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蒸餾黃會染色嗎

發布時間:2023-02-23 00:27:04

1. 染色問題

孔雀石綠
性 狀: 帶有金屬光澤的綠色結晶。易溶於水,溶液呈藍綠色;溶於甲醇、乙醇和戊醇。
孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結晶體,又名鹼性綠、嚴基塊綠、孔雀綠,其既是殺真菌劑,又是染料,易溶於水,溶液呈藍綠色;溶於甲醇、乙醇和戊醇。長期以來,漁民都用它來預防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等,而且為了使鱗受損的魚延長生命,在運輸過程中和存放池內,也常使用孔雀石綠。科研結果表明,孔雀石綠在魚內殘留時間太長,且其具有高毒素、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用,鑒於此,許多國家均將孔雀石綠列為水產養殖禁用葯物。
常用染料性能簡介

(一)天然染料

1
、蘇木精

蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來的一種色素,是最常用的染料
之一。蘇木精不能直接染色,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)後才能使用,
這叫做「成熟」
。蘇木精的「成熟」過程需時較長,配置後時間愈久,染色力愈強。被染材料必須經金屬鹽
作媒劑作用後才有著色力。所以在配製蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和
鐵明礬等。

蘇木精是淡黃色到銹紫色的結晶體,易溶於酒精,微溶於水和甘油,是染細胞核的優良材料,他能把細胞
中不同的結構分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸—
酒精)分化後呈紅色,水洗後仍恢復青藍色,用鹼性溶液(如氨水)分化後呈藍色,水洗後呈藍黑色。

2
、洋紅

洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產的雌性胭脂蟲乾燥後,磨成粉末,提取出蟲紅,再用明礬處
理,除去其中雜質,就製成洋紅。單純的洋紅不能染色,要經酸性或鹼性溶液溶解後才能染色。常用的酸
性溶液有冰醋酸或苦味酸,鹼性溶液有氨水、硼砂等。

洋紅使細胞核的優良染料,染色的標本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜於小型材料的整
體染色。用洋紅配成的溶液染色後能保持幾年。洋紅溶液出現渾濁時要過濾後再用。

(二)人工染料

人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,種類很多,應用極廣。它的缺點是經日光照射容易褪色,苯胺藍、
亮綠、甲基綠等更易褪色。在製片中注意掌握酸鹼度,並避免日光直射,也能經幾年不褪色。

1
、酸性品紅

酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容於水,略溶於酒精(
0.3%

。他是良好的細胞制染
色劑,在動物製片上應用很廣,在植物製片上用來染皮層、髓部等薄壁細胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染,
能顯示線粒體。

組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,可增強它的染色力。酸性品紅容易跟鹼起作用,所以染色過度,
易在自來水中褪色。

2
、剛果紅

剛果紅是酸性染料,呈棗紅色粉末狀,能溶於水喝酒精,遇酸呈藍色。他能作染料,也用作指
示劑。他在植物製片中常作為蘇木精或其他細胞染料的襯墊劑。他用來染細胞質時,能把膠制或纖維素染
成紅色。在動物組織製片中用來染神經軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,也
可用作類澱粉染色,由於他能溶於水和酒精,所以洗滌和脫水處理要迅速。

3
、甲基藍

甲基藍是弱酸性染料,能溶於水和酒精。甲基藍在動植物的製片技術方面應用極廣。他跟伊紅
合用能染神經細胞,也是細菌製片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍極易
氧化,因此用他染色後不能長久保存。

4
、固綠

固綠是酸性染料,能溶於水(溶解度為
4%
)和酒精(溶解度為
9%

。固綠是一種染含有漿質的
纖維素細胞組織的染色劑,在染細胞和植物組織上應用極廣。他和蘇木精、番紅並列為植物組織學上三中

最常用的染料。

5
、蘇丹Ⅲ

蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,呈紅色粉末狀,易溶於脂肪和酒精(溶解度為
0.15%

。蘇丹Ⅲ是脂肪染
色劑。

6

伊紅

這類染料種類很多。
常用的伊紅
Y

是酸性染料,
呈紅色帶藍的小結晶或棕色粉末狀,
溶於水

15
攝氏度是溶解度達
44%
)和酒精(溶於無水酒精的溶解度為
2%

。伊紅在動物製片中廣泛應用,是很好的
細胞質染料,常用作蘇木精的襯染劑。

7
、鹼性品(復)紅

鹼性品紅是鹼性染料,呈暗紅色粉末或結晶狀,能溶於水(溶解度
1%
)和酒精(溶解

8%

。鹼性品紅在生物學製片中用途很廣,可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復紅性顆粒和中樞神經
組織的核質。在生物學製片中用來染維管束植物的木質化壁,又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細菌學
製片中,長用來鑒別結核桿菌。在

