1. 为什么流动相的配置有些试剂用色谱纯,有些用分析纯
试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯试剂、光谱纯试剂、基准试剂、分光纯试剂、优级纯试剂、分析试剂和化学纯试剂等7种。
试剂纯:是指一般化学试验用的,有较少的杂质,不妨碍实验要求。
分析纯:是指做分析测定用的试剂,杂质更少,不妨碍分析测定。
色谱纯:色谱纯试剂是在最高灵敏度下以10-10克下无杂质峰来表示的。是指进行色谱分析时使用的标准试剂,在色谱条件下只出现指定化合物的峰,不出现杂质峰。
2. 高效液相色谱的流动相要经过哪些处理
流动相要先过滤,超声脱气后方可使用。
另外选用试剂是要选用色谱级的专,过滤时选择合属适的滤膜。流动相最好现配现用,不要保存太长时间。
使用旋转蒸发仪上的真空泵 抽空气20min,可以达到脱气的作用。使用滤膜过滤掉杂质。
流动相必须过滤膜,用前要超声除气泡半个小时左右,否则基线不稳
仪器和色谱柱先要用有机溶剂(如乙腈等)好好清洗一下,待基线平衡后才能进一步工作,乙腈和水混合的流动性最好先超声抽滤脱气,准备工作做好了会节省好多时间。
若用色谱纯的乙腈和超纯水做流动相,流动相可以不用过滤膜,但超纯水需要超声约30分钟脱气。
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3. 高效液相色谱法流动相为什么要用过滤膜过滤
楼上正解。但不光是堵塞柱子,如果有不容颗粒在流动相中,也会对泵进行磨损。
4. 流动相乙腈要过滤吗
一定要过滤.
5. 流动相在使用前为什么要过滤和脱气
过滤是为了除去流动相中的杂质,保护系统和柱子.脱气是为了除去溶解在流动相中得气泡,降低基线噪音.
6. 液相色谱仪的流动相为什么要过滤
通常用0.4μm的滤膜过滤,这样可以去除流动相中比较大的微粒,防止堵塞仪器和柱子。精密仪器维修很麻烦并且损伤寿命
7. 高效液相色谱法流动相在使用前需要过滤与脱气,常用脱气方法有 真空脱气及在线脱气。
液相色谱流动相脱气使用较多的方法大概有四种:氦气脱气、真空脱气、超声波脱气、加热脱气。
1.氦气脱气:氦气脱气是很有效的脱气方法。氦气缓缓的通过流动相赶去溶入的空气,如果使用得当,在10min内可除去80%~90%的溶入气体。由于氦气在流动相中的溶解度极低,所以用氦气脱气保护的流动相可以认为是一个无气体溶解体系。其缺点是氦气价格比较昂贵,会增加检验成本。
2.真空脱气:也是比较常用的脱气方法。现在多数企业都最常用这种办法,贮液器被抽成部分真空,溶入的气体蒸发形成气泡溢出,其效果仅次于氦气脱气。象Agileng1200液相色谱使用的是在线脱气机。在线脱气只适合脱完气之后的流动相,在使用过程中的微量脱气。
3.超声波脱气: 将配制好的流动相连容器放入超声水槽中脱气10-20min。这种方法比较简便,又基本上能满足日常分析操作的要求,所以,目前仍广泛采用。这种方法只能除去30%的溶解气体,有时还会引起气体溶解度的增加。对氧敏感的检测器不宜用此法。
4.加热回流脱气:该方法虽然效果很好,但是适用范围较窄。对于有机溶剂或混合流动相不适合用此法,因为挥发性组分会损失掉,改变流动相的组成。
综合来说,用真空抽滤后,再用超声脱气还是最常用的办法,用氦气的方法是效果最好的办法,而用在线脱气呢,本身也是真空脱气,但它可以放到仪器上使用,是一种保证性的办法。
8. 为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气
用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。
噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而导致分离或分析结果的误差。
常用的除气方法有加热沸腾、抽真空、超声波、吹氦等。
高效液相色谱(hplc)是色谱的一个重要分支。以液体为流动相,高压输液系统,将不同极性的单溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。分离柱中的组分后,用检测器检测。实现了样品的分析。
(8)用色谱纯的流动相需要过滤吗扩展阅读:
液相色谱-质谱联用(LC-MS)可增加额外的分析能力,准确识别和量化细胞和组织裂解物、血液、血浆、尿液和口服液等复杂样品基质中的微量化合物。
流动相和固定相都是液体。流动相与固定相应不相容(极性不同,避免固定液流失),界面清晰。当样品进入色谱柱时,溶质分布在两相之间。达到平衡后,遵循高效液相色谱的计算公式。
公式中cs溶质在固定相的浓度、cm溶质在流动相的浓度、vs固定相的体积和vm流动相的体积。llpc与gpc有相似之处,即分离顺序取决于k值较大的组分的保留值,但也存在差异。在gpc中,流量对k的影响较小,而llpc流量对k的影响较大。
9. 液相色谱使用前为什么要过滤和脱气
一般抄流动相在上仪器前必须经过两个袭步骤:减压抽滤和超声
减压抽滤有两个目的,
一个是过滤掉气体,尤其是有机相和水相混合的时候,会产生大量的气泡。这些气泡进入仪器就会堵住仪器和色谱柱,所以要除掉。
一个是过滤掉不溶性微粒。你看一般的过滤膜是4.5um孔径的,这个是针对你的色谱柱而定的。色谱柱一般是5um的粒径,保证过滤的流动相里面小的毛絮啊,颗粒啊都不会进入色谱柱。
超声的主要目的也是为了脱气,另外还有助溶和令溶液混合均匀等作用。不过超声主要是为了去掉溶剂瓶瓶壁和瓶底的气泡,所以没必要超声太久的时间,3-5min足够了。
总而言之,都是为了保护仪器和色谱柱,防止气泡和杂质进入。
10. 相要经过过滤,那标准品和待测样品需不需要过滤
因为要过滤掉流动相和待测样品里面的不溶性物质和气泡。防止它们堵住仪器。
很多东西不是你看着澄清就真的干净。液相的管路很细,还有色谱柱的孔径也很小,万一堵住了就报废了。所以一定要过滤。
流动相不单要过滤掉不溶物,还有就是气泡。这些气泡可能会堵住泵头,堵住色谱柱,就算哪儿都不会堵上也会导致流速不准确,柱压不稳定,基线波动等等。所以一定要过滤。
你的色谱柱是5um粒径的,用4.5um孔径滤膜就可以了。如果色谱柱粒径更小,那么也应该选择孔径更小的滤膜。
另外,如果你的流动相和待测样品是纯的色谱纯有机相,其实就没必要过滤了。