① 人教版高一化學必修一必修二每一章的總結歸納
第一章 從實驗學化學-1- 化學實驗基本方法
過濾 一帖、二低、三靠 分離固體和液體的混合體時，除去液體中不溶性固體。（漏斗、濾紙、玻璃棒、燒杯）
蒸發 不斷攪拌，有大量晶體時就應熄燈，余熱蒸發至干，可防過熱而迸濺 把稀溶液濃縮或把含固態溶質的溶液干，在蒸發皿進行蒸發
蒸餾 ①液體體積②加熱方式③溫度計水銀球位置④冷卻的水流方向⑤防液體暴沸 利用沸點不同除去液體混合物中難揮發或不揮發的雜質（蒸餾燒瓶、酒精燈、溫度計、冷凝管、接液管、錐形瓶）
萃取 萃取劑：原溶液中的溶劑互不相溶；② 對溶質的溶解度要遠大於原溶劑；③ 要易於揮發。 利用溶質在互不相溶的溶劑里溶解度的不同，用一種溶劑把溶質從它與另一溶劑所組成的溶液里提取出來的操作，主要儀器：分液漏斗
分液 下層的液體從下端放出，上層從上口倒出 把互不相溶的兩種液體分開的操作，與萃取配合使用的
過濾器上洗滌沉澱的操作 向漏斗里注入蒸餾水，使水面沒過沉澱物，等水流完後，重復操作數次
配製一定物質的量濃度的溶液 需用的儀器 托盤天平（或量筒）、燒杯、玻璃棒、容量瓶、膠頭滴管
主要步驟：⑴ 計算 ⑵ 稱量（如是液體就用滴定管量取）⑶ 溶解（少量水，攪拌，注意冷卻）⑷ 轉液（容量瓶要先檢漏，玻璃棒引流）⑸ 洗滌（洗滌液一並轉移到容量瓶中）⑹ 振搖⑺ 定容⑻ 搖勻
容量瓶 ①容量瓶上註明溫度和量程。②容量瓶上只有刻線而無刻度。 ①只能配製容量瓶中規定容積的溶液；②不能用容量瓶溶解、稀釋或久貯溶液；③容量瓶不能加熱，轉入瓶中的溶液溫度20℃左右
第一章 從實驗學化學-2- 化學計量在實驗中的應用
1 物質的量 物質的量實際上表示含有一定數目粒子的集體
2 摩爾 物質的量的單位
3 標准狀況 STP 0℃和1標准大氣壓下
4 阿伏加德羅常數NA 1mol任何物質含的微粒數目都是6．02×1023個
5 摩爾質量 M 1mol任何物質質量是在數值上相對質量相等
6 氣體摩爾體積 Vm 1mol任何氣體的標准狀況下的體積都約為22.4l
7 阿伏加德羅定律 （由PV=nRT推導出) 同溫同壓下同體積的任何氣體有同分子數
n1 N1 V1
n2 N2 V2
8 物質的量濃度CB 1L溶液中所含溶質B的物質的量所表示的濃度
CB=nB/V nB=CB×V V=nB/CB
9 物質的質量 m m=M×n n=m/M M=m/n
10 標准狀況氣體體積 V V=n×Vm n=V/Vm Vm=V/n
11 物質的粒子數 N N=NA×n n =N/NA NA=N/n
12 物質的量濃度CB與溶質的質量分數ω 1000×ρ×ω
M
13 溶液稀釋規律 C（濃）×V（濃）=C（稀）×V（稀）
以物質的量為中心
第二章 化學物質及變化-1-物質的分類
1 元素分類： 金屬和非金屬元素
2 化合物分類： 有機物（含C）和無機物
氧化物 酸性氧化物（與鹼反應生成鹽和水） SiO2、SO2、CO2、SO3、N2O5、(多數為非金屬氧化物）
鹼性氧化物（與酸反應生成鹽和水） Fe2O3、CuO 、 MgO (多數為金屬氧化物）、
兩性氧化物（與酸、鹼反應生成鹽和水） Al2O3、ZnO
不成鹽氧化物 NO2、NO、CO、 (鹽中的N的化合價無+2、+3、C無+2）
分散系 溶液（很穩定） 分散質粒子小於1nm，透明、穩定、均一
膠體（介穩定狀態） 分散質粒子1nm-100nm，較透明、穩定、均一
濁液（分懸、乳濁液） 分散質粒子大於100nm，不透明、不穩定、不均一