爾根氏反應中用作組織化學試劑,已核查脫氧核糖核酸。

8
、結晶紫

結晶紫是鹼性染料,能溶於水(溶解度
9%
)和酒精(溶解度
8.75%

。結晶紫在細胞學、組織
學和細菌學等方面應用極廣,是一種優良的染色劑。他是細胞核染色常用的,用來顯示染色體的中心體,
並可染澱粉、纖維蛋白、神經膠質等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細胞核不能成功時,用它能得到
良好的結果。用番紅和結晶紫作染色體的二重染色,染色體染成紅色,紡錘絲染成紫色,所以也是一種顯
示細胞分裂的優良染色劑。用結晶紫染纖毛,效果也很好。用結晶紫染色的切片,缺點是不易長久保存。

9
、龍膽紫

龍膽紫是混合的鹼性染料,主要是結晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龍膽紫能跟結晶紫互
相替用。醫葯上用的紫葯水,主要成分是甲基紫,需要時能代替龍膽紫和結晶紫。

10
、中性紅

中性紅是弱鹼性染料,呈紅色粉末狀,能溶於水(溶解度
4%
)和酒精(溶解度
1.8%

。它的
鹼性溶液中呈現黃色,在強鹼性溶液中呈藍色,而在弱酸性溶液中呈紅色,所以能用作指示劑。中性紅無
毒,
常做活體染色的染料,
用來染原生動物和顯示動植物組織中活細胞的內含物等。
陳久的中性紅水溶液,
用作顯示尼爾體的常用染料。

11
、番紅

番紅是鹼性染料,能溶於水和酒精。番紅是細胞學和動植物組織學生常用的染料,能染細胞核、
染色體和植物蛋白質,示維管束植物木質化、木栓化和角質化的組織,還能染孢子囊。

12
、亞甲藍或美藍

亞甲藍或美藍是鹼性染料,呈藍色粉末狀,能溶於水(溶解度
9.5%
)和酒精(溶解度
6%

。亞甲藍是動物學和細胞學染色上十分重要的細胞核染料,其優點是染色不會過深。

13
、甲基綠

甲基綠是鹼性染料。它是綠色粉末狀,能溶於水(溶解度
8%
)和酒精(溶解度
3%

。甲基綠
是最有價值的細胞和染色劑,細胞學上常用來染染色質,跟酸性品紅一起可作植物木質部的染色。

4
、檢查脂肪的試劑

蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液


0.2
克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)
,放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過濾後密閉在試
劑瓶內保存備用。

5
、酸鹼指示劑

配方一

酚酞試劑和試紙

酚酞試劑


1
克酚酞,溶解在
100
毫升
60%
的酒精溶液里,裝在試劑瓶內密閉保存。

酚態試紙


1
克酚酞,溶解在
100
毫升
95%
酒精溶液里,加入
00
毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中
浸濕後,取出,放在無氨氣影響處晾乾。

酚泰試劑(試紙)

pH
值變色范圍
8.2

10
,在酸性和中性溶液中都無色,再鹼性溶液中呈深紅色。

配方二

紅藍石蕊試紙

取市售石蕊
1
克,放在
80
毫升
10%
酒精溶液中攪拌,使它溶解,然後過濾。把濾液分成兩份。
1
份滴入稀
磷酸或稀硫酸,到出現紅色為止。另
1
份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現藍色為止。在上述制備的溶液中分
別浸濕濾紙條,隨後取出濾紙條,放在蔽光處、無酸鹼性氣體影響的地方晾乾,即的紅、藍兩種石蕊試紙。

