1. 凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理
样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳、氢被氧化为CO2和H2O逸出回,而样品中的答有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵,硫酸铵用NaOH中和生成NH3`H2O,加热又分解为氨,用硼酸吸收,吸收氨后的硼酸再以标准盐酸或硫酸溶液滴定,根据标准酸消耗量计算蛋白质的含量。
2. 乙醚的制备过程中粗产物的洗涤,每次洗涤分别起到什么作用
乙醚实验室制法[实验原理]+[实验步骤]+按图安装好装置+[注意事项]
1.在反应装置中,滴液漏斗末端和温度计水银球必须浸入液面以下,接受器必须浸入冰水浴中,尾接管支管接橡皮管通入下水道或室外。
2.控制好滴加乙醇的速度(1D/S)和反应温度(135-145℃)。
3.乙醚是低沸点易燃的液体,仪器装置连接处必须严密。在洗涤过程中必须远离火源。制备乙醚实验装置图乙醚的制备.
1.乙醚的制备
①在干燥的三角烧瓶中加入12ml乙醇,缓缓加入12ml浓H2SO4混合均匀。
①滴液漏斗中加入25ml乙醇。
②如图连接好装置。
③用电热套加热,使反应温度比较迅速升到+1400C。开始由滴液漏斗慢慢滴加乙醇。
④控制滴入速度与馏出液速度大致相等(1滴/s)。
⑤维持反应温度在135-1450C内30-45min滴完,再继续加热10min,直到温度升到1600C,停止反应。
2.+乙醚的精制
①将馏出液转至分液漏斗中,依次用8ml5%NaOH,8ml饱和NaCl洗涤,最后用8ml饱和CaCl2洗涤2次
②分出醚层,用无水CaCl2干燥。
③分出醚,蒸馏收集33-380C馏液。
④计算产率。
思考题1、反应温度过高或过低对反应有什么影响?参考答案1、主要由原料CH3COOH(。控制在105℃这样可以保证原料CH3COOH充分反应而不被蒸出,生成的水立即移走促使反应向生成物方向移动,有利于提高产率。三十一乙醚的制备204.
实验室使用或蒸馏乙醚时应注意哪些问题?答:在实验室使用或蒸馏乙醚时,实验台附近严禁有明火。因为乙醚容易挥发,且易燃烧,与空气混和到一定比例时即发生爆炸。
所以蒸馏乙醚时,只能用热水浴加热,蒸馏装置要严密不漏气,接收器支管上接的橡皮管要引入水槽或室外,且接收器外要用冰水冷却。
3. 凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作方法是什么
原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应,放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量,计算样品的总氮量。
、试剂与材料:
浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水),0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合,储存于棕色瓶中备用。此指示剂在PH5.2为紫色;PH为5.4为暗灰色或灰色;PH5.6为绿色;变色点为PH5.4)、硼酸-田氏指示剂混合液(100ml2%硼酸溶液,滴加约1ml田氏指示剂,摇匀后,溶液呈紫红色)、蛋白质样品、容量瓶、吸管、凯氏烧瓶、凯氏定氮蒸馏装置、微量滴定管、电炉
三、操作方法
1、样品处理:固体样品,应在105℃干燥至恒重。液体样品可直接吸取一定量,也可经适当稀释后,吸取一定量进行测定,使每一样品的含氮量在0.2-1.0mg范围内。
2、消化:取一定量样品,于50ml干燥的凯氏烧瓶内。加入300mg硫酸钾-硫酸铜混合粉末,再加入3ml浓硫酸。用电炉加热,在通风厨中消化,瓶口加一小漏斗。先以文火加热,避免泡沫飞溅,不能让泡沫上升到瓶颈,待泡沫停止发生后,加强火保持瓶内液体沸腾。时常转动烧瓶使样品全部消化完全,直至消化液清澈透明。
另取凯氏瓶一个,不加样品,其它操作相同,作为空白试验,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,以对样品进行校正。
3、蒸馏:将微量凯氏蒸馏装置洗涤(先用水蒸气洗涤)干净。将凯氏烧瓶中的消化液冷却后,全部转入100ml的容量瓶,用蒸馏水定容至刻度。
吸取20ml稀释消化液,置于蒸馏装置的反应室中,加入10ml30%氢氧化钠溶液,将玻璃塞塞紧,于漏斗中加一些蒸馏水,作为水封。
取一三角瓶,加入10ml硼酸-田氏指示剂混合液,置于冷凝管之下口,冷凝管口应浸没在硼酸液面之下,以保证氨的吸收。
加热水蒸汽发生器,沸腾后,夹紧夹子,凯氏蒸馏。三角瓶中的硼酸-指示剂混合液,吸收蒸馏出的氨,由紫红色变为绿色。蒸馏15min,让硼酸液面离开冷凝管口,再蒸1-2min以冲洗冷凝管口。空白试验按同样操作进行。