化學反應的分類 四大基本反應類型 化合：2SO2+ O2 2SO3
分解：2NaHCO3 Na2CO3 +CO2↑+ H2O
置換：Cl2 +2KI ===2KCl+I2
復分解：2NH4Cl＋Ca(OH)2 CaCl2＋2NH3↑＋2H2O
是否有離子參加反應（電解質在水溶液中） 離子反應：Cl2＋H2O = HCl＋HClO
非離子反應：2Fe＋3Cl2 2FeCl3
是否有元素電子得失或偏移（有升降價） 氧化還原反應：2Na+2H2O=2NaOH+H2↑
非氧化還原反應：Al(OH)3 + NaOH = NaAlO2 + 2H2O
熱量的放出或吸收 放熱反應：3Fe＋2O2 Fe3O4
吸熱反應：C+CO2 2CO
第二章 化學物質及變化-2-離子反應
電解質（酸、鹼、鹽、水） 在水溶液里或熔融狀態下本身能夠導電的化合物
非電解質（包括CO2、SO2） 在水溶液里或熔融狀態下不能夠導電的化合物
碳酸的電離方程式 H2CO3 H＋＋HCO3－ （弱電解質用「 」
NaHCO3的電離方程式 NaHCO3＝Na＋＋HCO3－ （強電解質用「 = 」
離子反應式 用實際參加反應的離子所表示的式子
離子反應式寫法 一寫、二改、三刪、四查
單質、氧化物、氣體、難溶、難電離的物質要保留分子式
離子共存 有顏色的離子 MnO4-紫紅、Fe3+棕黃、Fe2+淺綠、Cu2+藍色
與H+不共存（弱酸根） OH-、CO32-、SO32-、SiO32-、AlO2-、S2-、F- 等
與OH-不共存（弱鹼金屬陽離子） H+、Fe3+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Al3+、Mg2+、NH4+ 等
與H+和OH-都不共存 HCO3-、HSO3-、HS-、 等
常見生成沉澱 Ba2+、Ca2+與SO42-、CO32- Ag+與Cl-
膠體 膠體的性質（介穩定） 丁達爾現象、布朗運動、電泳、聚沉
判斷膠體最簡單的方法 丁達爾現象
膠體提純 滲析（膠體微粒不能透過半透膜）
Fe(OH)3膠體制備的方法 取燒杯盛20mL蒸餾水，加熱至沸騰，然後逐滴加入飽和FeCl3溶液1mL～2mL。繼續煮沸至溶液呈紅褐色。觀察所得紅褐色液體Fe(OH)3膠體。
Fe(OH)3膠體制備方程式 FeCl3+3H2O Fe(OH)3(膠體) +3HCl
膠體凝聚的條件 加熱、加電解質、加相反電性的膠體
第二章 化學物質及變化-3-氧化還原反應
氧化還原反應的本質 有電子轉移(得失或偏移)
氧化還原反應的特徵 元素化合價的升降（不一定有氧的得失）
升失氧 還原劑、還原性、失電子、（升價）、 被氧化、發生氧化反應成氧化產物
降得還 氧化劑、氧化性、得電子、 （降價）、 被還原、發生還原反應成還原產物
化合反應 不一定是氧化還原反應，一般有單質參加的化合反應或有單質生成的分解反應才屬氧化還原反應
分解反應
置換反應 一定是氧化還原反應
復分解反應 一定不是氧化還原反應
氣體的檢驗 NH3的檢驗 用濕潤的紅色石蕊試紙變藍
SO2的檢驗 用品紅溶液褪色
SO2的吸收 用KMnO4溶液 (強氧化性)
CO2的檢驗 用澄清石灰水變濁
Cl2的檢驗 用濕潤的KI 澱粉試紙變藍
NO的檢驗 打開瓶蓋後遇空氣變紅棕色
離子的檢驗 NH4+的檢驗 加NaOH溶液加熱後放出氣體用濕潤的紅色石蕊試紙變藍
Fe3+的檢驗 ①加NaOH溶液有紅褐色沉澱②加KSCN溶液出現血紅色