紅石蕊試紙在鹼性溶液中變藍,藍石蕊試紙在酸性溶液中變紅。

6
、檢查二氧化碳的試劑

檢查二氧化碳的試劑,可用溴代麝香草酚藍溶液和石灰水。

配方一

溴代麝香草酚藍溶液


0.1
克溴代麝香草酚藍,溶解在
100
毫升蒸餾水裡,滴入少量
0.1%
氫氧化鉀溶液,使它成為弱鹼性溶液
而呈藍色。

溴代麝香草酚藍溶液
pH
值變色范圍是
6.0
(黃)~
7.6
(藍)
。待測物中如果有二氧化碳,會形成碳酸而使
溶液變成黃色。

配方二

石灰水

在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣)
,變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態時為止。在石灰
水澄清後,傾出上層清液,用濾紙過濾,放在密閉瓶內保存。

如果測定的物質中有二氧化碳,會生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。

7
、檢查細胞生活力的試劑

檢查細胞有無生活力,
可用中性紅甲基藍試劑。
配製的方法是先分別配製
1%
中性紅溶液和
1%
甲基藍溶液,
這兩種溶液各取
1
份混合,用來鑒定細胞的死活。該試劑使活細胞的液泡染上紅色,而使死細胞全部染成
藍色。

(二)分離液

1
、肌細胞分離液

配方一

馬克凱郎(
Maccallum
)液


1
份濃硝酸、
2
份甘油、
3
份水,混合後就得到馬克凱郎液。

把新鮮的肌肉組織小塊(橫紋肌、心肌和平滑肌)投入這種溶液里浸漬,分離時間需
1

3
日。這種溶液尤
其適於分離橫紋肌核心肌細胞。

配方二

氫氧化鉀溶液


35
克氫氧化鉀,放在
100
毫升蒸餾水中,加熱,使它完全溶解後,在室溫下冷卻。

把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中,浸泡
15

30
分鍾後,肌細胞便可分離。

2
、上皮細胞分離液

配方一

福爾馬林—氯化鉀溶液

稱取
58.44
克氯化鈉,用蒸餾水溶解,再稀釋到
1000
毫升,加入
2
毫升福爾馬林。

這種溶液是很好的上皮細胞分離液,分離很迅速,而且能保護纖細的上皮細胞纖毛。小腸和氣管的上皮組
織小塊,放在此溶液里
2
小時即可分離,口腔和皮膚上皮組織小塊的細胞分離一般需
3
日左右。

配方二

水和氯醛溶液

稱取
5
克水和氯醛,用蒸餾水溶解,再稀釋到
100
毫升,就得到
5%
水合氯醛溶液。

從洗凈的動物胃、腸和口腔內壁上取下上皮組織一小塊,投入以上溶液中,浸泡
24

48
小時。

3
、神經細胞分離液

配方一

可以用上皮細胞分離液配方一福爾馬林—氯化鈉溶液來分離神經細胞(見
2



配方二

硼酸生理鹽水溶液

在生理鹽水溶液內加入一些硼酸,攪拌到不再溶解時為止,使成為飽和溶液。

把脊椎灰質和腦皮質部位的神經組織一小塊投入這種溶液中分離。

4
、植物莖細胞分離液

傑弗里氏(
Jeffrey

s
)液

取等量的
10%
鉻酸溶液和
10%
硝酸溶液混合,成鉻酸—硝酸溶液。

這種溶液用來分離木本植物莖部的導管、管胞、篩管、伴胞和韌皮纖維等。把材料切成小塊放在水裡,加
熱煮沸,冷卻後再加熱煮沸。這樣重復幾次,到材料全部沉於水底後,投入分離液內,分離時間是
24

48
小時。

5
、植物根尖細胞分離液

配方一

鹽酸—酒精溶液


1

95%
酒精中慢慢的加入
1
份濃鹽酸,即成鹽酸—酒精溶液,裝瓶密閉保存。

把植物根尖部位截下一小段,投入以上溶液中分離。

配方二

4%
鹽酸溶液

配製
4%
鹽酸溶液。

截下植物根尖部位,
投入盛有
4%
鹽酸溶液的小燒杯內,

60
攝氏度溫水中隔水溫熱
1

2
分鍾,
使根尖軟
而不酥,這時分離效果最好。

6
、植物纖維分離液


10
克氫氧化鈉(或氫氧化鉀)
,溶解在
90
毫升水裡,製成
10%
氫氧化鈉(或氫氧化鉀)溶液,放在瓶里
密閉保存。

把植物莖縱切成細條,剪成小段後,投入分離液內。

7
、植物細胞質壁分離液

配方一

30%
蔗糖溶液


30
克蔗糖,溶解在
70
毫升蒸餾水裡,裝瓶備用。

取固綠
0.1
克,溶於
100
毫升
95%
酒精中,即成
0.1%
固綠—酒精溶液。

該液能染色纖維素細胞壁,還用於動植物中作漿質染色劑。

配方二

纖維素細胞壁染液(Ⅱ)