4、滴定:样品和空白均蒸馏完毕后,用0.01M标准盐酸滴定,至硼酸-指示剂混合液由绿色变回淡紫色,即为滴定终点。
四、计算 样品总氮量(mg)=(A-B)×c×14×100/20
式中:A:样品滴定时消耗的标准盐酸体积 B:空白滴定时消耗的盐酸体积 C:标准盐酸的当量浓度 14:氮的相对分子量 20:用于蒸馏的稀释消化液体积 100:稀释消化液的体积
样品中粗蛋白含量(mg)=样品总氮量(mg)×6.25
4. 油品蒸馏,烧瓶如何清洗干净
用氧泡泡,利用氧原子去污清洁,你有照片发出来看一下,更好说一下方法。
5. 凯氏定氮法中如何证明蒸馏器洗涤干净
1. 消化:有机物与浓硫酸供热,使有机氮全部转化为无机氮——硫酸铵。为加快反应,内添加硫酸铜和硫酸钾的混合容物;前者为催化剂,后者可提高硫酸沸点。这一步约需30min至1h,视样品的性质而定。
2. 加碱蒸馏:硫酸铵与NaOH(浓)作用生成(NH4)OH, 加热后生成NH3, 通过蒸馏导入过量酸中和生成NH4Cl而被吸收。
3. 滴定:用过量标准HCl吸收NH3,剩余的酸可用标准NaOH滴定,由所用HCl摩尔数减去滴定耗去的NaOH摩尔数,即为被吸收的NH3摩尔数。此法为回滴法,采用甲基红卫指示剂。HCl+NaOHNaCl +H2O
本法适用于0.2 ~ 2.0 mg的氮量测定。
6. 为什么换样时可以不用洗涤干燥蒸馏器
首先用蒸馏水洗涤是为了排除水中杂质对溶液浓度的影响,其次在转移溶液的时候,原容器对残留部分溶液,如果不将这部分溶液加到容量瓶中,会降低所配溶液的浓度,造成实验误差。注意,洗涤所加蒸馏水的量和以转移的溶液的量的总和不应超过容量瓶
7. 如何判断整个蒸馏装置已经洗涤干净4,加样后小漏斗中的水封的作用是什么
如何判断整个蒸馏装置已经洗涤干净?4,加样后小漏斗中的水封的作用是什么
水封是利用一版定高度的静水权压力来抵抗排水管内气压变化,防止管内气体进入室内的措施.水封通常用存水弯来实施,设在卫生器具排水口下.常用的管式存水弯有P形和S形两种,水封高度h与管内气压变化、水蒸发率、水量损失、水中杂质的含量及比重有关,不能太大也不能太小.若水封高度太大,污水中固体杂质容易沉积在存水弯底部,堵塞管道;水封高度太小,管内气体容易克服水封的静水压力进入室内,污染环境.构造内无存水弯的卫生器具与生活污水管道或其它可能产生有害气体的排水管道连接时,必须设存水弯.存水弯的水封深度不得小于50mm.严禁采用活动机械密封替代水封.医疗卫生机构内门诊、病房、化验室、试验室等处不在同房间内的卫生器具不得共用存水弯.
8. 如何清洗不锈钢电热蒸馏水器留下的水垢
清洗方法步骤
1.切断电源,关上自来水
2.加热浓盐酸100ml到烧瓶内版,与瓶内的水释盐酸,如积垢权较多盐酸可多加一些,数分钟后由水位器放出,最后用自来水冲洗数次,为了清除微量盐酸,可将烧瓶前后摇动,使不易清洗的死角冲洗为止。
3.当再次蒸馏时,开始10分钟内所蒸馏的水废弃使用。
清洗注意事项
采用二次蒸馏装置必须注意水位的控制,因冷却水的水不再经过水位器再直接排放掉,烧瓶水位智能依赖烧瓶及进行控制水位器来进行控制,在任何情况下,烧瓶内水不允许放完,因此烧瓶容积不宜少于2升(即2小时以上的蒸馏量),不然,在蒸馏时应该常加水,以免断水而烧坏仪器。
9. 减压蒸馏装置清洗要注意什么
注意使用合适的洗涤剂
10. 蒸发,萃取,过滤,蒸馏的装置分别是什么
1.过滤
适用范围:固体与液体分离
主要仪器:漏斗、烧杯、玻璃棒、铁架台(带铁圈)、滤纸
注意事项:①要“一贴二低三靠”
②必要时要洗涤沉淀物(在过滤器中进行)③定量实验的过滤要“无损”
2.蒸发
适用范围:分离溶于溶剂中的溶质
主要仪器:蒸发皿、三角架、酒精灯、玻璃棒
注意事项:①溶质须不易分解、不易水解、不易被氧气氧化②蒸发过程应不断搅拌③近干时停止加热,余热蒸干
3.蒸馏/分馏
适用范围:利用沸点不同以分离互溶液体混合物
主要仪器:蒸馏烧瓶、冷凝管、酒精灯、锥形瓶、牛角管、温度计、铁架台(带铁圈、铁夹)、石棉网等
注意事项:①温度计水银球在蒸馏烧瓶支管口下沿处
②加沸石(碎瓷片)
③注意冷凝管水流方向
应下进上出
④不可蒸干
4.萃取
适用范围:利用溶质在两种互不相溶的溶剂中的溶解度不同,用一种溶剂把溶质从它与另一种溶剂所组成的溶液里提取出来
主要仪器:可在烧杯、试管等中进行,常常在分液漏斗中进行(为便于萃取后分液)
注意事项:①萃取后要再进行分液②对萃取剂的要求:与原溶剂互不混溶、不反应;溶质在其中的溶解度比在原溶剂中大;溶质不与萃取剂反应;两溶剂密度差别大③分液后得到的仍是溶液,一般再通过蒸馏等方法进一步分离
5.分液
适用范围:两种互不相溶的液体的分离
主要仪器:分液漏斗(有圆筒形、圆球形、圆锥形)
注意事项:①先打开分液漏斗上口的玻璃塞或使塞上凹槽对准小孔,再打开分液漏斗的活塞,放出下层液体②上层液体从上口倒出