bca法测蛋白浓度加蒸馏水的目的

❶ 实验2中加入蒸馏水的目的

A、由以上分析可知，图1、2中加入蒸馏水的目的不相同，A错误；
B、图1中完成回过滤之后要保留滤液答，而图2中加水后DNA逐渐析出，因此过滤后要去除滤液，B错误；
C、图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.14mol/L（此时DNA的溶解度最低），C错误；
D、嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解去除蛋白质，因此在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质，D正确．
故选：D．

❷ bca法测定蛋白质的含量实验报告设置5组标准液的目的是什么

掌握BCA法测定蛋白质浓度岩竖的方法。BCA法测定蛋白质的含量实验报告，设置5组标准液的目的，是掌握BCA法测定蛋白质浓度的方法及原理，掌握722型分光光度计移液管的正确使用。蛋白质，由多个氨基酸组成，也是粗枝大人体的主要组成部分及食物的重要成搭败分之一，体内的肌肉、骨骼和内脏主要是由蛋白质组成的。

❸ 质粒提取为什么加蒸馏水

质粒提取加蒸馏水是因为：稀释层析液，更有利于色素扩散。

叶绿体色素在叶绿体内以其亲水部分与蛋白质结合，亲脂部分与类脂结合，纯的有机溶剂不能打破色素与蛋白质的联系，所以必须用能与水混溶的有机溶剂并有少量水存在时，才能将叶绿素提取出来。

加蒸馏水是为了促进血细胞破裂，使DNA从细胞核中释放出来。加蒸馏水降低NaCl溶液浓度，使DNA析出。关键要理解实验原理。

实验原理

提取质粒DNA的方法有很多种，从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取，从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取，从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等，各种不同的方法各有其优缺点，根据不同的实验目的可以采用合适的提取方法。详细内容请参考《分子克隆实验指南》。

以上内容参考：网络-质粒抽提

❹ bca法测蛋白浓度为什么稀释蛋白质浓度

BCA法测定蛋白质浓度原理：

BCA与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿，即 BCA 工作试剂。在碱漏虚性条件下，BCA 与蛋白质结合时，蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+，工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

BCA 蛋白浓度测定试剂返橡燃盒，Abbkine的蛋白质定量试剂盒(BCA法)提供一个简单，快捷，兼容去污剂的方法，准确定量总蛋白。

成分：

试剂 A，100 mL

试剂 B，2 mL

标准蛋白(BSA)1 mL×2，1 mg/mL

保存条件运输温度:室温(标准蛋白 4~8 ℃ 运输)

保存温度:室温(标准蛋白 -20 ℃ 保存)

有效日期:12 个月

使用方法：

方法一:96 孔板

1.配制 BCA 工作液:根据标准品和样品数量，按 50 体积试剂 A，1 体积试剂 B 配制适量 BCA 工作液。充分混匀。

2.将蛋白标准品按 0 μL，1 μL，2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10 μL 加入 96 孔板的蛋白标准品孔中。加灭菌双蒸水补足到 10 μL。取 10 μL 待测样品加入 96 孔板的待测样品孔中。每个测定要做 2~3 个平行。

3.向待测样品孔和蛋白标准品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即样品与工作液的体积比为 1:20)，混匀。

4.37 ℃ 温如御浴 30 min。冷却至室温。

5.酶标仪 562 nm 波长下测定吸光度。

6.制作标准曲线。从标准曲线中求出样品浓度。

❺ bca法测蛋白浓度原理

BCA蛋白浓度检测是一个实验，是根据吸光液念值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，两分子BCA螯合一个Cu+。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值，与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的埋弊浓度。

实验试剂

(1) BCA试剂的配制

① 试剂A，1L：分别称取10g BCA (1%)，20g Na2CO3·H2O(2%)，1.6g Na2C4H4O6·2H2O(0.16%)，4g NaOH (0.4%) ，9.5g NaHCO3(0.95%) ，加水至1L，用NaOH或固体NaHCO3调节pH值至11.25。

②试剂B，50ml：取2g CuSO4·5H2O (4%)，加蒸馏水至50ml。

③BCA试剂：取50份试剂A与1份试剂B混合均匀。此试剂可稳定一周。

(2)标准蛋白质溶液：称取0.5g牛血清白蛋白，溶于蒸馏水中并定容至100ml，制成5mg/ml的溶液。用时稀释十倍。

❻ BCA蛋白浓度检测的实验操作

绘制标准曲线：
取96孔酶标板，按下表加入试剂。
管号
1
2
3
4
5
6
7
8
标准蛋白溶液（μl）蒸馏水（μl）
BCA试剂（伍逗μl）
蛋白质浓芦哗度（mg/ml）
0
20
200
0
1
19
200
0.025
2
18
200
0.05
4
16
200
0.1
8
12
200
0.2
12
8
200
0.3
16
4
200
0.4
20
0
200
0.5
上述试剂加完后，准确吸取20μl样品溶液于酶标孔中，加入BCA试剂200μl，轻摇，于37℃保温30-60min，冷却至室温后，以空白为对照，在酶标仪上590nm处比色，以牛血清白蛋白含量为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。以标准曲线空白为对照，根据样品的吸光值从标腔哗卖准曲线上查出样品的蛋白质含量。

❼ bca蛋白质定量实验中为什么要加蒸馏水

一般来说BCA蛋白定量法中的BSA及样品都是用蒸馏水稀释就可以了。假如没有蒸馏水，也可以用过滤除菌的去离子水代替也是没有太大问题的。

❽ BCA蛋白浓度检测的实验试剂

Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白浓度检验方法之一BCA法基础上改进而成。其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下游闭裂蛋白质与Cu 2+ 络合并将Cu 2+ 还原成Cu + 。两分子BCA与一个Cu + 螯合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。
组成与储存：
组分名称 规格 保存
BCA Reagent 100ml 2-8℃
Cu Reagent 3.0ml 2-8℃
BSA标准液5 mg/神闭ml 1ml -20ºC冻存
可进态迅行500T微板(microplate)测定或50T2ml比色杯测定。