Ⅰ 離子交換層析中流出物質順序是什麼
若用離子交換層析分離物質,以蛋白質為例,離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。
由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。
反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。
(1)離子交換法測定電荷的思考題擴展閱讀:
對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒,以保證有較好的均勻度,對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。
溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理,使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理,使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑;對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理,使最終轉為-H-型交換劑。
梯度不要上升太快,要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸,會引起區帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
Ⅱ 過離子交換柱時,pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液
如果不限定純抄化方法,可以考慮親和層析或離子交換,但根據你問題的意思,是選定離子交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了,如果等電點在你穩定pH之上,就用陽離子交換柱:
設計陽離子交換層析:將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running
buffer。同時裝柱,平衡,然後上樣,平衡,洗脫(因為你的pH不穩定,建議鹽洗脫),收峰。得你的蛋白;
如果你的等電點在穩定pH之下,就用陰離子交換柱,其步驟如上,只是改變柱子類型。
Ⅲ 離子交換色譜中,為何能夠利用pH梯度改善分離選擇性
呵呵,剛才加了AKTA的培訓,就獻丑了。
離子交換色譜中,PH的影響極大。要知道為何能夠內利用pH梯度改善容分離選擇性?就得知道其原理:
離子色譜是利用相反電荷之間的相互作用來分離的,當檢測物質帶負電荷時,要選擇陰離子色譜柱,陰離子色譜柱帶正電荷的配基,進行陰離子-陽離子交換,結合帶負電荷的分子,經過交換後檢測物質的帶負電荷的分子就會吸附色譜柱上,然後在用高鹽洗脫,洗脫的組分先後進入檢測器,就達到了檢測的目的。
當檢測物質帶正電荷時,道理類似,自己想吧。
pH梯度可以改變檢測物質電荷、偏離等電點的程度,從而影響帶正/負電荷的分子(或離子)與色譜柱的結合能力(可以認為是牢固程度),洗脫時的難易程度就改變,從而改變了分離選擇性。
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Ⅳ 陽離子交換劑用帶什麼電荷的離子溶液洗脫
當然陰離子....
Ⅳ 水是生命之源,下列關於水的說法正確的是()A.海水淡化的方法主要有蒸餾法、電滲析法、離子交換法
A.海水淡化的主要方法有:蒸餾法、電滲析法、離子交換法等,故A正確;
B.溫回度影響水的離子積,如100℃時水答電離的c(H+)=1×10-6mol/L,溶液的pH=6,但是溶液為中性,故B錯誤;
C.氯氣有毒,能和水反應生成鹽酸和次氯酸,次氯酸有強氧化性能殺菌消毒,所以可用來自來水的殺菌消毒,故C錯誤;
D.明礬可以用於水的凈化,原理是鋁離子水解生成的氫氧化鋁膠體能吸附水中的懸浮物質而凈水,明礬不能殺菌、消毒,故D錯誤;
故選A.
Ⅵ 蛋白純化陰離子交換,緩沖液帶什麼電荷
既然是陰離子交換,就要讓目標蛋白帶負電,那麼緩沖液PH就要大於內等電點。緩沖體系的容選擇也很重要,一般用TRIS-HCl,特別是弱陰離子柱不可選用帶負電強的磷酸鹽緩沖液,否則上樣液中被交換的將是磷酸根而不是目標蛋白。一般用NaCl平衡後上樣進行離子交換,然後再用較強的陰離子洗脫。
Ⅶ 如圖為陽離子交換膜法電解飽和食鹽水原理示意圖. 下列說法不正確的是() A.從E口逸出的氣體是H
A、在電解池中,鈉離子移向陰極,所以D極是陰極,該極除了產生氫氧化鈉以內外還會產容生氫氣,故從E口逸出的氣體是H 2 ,故A正確; B、陰極D極產生大量的氫氧化鈉,為了增強導電性,可以從B口加入含少量NaOH的水溶液,故B正確; C、電解原理方程式2NaCl+2H 2 O
D、粗鹽的提純要加入氯化鋇、氫氧化鈉、碳酸鈉,但是碳酸鈉一定要加在氯化鋇的後面,出去過量的鋇離子,故D錯誤. 故選D. |
Ⅷ 離子交換層析的原理是什麼 已解決
離子交換層析法是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物內質的酸鹼性容,極性,所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來。
層析開始前,功能基團與反離子穩定結合,就與反離子發生可逆交換,與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團,鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密,易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同,洗脫下來的時間不同,因此得以分開。
(8)離子交換法測定電荷的思考題擴展閱讀
離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性,以及在不同pH值環境中,此物質所帶的電荷和電性強弱,陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷,這些鹼性蛋白質,它們在酸性溶液中較穩定,親和力強,故採用陽離子交換劑。
在鹼性溶液中較穩定,則使用陰離子交換劑,如果欲分離的物質是兩性離子,一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷,作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生,若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌。
Ⅸ 陽離子交換樹脂是交換什麼離子的,自身帶什麼電荷
交換陽離子(就是正離子),自身帶負電荷
ps:陽離子交換樹脂帶的是負電荷,不是正電荷