Fe2+的檢驗 ①加NaOH溶液有白色沉澱馬上變灰綠色,最終變紅褐色②加KSCN溶液無現象,再加氯水後出現血紅色
SO42-的檢驗 先加HCl無現象後加BaCl2溶液有不溶於酸的白色沉澱
Cl-、(Br-、I -)的檢驗 先加AgNO3後加HNO3溶液有不溶於酸的白色沉澱AgCl (淡黃色沉澱AgBr、黃色沉澱AgI）
NO3 - 的檢驗 加濃縮後加入少量濃硫酸和幾塊銅片加熱有紅棕色的氣體放出（NO2）
物質的保存 K、Na 保存在煤油中（防水、防O2）
見光易分解的物質 用棕色瓶（HNO3、AgNO3、氯水、HClO 等）
鹼性物質 用橡膠塞不能用玻璃塞（Na2SiO3、NaOH、Na2CO3)
酸性、強氧化性物質 用玻璃塞不能用橡膠塞（HSO4、HNO3、KMnO4)
物質的保存 F2、HF（氫氟酸） 用塑料瓶不能用玻璃瓶（與SiO2反應腐蝕玻璃)
保存在水中 白磷（防在空氣中自燃）、Br2（防止揮發）
地殼中含量最多的元素 氧O、硅Si、鋁Al、鐵Fe
地殼有游離態存在的元素 金、鐵（隕石）、硫（火山口附近）
金屬共同的物理性質 有金屬光澤、不透明、易導電、導熱、延展性
能與HCl和NaOH都能反應的物質 兩性：Al、Al2O3、Al(OH)3
弱酸的酸式鹽：NaHCO3、NaHSO3、NaHS
弱酸的銨鹽：（NH4）2CO3、(NH4)2S
兩性金屬 鋅Zn、鋁Al（與酸和鹼都放H2）
鈍化金屬 鐵Fe、鋁Al（被冷的濃H2SO4、濃HNO3）
酸化學性質 稀、濃硫酸的通性 1強酸性----反應生成鹽
2高沸點酸，難揮發性——制備易揮發性酸
濃硫酸的特性 1、吸水性—做乾燥，不能乾燥NH3、H2S
2、脫水性—使有機物脫水炭化
3、強氧化性——與不活潑金屬、非金屬、還原性物質反應
硝酸 HNO3 1、強酸性 2、強氧化性 3、不穩定性 （見光、受熱）
次氯酸 HClO 1、弱酸性 2、強氧化性 3、不穩定性 （見光、受熱）
硅酸 H2SiO3 1、弱酸性 2、難溶性 3、不穩定性 （熱)
漂白 氧化型（永久） 強氧化性：HClO、Na2O2、O3、濃H2SO4、濃 HNO3
加合型（暫時） SO2 （使品紅褪色，不能使石蕊變紅後褪色）
吸附型（物理） 活性碳 明礬溶液生成的Al(OH)3膠體
水溶液 氯水主要成分 分子： Cl2、 H2O、 HClO
離子： H＋、Cl－、ClO－
氨水主要成分
分子：NH3 H2O NH3·H2O
離子：NH4+ OHˉ
氯水與液氯、氨水與液氨的區別 氯水、氨水屬混合物、液氯與液氨屬純凈物
氯原子Cl與氯離子Cl-的區別 最外層電子數不同，化學性質不同，氯離子Cl-達穩定結構
氣體 極易溶於水（噴泉） NH3（1：700） HCl (1:500)
只能用排氣法收集 NO2 NH3 HCl
只能用排氣法收集 NO N2 CO
鈉與水的反應 現象: ①浮、②熔、③游、④噝、⑤紅 ①鈉浮在水面上——密度小於水；②水蒸氣——放熱；③熔化成一個小球——溶點低；④在水面上游動——生成氣體；噝噝發出響聲——反應劇烈；⑤變色——生成鹼
俗名 蘇打Na2CO3、小蘇打NaHCO3 水玻璃：Na2SiO3的水溶液 漂白粉主要成分：Ca(ClO)2、CaCl2，有效成分Ca(ClO)2
用途 Na2O2(淡黃色)用作呼吸面具， Al(OH)3和NaHCO3 (小蘇打）可中和胃酸
明礬用作凈水劑，次氯酸HClO殺菌、消毒、永久性漂白、SO2暫時性漂白
自來水常用Cl2來消毒、殺菌但產生致癌的有機氯,改用廣譜高效消毒劑二氧化氯(ClO2)
