❶ 超濾離心管怎麼使用
蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。
❷ 怎樣使用Miliphore的超濾管
根據超濾膜的截留分子量和蛋白分子量比較才能定，一般採用錯流過濾
❸ 想問一下超濾離心管怎麼使用啊還有它能不能重復使用
可以的,先用超聲波洗干凈,再用高壓滅菌鍋滅菌後,備用即可
❹ 大家用過的超濾管怎麼保存
超濾膜組件的維護（四川禹華環保）要點：
一、短期停機的情況下：停機2-3天以內，請內在膜組件內部充水容的狀態下停機；如果達一周左右時，請注入濃度為50mg/L的次氯酸鈉溶液；
二、 長期停機的情況下：膜組件要先經過次氯酸鈉葯洗後，再注入濃度為1.5%的亞硫酸氫鈉溶液。
三、置於陰涼處，不能脫水存放；低於零度時要加甘油防凍；
❺ 合肥格雲流體超濾膜該如何保養
超濾膜的清洗其實很簡單，物理清洗時是非常的簡單的，對於一般膜孔不是特別小的可拆式超濾膜，一般情況可以直接拆開用柔軟物質進行擦拭和沖洗;根據膜管徑的大小可選用適合的海綿球利用專用設備來進行擦拭和沖洗，而且這種方法可以反復使用;用30-40℃的熱水清洗超濾膜，可以將一些粘稠物或者熱熔性的雜質去除。
超濾膜在使用完後要保存起來，一般是保存在保護液中，這樣做的目的主要是防止超濾膜脫水後產生收縮，使膜結構遭到破壞，通透量下降。超濾膜的保存一般分為短期保存和長期保存，短期保存一般是超濾膜在暫停使用後，一般少於10天，就應該對超濾膜進行一次殺菌和消毒，清洗的葯劑一般為15ppm(ml/L)的HY-240殺菌劑，然後將超濾膜的進水閥、排水閥和調節閥關閉，以保持超濾膜的密封性和滅菌作用;長期保存一般是超濾膜停止使用超過10天以上，先要對超濾膜進行殺菌和反沖洗，然後在超濾膜內注入HY-310保護液密封保存。
❻ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦
可能是抄這個蛋白的水溶性較差，也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就和這個蛋白的穩定性有關了，超濾時保持低溫，體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高，選擇更合適的緩沖液，添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。
❼ 超濾離心管可以滅菌嗎
1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高溫高壓滅菌,要注意滅完菌後,管裡面的超濾膜是處於濕潤的狀態,所以需要立即使用,因為膜濕潤後就不能幹
❽ 離心超濾管 millipore 濾膜上好像有孔,離心後發現有大分子蛋白過來,怎麼回事該怎麼辦
離心超濾管是一次性的，原則上不能反復用的，所以濾膜上有孔就要更換了
❾ 求助：第一次使用超濾離心管應該怎麼處理
可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。
❿ millipore 超濾管區別
1、裝量：0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K