氯化鋅

20


碘化鉀

6.5




1.5


蒸餾水加至
100
毫升

先把氯化鋅溶於少量蒸餾水中,再加入
6.5
克碘化鉀,在碘完全溶解後,用蒸餾水稀釋到
100
毫升,即成
碘—氯化鋅溶液。

該染液能把細胞壁染成紫色,胞質染成淡黃色,胞核染成棕色。

配方一

纖維素細胞壁染液(Ⅲ)

甲液


1
克碘和
1.5
克碘化鉀,溶於
100
毫升蒸餾水中,即成
1%
碘液。

乙液


7
份硫酸和
3
份蒸餾水相混,即成
66.5%
硫酸溶液。

染色時,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纖維素細胞壁就染成黃色。

配方四

木質化細胞壁染液(Ⅰ)

硫酸化苯胺(或鹽酸話本安)

1


蒸餾水

70


95%
酒精

30


硫酸

30


將上述各組分相混,將細胞材料放入混合液里染色,可是木質化細胞壁呈鮮黃或姜黃色。

配方五

木質化細胞壁染液(Ⅱ)

取間苯三酚
4

5
克,溶於
100
毫升
95%
酒精中,即成間苯三酚—酒精液。

先在材料上滴上
1
滴濃鹽酸,然後滴上間苯三酚—酒精液
1
滴,木質化的細胞壁就染上櫻紅或紫紅色。

配方六

木質化細胞壁染液(Ⅲ)


1
克番紅,溶於
99
毫升蒸餾水中,即成
1%
番紅溶液。

4
、細胞質染色劑

配方一

伊紅染液

伊紅染液一般配用水溶液和酒精溶液兩種。


1
)取
1
克伊紅,溶於
99
毫升蒸餾水中,即成
1%
伊紅水溶液(市售紅墨水內含伊紅成分,可以用紅墨水
稀釋液來代替本溶液)



2
)取
1
克伊紅,溶於
99
毫升
70%
酒精中,即成
1%
伊紅—酒精溶液。

配方二

甲基藍染液


1
克甲基藍,溶於
29
毫升
70%
酒精中,加入
70
毫升蒸餾水,即成
1%
甲基藍染液。

配方三

亮綠染液


0.5
克亮綠,溶解在
100
毫升蒸餾水中,即成
0.5%
亮綠溶液。

5
、細胞核染色劑

配方一

甲基綠染液


1
克甲基綠,溶於
99
毫升蒸餾水中,加入
1
毫升冰醋酸。本染液能染細胞核,還用來染木質化細胞壁。

配方二

龍膽紫染液


1
克龍膽紫,溶於少量
2%
醋酸溶液中,加
2%
醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。

配方三

美藍(亞甲基藍)染液


0.5
克美藍,溶於
30
毫升
95%
酒精中,加
100
毫升
0.01%
氫氧化鉀溶液,保存在棕色瓶內



此溶液能染細胞核,還用來染細菌、血和神經組織等。

配方四

硼砂—洋紅染液


4
克硼砂,溶於
96
毫升蒸餾水中。再加入
2
克洋紅,加熱溶解後煮沸
30
分鍾,靜置
3
日,用
100
毫升
70%
酒精沖淡,放置
24
小時後過濾。

此染液能染細胞核,還用來染糊粉粒和一般動物、植物的整體染色,如水螅、血吸蟲等整體標本。

配方五

德氏(
Delafield

s
)蘇木精染液

甲液


1
蘇木精,溶於
6
毫升無水酒精中,即成蘇木精—酒精溶液。

乙液


10
克銨礬溶於
90
毫升蒸餾水中,即成
10%
銨礬水溶液。

取甲液逐滴加入到乙液中,用紙遮蓋,放在陽光明亮處,使它充分氧化。
3

4
天後將溶液過濾,在濾液中
加入
25
毫升甘油和
25
毫升甲醇,保存在密閉玻璃瓶內。靜置
1

2
個月,待該液顏色變深時過濾,可長久
保存。

本染液是染色體的優良染色劑,除能染細胞核外,還用來染纖維素、細胞壁和動植物組織。

配方六

席夫(
Schiff

s
)試劑

稱取
0.5
克鹼性品紅,加到
100
毫升煮沸的蒸餾水中,再微微加熱
5
分鍾,不斷攪拌,使它溶解。在溶液
冷卻到
50
攝氏度時過濾,
濾液中加入
10
毫升
1N
鹽酸。
再冷卻到
25
攝氏度時加入
0.5
克偏重亞硫酸鈉