Fe2O3—紅色油漆和塗料；Al2O3—耐火材料,NH3可用於氮肥、製冷劑。
晶體硅Si作半導體、太陽能電池; SiO2可作光導纖維；硅膠是常用的乾燥劑及催化劑的載體。水玻璃可做肥皂填料、木材防腐防火劑及黏膠
② 蛋白質的分離方法有哪些它們各依據蛋白質的什麼性質或特點
（一）水溶液提取法
稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑,通常用量是原材料體積的1-5倍,提取時需要均勻的攪拌,以利於蛋白質的溶解.提取的溫度要視有效成份性質而定.一方面,多數蛋白質的溶解度隨著溫度的升高而增大,因此,溫度高利於溶解,縮短提取時間.但另一方面,溫度升高會使蛋白質變性失活,因此,基於這一點考慮提取蛋白質和酶時一般採用低溫（5度以下）操作.為了避免蛋白質提以過程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制劑（如二異丙基氟磷酸,碘乙酸等）.
下面著重討論提取液的pH值和鹽濃度的選擇.
1、pH值
蛋白質,酶是具有等電點的兩性電解質,提取液的pH值應選擇在偏離等電點兩側的pH
范圍內.用稀酸或稀鹼提取時,應防止過酸或過鹼而引起蛋白質可解離基團發生變化,從而導致蛋白質構象的不可逆變化,一般來說,鹼性蛋白質用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白質用偏鹼性的提取液.
2、鹽濃度
稀濃度可促進蛋白質的溶,稱為鹽溶作用.同時稀鹽溶液因鹽離子與蛋白質部分結合,具有保護蛋白質不易變性的優點,因此在提取液中加入少量NaCl等中性鹽,一般以0.15摩爾.升濃度為宜.緩沖液常採用0.02-0.05M磷酸鹽和碳酸鹽等滲鹽溶液.
（二）有機溶劑提取法
一些和脂質結合比較牢固或分子中非極性側鏈較多的蛋白質和酶,不溶於水、稀鹽溶液、稀酸或稀鹼中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有機溶劑,它們具的一定的親水性,還有較強的親脂性、是理想的提脂蛋白的提取液.但必須在低溫下操作.丁醇提取法對提取一些與脂質結合緊密的蛋白質和酶特別優越,一是因為丁醇親脂性強,特別是溶解磷脂的能力強；二是丁醇兼具親水性,在溶解度范圍內（度為10%,40度為6.6%）不會引起酶的變性失活.另外,丁醇提取法的pH及溫度選擇范圍較廣,也適用於動植物及微生物材料.
二、蛋白質的分離純化
蛋白質的分離純化方法很多,主要有：
（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法
1、蛋白質的鹽析
中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降並先後析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子（如硫酸銨的SO4和NH4)有很強的水化力,可奪取蛋白質分子的水化層,使之「失水」,於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出.鹽析時若溶液pH在蛋白質等電點則效果更好.由於各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同,故鹽析所需的鹽濃度也不一樣,因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱.
