Ⅰ 发酵生产中常用的微生物培养基有哪些
1, Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基) Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L 2,Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂) Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20g Agar (琼脂) 20g 3, Czapek′s Agar(察氏琼脂) Sucrose (蔗糖) 30g NaNO3 3g MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.2
Ⅱ 为什么配培养基加蒸馏水
蒸馏水内没有营养物资,只是单纯的水,而琼脂也只是将培养基固体话的东西,不属于营养源,这两个东西都没有为微生物提供营养,无法供其生长,所以不能作为培养基。
Ⅲ 微生物配置培养基用什么水
1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量。
2,称量。
3,溶解。
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积。
5,分装。
6,消毒。
7,使用。
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别。
Ⅳ 微生物稀释用蒸馏水还是无菌水
考点: 测定抄某种微生物袭的数量 制备和应用固相化酶 DNA的粗提取和鉴定 专题: 分析: 解答时注意实验中用的是蒸馏水还是无菌水,将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释,防止杂菌污染,必须使用无菌水;破碎鸡血细胞获得含有DNA的滤液用蒸馏水;配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水,然后高压蒸汽灭菌;制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水. A、将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释,防止杂菌污染,必须使用无菌水,A正确;B、破碎鸡血细胞获得含有DNA的滤液用蒸馏水,B错误;C、配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水,然后高压蒸汽灭菌,C错误;D、制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水,D错误.故选:A. 点评: 本题考查了实验操作中材料的使用,考查了学生的实验操作能力和应用能力,试题难度中等.
Ⅳ 微生物实验怎么配培养基的成分啊
如果是需要真菌,可以选用马丁氏培养基。
马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4·7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose
Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH2PO4和MgSO4·7H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。
马丁氏培养基配方如下:
KH2PO4
1g
MgSO4·7H2O
0.5g
蛋白胨
5g
葡萄糖
10g
琼脂
15-20g
用蒸馏水定容至1000ml
此培养液1000ml加1%孟加拉红水溶液3.3ml。
由于链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基溶化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液,在100ml培养基中加1%链霉素液0.3ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
Ⅵ 微生物培养基配置的基本步骤
1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量.
2,称量.
3,溶解.
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积.
5,分装.
6,消毒.
7,使用.
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别.
Ⅶ 做微生物检验时蒸馏水可以代替生理盐水吗
采用生理盐水就是为了保证微生物细胞内外的渗透压平衡,细菌不会因此而死亡,内从容而影响实验的准确性。生理盐水盐浓度在0.85%,无菌水只是灭过菌的水,没有渗透压。通常作为生物实验时,会使用生理盐水,0.85%的盐浓度和微生物渗透压差不多,使微生物能够稳定存在溶液中。 有一些微生物对盐不耐受,有时会选用无菌水作为稀释液。理论上全都要用蒸馏水,但是像有些培养基比如LB、肉汤、燕麦片什么的,因为其中的蛋白胨酵母膏牛肉粉燕麦片等本身成分也不太确定,也只是养一些比较粗糙的微生物比如大肠杆菌霉菌酵母,并且用途也只是做个培养鉴定,这样就可以用自来水。
但是自来水成分不确定,过两天水质也不太一样,所以就算是养大肠杆菌,如果是做代谢实验等需要分析的实验,仍然需要用蒸馏水配置培养基。
Ⅷ 做微生物培养实验什么时候用自来水什么时候用蒸馏水
理论上复全都要用蒸馏水,但是制像有些培养基比如LB、肉汤、燕麦片什么的,因为其中的蛋白胨酵母膏牛肉粉燕麦片等本身成分也不太确定,也只是养一些比较粗糙的微生物比如大肠杆菌霉菌酵母,并且用途也只是做个培养鉴定,这样就可以用自来水。
但是自来水成分不确定,过两天水质也不太一样,所以就算是养大肠杆菌,如果是做代谢实验等需要分析的实验,仍然需要用蒸馏水配置培养基。
Ⅸ 细菌培养基配方
1、细菌培养基配方一 牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 100毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。配方二 马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。配方三 根瘤菌培养基葡萄糖 10克 磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克 硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克 琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。2、放线菌培养基配方一 淀粉琼脂培养基(高氏培养基)可溶性淀粉 2克 硝酸钾 0.1克磷酸氢二钾 0.05克 氯化钠 0.05克硫酸镁 0.05克 硫酸亚铁 0.001克琼脂 2克 水 100毫升先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2~7.4,分装后灭菌,备用。配方二 面粉琼脂培养基面粉 60克 琼脂 20克水 1000毫升把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。3、真菌培养基配方一 萨市(Sabouraud’s)培养基蛋白胨 10克 琼脂 20克麦芽糖 40克 水 1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。本培养菌是培养许多种类真菌所常用的Ⅹ 微生物实验中培养基的配置应该注意什么
1、常用玻璃仪器的准备
制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。
(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。
(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。
(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。
2、培养基的制备及储存
(1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏。
(2)校正酸碱度(调节pH):培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证。测定时,一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤,使培养基澄清。
(3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。
平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。
斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。
高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好。