A. 超螺旋DNA的Kb換算成KDa如何換算,求大神分解賜教。希望可以分解的精細一點,初入生物狗頭腦一片空白
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B. 一蛋白質譜測定分子量10kDa,但是SDS-PAGE測的結果是21kDa,可能原因是什麼
這種情況應該是形成二聚體或多聚體了。
C. 蛋白質分子量為10kDa,其直徑大約有多大100kDa呢
10kDa
這個數字+單位所描述的是1mol這個蛋白質的分子質量是10kg,僅僅是對質量的一個表示,而直徑的長短取決於其3D空間構像,僅僅知道質量的話,直徑是無法計算的。計算的方法只有看它的3D結晶結構來測量或者找和這個蛋白質結構及其相似的有3D結晶的蛋白質來推斷預測。
D. 15ml,10kd超濾管轉速要多大
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截版留分子量不應大於權目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
E. 10kda蛋白用多少濃度的page
8-10%的分離膠,電泳時注意下marker,別把17KDa跑出來就行,濕轉100V90min妥妥的
F. 選擇分離60KDa 的蛋白選擇什麼種類的超濾膜想讓蛋白留在濃縮液里
那就是濃縮,如果要提高回收率用10K的超濾膜
G. 用超濾膜(3kDa)抽濾後,如何收集濾膜上的高分子物質
這個只能清洗了,就看你截留的是什麼物質,用溶劑去洗,或者也可以藉助離心機。