蛋白超濾時產生沉澱

㈠ 蛋白質沉澱的原因

定的因素：
一、蛋白質有水化膜；
二、蛋白質是帶電荷的；
所以，當破壞這兩個因素時，蛋白質從溶液中析出而產生沉澱。
然後，具體講講鹽析和變性。
----鹽析：
在蛋白質水溶液中，加入了高濃度的強電解質鹽如硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等而使蛋白質從溶液中析出，稱為鹽析。（低濃度的鹽溶液加入蛋白質溶液中，會導致蛋白質溶解度增加，稱為鹽溶）
[機理]：破壞了蛋白質的水化膜並且中和了表面的凈電荷。
----變性：
當天然蛋白質受物理或化學因素影響後，失去原有的生物活性，並且物理化學性質均以改變的作用稱為蛋白質的變性。
[機理]（本質）：分子中的次級鍵斷裂，導致空間構象從緊密有序的變為鬆散無序的狀態。（一級結構並無被破壞）
[表現]：
1、無生物活性；
2、溶解度下降、粘度增加、紫外線吸收增加、側鏈反應增強、對酶的作用敏感，易被水解（這就是為何蛋白類食品在被加熱至變性後人體對其中氨基酸的吸收能力增強）
2、再來說溶解
鹽溶液（比如硫酸銅）使蛋白質沉澱的原因不是蛋白質變性而是鹽析，少量的鹽溶液改變了蛋白質的溶解度，所以在步驟一的時候，溶劑（水）的量相對不足，所以發生了沉澱，但是當加入足夠的溶劑（硫酸銅是飽和了，但是蛋白質還能繼續溶解），原來析出的蛋白質重新被溶解。這里可能有一個認識上的誤區，所謂飽和硫酸銅溶液，飽和的只是硫酸銅，對於其他溶質，還是可以繼續溶解的。
3、最後說下顏色反應，不知道
你指的是哪一種。
用雙縮脲試劑鑒定，發生紫色反應，最終呈紫色。本質是與肽鍵發生絡合反應
蛋白質中存在含苯環的氨基酸就會遇濃硝酸變黃色，因為苯環發生了硝化反應，蛋白質水解後也不會褪色。

㈡ 請問使蛋白質沉澱的方法有幾種

使蛋白質沉澱的方法有3種。

1、鹽析法

在蛋白質溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質的膠體穩定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等。例如用半飽和的硫酸銨來沉澱出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉澱出來，鹽析沉澱的蛋白質，經透析除鹽，仍保證蛋白質的活性。

2、重金屬鹽沉澱蛋白質

蛋白質可以與重金屬離子如汞、鉛、銅、銀等結合成鹽沉澱。重金屬沉澱的蛋白質常是變性的，但若在低溫條件下，並控制重金屬離子濃度，也可用於分離制備不變性的蛋白質。如臨床上利用蛋白質能與重金屬鹽結合的這種性質，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質，然後用催吐劑將結合的重金屬鹽嘔吐出來解毒。

3、生物鹼試劑以及某些酸類沉澱蛋白質

蛋白質又可與生物鹼試劑（如苦味酸、鎢酸、鞣酸）以及某些酸（如三氯醋酸、過氯酸、硝酸）結合成不溶性的鹽沉澱。如臨床血液化學分析時常利用此原理除去血液中的蛋白質，此類沉澱反應也可用於檢驗尿中蛋白質。

(2)蛋白超濾時產生沉澱擴展閱讀：

蛋白質的沉澱可分為兩類：

1、可逆的沉澱反應：蛋白質分子的結構尚未發生顯著變化，除去引起沉澱的因素後，蛋白質的沉澱仍能溶解於原來的溶劑中，並保持其天然性質而不變性。如大多數蛋白質的鹽析作用或低溫下用乙醇（或丙酮）短時間作用於蛋白質。

2、不可逆的沉澱反應：蛋白質分子內部結構發生重大改變，蛋白質常變性而沉澱，不再溶於原來溶劑中。如加熱引起的蛋白質沉澱與凝固，蛋白質與重金屬離子或某些有機酸的反應。

㈢ 蛋白質分離提純方法

1、鹽析法：

鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。

2、有機溶劑沉澱法：

有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。

3、蛋白質沉澱劑：

蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用，常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。

