量筒加蒸馏水浸泡夜观察溶胀DEAE体积根据所需层析柱柱床体积计算所需DEAE