影響鹽析的因素有：（1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質在低溫（4度）操作外,一般可在室溫中進行.一般溫度低蛋白質溶介度降低.但有的蛋白質（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低,更容易鹽析.（2）pH值：大多數蛋白質在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低.（3）蛋白質濃度：蛋白質濃度高時,欲分離的蛋白質常常夾雜著其他蛋白質地一起沉澱出來（共沉現象）.因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋,使蛋白質含量在2.5-3.0%.
蛋白質鹽析常用的中性鹽,主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等.
其中應用最多的硫酸銨,它的優點是溫度系數小而溶解度大（25度時飽和溶液為4.1M,即767克/升；0度時飽和溶解度為3.9M,即676克/升）,在這一溶解度范圍內,許多蛋白質和酶都可以鹽析出來；另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好,不易引起蛋白質變性.硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間,當用其他pH值進行鹽析時,需用硫酸或氨水調節.
蛋白質在用鹽析沉澱分離後,需要將蛋白質中的鹽除去,常用的辦法是透析,即把蛋白質溶液裝入秀析袋內（常用的是玻璃紙）,用緩沖液進行透析,並不斷的更換緩沖液,因透析所需時間較長,所以最好在低溫中進行.此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽,所用的時間就比較短.
2、等電點沉澱法
蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉澱,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用.
3、低溫有機溶劑沉澱法
用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低並析出,此法分辨力比鹽析高,但蛋白質較易變性,應在低溫下進行.
（二）根據蛋白質分子大小的差別的分離方法
1、透析與超濾
透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質分開.
超濾法是利用高壓力或離心力,強使水和其他小的溶質分子通過半透膜,而蛋白質留在膜上,可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質.
2、凝膠過濾法
也稱分子排阻層析或分子篩層析,這是根據分子大小分離蛋白質混合物最有效的方法之一.柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠（Sephadex
ged）和瓊脂糖凝膠（agarose gel）.
（三）根據蛋白質帶電性質進行分離
蛋白質在不同pH環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開.
1、電泳法
各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開.值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用於分析和制備各種蛋白質.
2、離子交換層析法
離子交換劑有陽離子交換劑（如：羧甲基纖維素；CM-纖維素）和陰離子交換劑（二乙氨基乙基纖維素；DEAE?FONT
FACE="宋體"
LANG="ZH-CN">纖維素）,當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨後用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來.（詳見層析技術章）
（四）根據配體特異性的分離方法－親和色譜法
親和層析法（aflinity
chromatography）是分離蛋白質的一種極為有效的方法,它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高.這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand）的分子能特異而非共價地結合.其基本原理：蛋白質在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質,因此蛋白質的分離（Separation）,提純（Purification）
和鑒定（Characterization）是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一套現成的方法能移把任何一種蛋白質從復雜的混合蛋白質中提取出來,因此往往採取幾種方法聯合使用.
細胞的破碎
1、高速組織搗碎：將材料配成稀糊狀液,放置於筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關後,逐步加速至所需速度.此法適用於動物內臟組織、植物肉質種子等.
2、玻璃勻漿器勻漿：先將剪碎的組織置於管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用於量少和動物臟器組織.
3、超聲波處理法：用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震盪破裂,此法多適用於微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應採取相應降溫措施.對超聲波敏感和核酸應慎用.
4、反復凍融法：將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎.
5、化學處理法：有些動物細胞,例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可採用溶菌酶處理效果更好.
無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或減慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺醯氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合於目的物質的提取.
濃縮、乾燥及保存
一、樣品的濃縮
生物大分子在制備過程中由於過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮.常用的濃縮方法的：
1、減壓加溫蒸發濃縮
通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用於一些不耐熱的生物大分子的濃縮.
2、空氣流動蒸發濃縮
空氣的流動可使液體加速蒸發,鋪成薄層的溶液,表面不斷通過空氣流；或將生物大分子溶液裝入透析袋內置於冷室,用電扇對准吹風,使透過膜外的溶劑不沁蒸發,而達到濃縮目的,此法濃縮速度慢,不適於大量溶液的濃縮.