4、聚乙二醇沉澱作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。

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吸附層析

1、吸附柱層析

吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱的一種層析方法。

2、薄層層析

薄層層析是以塗布於玻板或滌綸片等載體上的基質為固定相，以液體為流動相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質塗布於載體上形成薄層，然後按紙層析操作進行展層。

3、聚醯胺薄膜層析

聚醯胺對極性物質的吸附作用是由於它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚醯胺薄膜之間吸附能力的大小。

層析時，展層劑與被分離物在聚醯胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離在聚醯胺膜表面發生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續過程，就能導致分離物質達到分離目的。

㈣ 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦

1、選擇合抄適的超濾管，主要考慮襲MWCO和濃縮體積，最常見的是Ultra-15（10kD）。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。

3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。

注意，一定要等離心機達到目的轉速之後，方可離開
離心機，否則離心機出問題時，無法第一時間處理，後果不可預測！膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。

㈤ 人血白蛋白在超濾過程中地注意事項

1.葯液呈現混濁、來沉澱、源異物或瓶子有裂紋、瓶蓋松動、過期失效等情況不可使用。
2.本品開啟後，應一次輸注完畢，不得分次或給第二人輸用。
3.輸注過程中如發現病人有不適反應，應立即停止輸用。
4.有明顯脫水者應同時補液。
5.運輸及貯存過程中嚴禁凍結。

㈥ 蛋白質的溶解特性與沉澱原理

蛋白質通過鹽析的辦法沉澱的原理是降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出。
蛋白質的沉澱（protein
precipitation），沉澱是溶液中的溶質由液相變成固相析出的過程。蛋白質從溶液中析出的現象，稱為蛋白質的沉澱。蛋白質沉澱常用的方法有鹽析、等電點沉澱、有機溶劑沉澱、生物鹼試劑與某些酸（如三氯醋酸）沉澱等。

㈦ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦

可能是抄這個蛋白的水溶性較差，也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就和這個蛋白的穩定性有關了，超濾時保持低溫，體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高，選擇更合適的緩沖液，添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。

㈧ 為什麼球蛋白在透析過程中（除鹽）易發生沉澱析出

鹽濃度對蛋白質的活性還是比較關鍵的。
我覺得你的解決方法可以從下面幾個回方面去考慮答。
第一加一些保護劑，如蔗糖，甘油，巰基乙醇等。
第二，如果你僅僅為了脫鹽的話，減少脫鹽時間。考慮用超濾或者G系列的凝膠脫鹽，這樣時間較快，減少蛋白質的變性。
第三，增加你的蛋白質濃度，一定程度也可以減少透析過程中蛋白質的沉澱，但是效果不是特別好的。你可以試試。

望採納 O(∩_∩)O謝謝

㈨ 蛋白質的沉澱作用還有哪些哪些是變性哪些是沒有變性在分離蛋白質時常使用哪些方法

你好，很高興回答你的問題。猜測你問的是蛋白質沉澱和濃縮的方法。
一般蛋白變性沉澱方法有氯仿/甲醇沉澱，
TCA沉澱。非變性沉澱方法是在保持低溫下，加入硫酸銨，PEG，或者有機溶劑（如丙酮，乙醇，甲醇），非變性沉澱中硫酸銨和PEG可能會是蛋白沉澱不完全，而有機溶劑在低溫下也會使部分蛋白質變性，所以要根據實驗目的慎重選擇。
分離蛋白質常用的方法有蛋白沉澱，超濾，柱層析等等，主要還是根據不同樣品體系來選擇分離的方法。
純手工打造，希望被採納哦。

㈩ 透析蛋白時出現沉澱什麼原因

出現絮狀沉澱是很正常的現象，因為透析本身就是一個復性的過程，那麼出現絮狀的沉澱就是一些不能夠復性成為天然結構的一些目的蛋白和一些雜蛋白，而這些都是我們所不需要的。所以說出現絮狀沉澱是正常的也是我們希望看到的。
至於出現沉澱的原因不外乎條件變化太劇烈了，建議不要讓透析的條件變化太劇烈了，主要是PH的濃度的變化和樣品中一些其他東西如尿素的濃度變化。