❶ 取小白鼠肝臟勻漿進行菌落計數
實驗原理:
利用密度梯度法和差素分離法經行粗分離細胞器。得到純化的線粒體,經行超活染色,其原理是Janus Green B可以將線粒體猛族經行染色磨型,由於線粒體中存在相關的氧化酶,故Janus Green B在線粒體中不會被還原,而在細胞質中則會被還原成無色物質。
過程:處死小白鼠 解刨取出肝臟 剪碎肝臟組織 加入少量0.25M冷的蔗糖溶液,轉移至勻漿器里 充分碾磨,製成肝臟勻漿,過濾 准備一5ml離心管,加入0.34M冷凍蔗糖溶液 沿管壁緩慢加入肝臟勻漿,可見其分層。平衡離瞎知猜心杯,開啟低速離心機
❷ 新鮮的動物肝臟勻漿是有機催化劑嗎
是的。
新鮮的動物肝臟內含過氧化氫酶棚褲吵。
過氧化物酶是過氧化物酶體的標志酶純簡,是其一類氧化還原酶,它們能催化很多反應。過氧化物酶是以過氧化氫為鏈侍電子受體催化底物氧化的酶。主要存在於載體的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫,氧化酚類和胺類化合物和烴類氧化產物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類、醛類、苯類毒性的雙重作用。
❸ 為什麼雞肝要製成勻漿之後再進行酶脆化試驗
為什麼雞肝要製成勻漿之後再進行酶脆化試驗
雞肝在製成勻漿之後,才能充分釋放細姿喚滲胞中的過氧化氫鏈鬧酶,從而加速過氧化氫的分解,這時候再進去沒碎化,實驗會更加的快捷,否則的話,實驗現象不跡脊明顯
❹ 已知pI值為6.2,如何從肝中分離提取純化鑒定某種酶
1).脫脂肝粉制備:將新鮮動物肝臟切成碎塊、攪碎、充分勻漿,然後加入丙酮後離心,收集沉澱,乾燥。然後將肝粉顆粒研磨、過篩、收集細粉,加入三氯甲烷充分攪拌,抽濾,重復兩次,收集濾餅、乾燥。
2).酶粗品制備:將肝粉用氨水溶液恆溫抽提兩次,合並濾液。將所得水溶液用乙酸溶液酸化、離心,收集上清液。然後調PH至中性,用硫酸銨初次鹽析、離心、收集橘備上清,再次鹽析、收集沉澱,得弊做酯酶粗品。
3).精製:將粗品用磷酸鹽緩沖液溶解後,經過陰、陽圓卜毀離子交換層析柱純化,接收主峰,濃縮,然後再經過凝膠層析柱分離,接收主產物峰。
4)超濾、濃縮、凍干。將收集的溶液用微孔濾膜預過濾後,超濾、濃縮、凍干。