3、冰凍法
生物大分子在低溫結成冰,鹽類及生物大分子不進入冰內而留在液相中,操作時先將待濃縮的溶液冷卻使之變成固體,然後緩慢地融解,利用溶劑與溶質融點介點的差別而達到除去大部分溶劑的目的.如蛋白質和酶的鹽溶液用此法濃縮時,不含蛋白質和酶的純冰結晶浮於液面,蛋白質和酶則集中於下層溶液中,移去上層冰塊,可得蛋白質和酶的濃縮液.
4、吸收法
通過吸收劑直接收除去溶液中溶液分子使之濃縮.所用的吸收劑必需與溶液不起化學反應,對生物大分子不吸附,易與溶液分開.常用的吸收劑有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝膠等,使用聚乙二醇吸收劑時,先將生物大分子溶液裝入半透膜的袋裡,外加聚乙二醇復蓋置於4度下,袋內溶劑滲出即被聚乙二醇迅速吸去,聚乙二醇被水飽和後要更換新的直至達到所需要的體積.
5、超濾法
超濾法是使用一種特別的薄膜對溶液中各種溶質分子進行選擇性過濾的方法,不液體在一定壓力下（氮氣壓或真空泵壓）通過膜時,溶劑和小分子透過,大分子受阻保留,這是近年來發展起來的新方法,最適於生物大分子尤其是蛋白質和酶的濃縮或脫鹽,並具有成本低,操作方便,條件溫和,能較好地保持生物大分子的活性,回收率高等優點.應用超濾法關鍵在於膜的選擇,不同類型和規格的膜,水的流速,分子量截止值（即大體上能被膜保留分子最小分子量值）等參數均不同,必須根據工作需要來選用.另外,超濾裝置形式,溶質成份及性質、溶液濃度等都對超濾效果的一定影響.Diaflo
超濾膜的分子量截留值：
膜名稱分子量截留值孔的大的平均直徑
XM－300300,000140
XM－200100,00055
XM－5050,00030
PM－30 30,00022
UM－2020,00018
PM－1010,00015
UM－21,00012
UM05500 10
用上面的超濾膜製成空心的纖維管,將很多根這樣的管攏成一束,管的兩端與低離子強度的緩沖液相連,使緩沖液不斷地在管中流動.然後將纖維管浸入待透析的蛋白質溶液中.當緩沖液流過纖維管時,則小分子很易透過膜而擴散,大分子則不能.這就是纖維過濾秀析法,由於透析面積增大,因而使透析時間縮短10倍.
二、乾燥
生物大分子制備得到產品,為防止變質,易於保存,常需要乾燥處理,最常用的方法是冷凍乾燥和真空乾燥.真空乾燥適用於不耐高溫,易於氧化物質的乾燥和保存,整個裝置包括乾燥器、冷凝器及真空乾燥原理外,同時增加了溫度因素.在相同壓力下,水蒸汽壓隨溫度下降而下降,故在低溫低壓下,冰很易升華為氣體.操作時一般先將待乾燥的液體冷凍到冰點以下使之變成固體,然後在低溫低壓下將溶劑變成氣體而除去.此法干後的產品具有疏鬆、溶解度好、保持天然結構等優點,適用於各類生物大分子的乾燥保存.
三、貯存
生物大分子的穩定性與保存方法的很大關系.乾燥的製品一般比較穩定,在低溫情況下其活性可在數日甚至數年無明顯變化,貯藏要求簡單,只要將乾燥的樣品置於乾燥器內（內裝有乾燥劑）密封,保持0－4度冰箱即可,液態貯藏時應注意以下幾點.
1、樣品不能太稀,必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏,樣品太稀易使生物大分子變性.
2、一般需加入防腐劑和穩定劑,常用的防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等.蛋白質和酶常用的穩定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等,如酶也可加入底物和輔酶以提高其穩定性.此外,鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用.核酸大分子一般保存在氯化鈉或檸檬酸鈉的標准緩沖液中.
3、貯藏溫度要求低,大多數在0度左右冰箱保存,有的則要求更低,應視不同物質而定.