或無水亞硫酸氫鈉(


。把溶液裝入棕色試劑瓶內,搖盪後,塞緊瓶塞,放在黑暗中
24
小時。在溶液顏色
退到淡黃色時,加入
0.5
克活性炭,用力搖盪
1
分鍾,過濾後把濾液貯在棕色試劑瓶內,塞緊瓶塞,濾液
應該是無色的。
在使用時勿讓溶液長時間暴露在空氣中和見光
(瓶外用黑紙或暗盒遮光)

如溶液變成紅色,
即失去染色能力。

鹼性品紅是較強的核染色劑,在孚爾根氏(
Feulgen

s
)反應中作為組織化學試劑,以檢查
DNA


6
、染色體染色劑

配方一

醋酸—洋紅染液


45
毫升冰醋酸,加蒸餾水
55
毫升,煮沸後徐徐加入洋紅
1
克,攪拌均勻後加入
1
顆鐵銹釘,煮沸
10

鍾,冷卻後過濾,貯存在棕色瓶內。

配方二

醋酸—地衣紅染液


45
毫升醋酸,跟
55
毫升蒸餾水相混,加熱,徐徐加入地衣紅粉末
1

2
克,攪拌溶解後,緩緩煮沸
2

時。冷卻後過濾,貯存在棕色瓶里。

配方三

龍膽紫染液


1
克龍膽紫,用少量蒸餾水溶解後,加蒸餾水,稀釋到
100
毫升,保存在棕色瓶內。

配方四

甲苯胺藍染液


0.5
克甲苯胺藍,溶解在
100
毫升蒸餾水中,即成
0.5%
甲苯胺藍水溶液。

50%
酒精

85
毫升

福爾馬林

10
毫升

冰醋酸

5
毫升

這種固定液適用於固定一般植物莖、葉組織,昆蟲和甲殼類動物。液組織在這溶液里固定
12
小時,木質化
組織要固定
1
周,材料也可在此液中長期保存。固定後的材料放在
50%
酒精中沖洗
1

2
次。

10
、克來寧堡氏(
Kleinenberg

s
)液

配方


20%
硫酸水溶液內加入苦味酸,直到飽和。

這種固定液適用於雞胚的固定,也用於許多小型海洋生物的固定。

11
、包因氏(
Bouin

s
)液

配方

苦味酸飽和水溶液

75
毫升

冰醋酸

5
毫升

福爾馬林

25
毫升

這是常用的良好固定劑,滲透迅速,固定均勻,組織收縮少,染色後能顯示一般的微細結構。一般動物組
織、無脊椎動物的卵和幼蟲以及一般組織學、胚胎學的材料,如植物組織的根尖和胚囊都可用它來固定。
一般組織固定
24

48
小時,小塊組織固定
4

16
小時,動物材料能在這種固定液中長期保存。固定後,動
物材料用
70%
酒精沖洗凈苦味酸,到無黃色為止(用酒精沖洗時,加幾滴氨水,可加快除去黃色)
;植物材
料用
20%
酒精沖洗幾次。

12
、紹丁氏(
Schaudinn

s
)液

配方

甲液

升汞飽和水溶液

66
毫升

95%
酒精

33
毫升

乙液

冰醋酸

1
毫升

甲、乙液要在臨用前混合。

這種固定液適用於固定有鞭毛的原生動物、植物的精子和游動孢子等。
材料如製作塗布裝片,
可在
40
攝氏
度下固定
10

20
分鍾。

13
、眼球固定液

配方

丙酮

40
毫升

冰醋酸

1.5
毫升

升汞

2


甲醛

10
毫升

蒸餾水

40
毫升

這種固定液適用於眼球的固定,並可在固定液中長期保存。

14
、納瓦興氏(
Nawaschin

s
)液

配方

甲液

鉻酸

1.5


冰醋酸

10
毫升

蒸餾水

90
毫升

乙液

福爾馬林

40
毫升

蒸餾水

60
毫升

臨用前將等量甲、乙液混合。

高等植物有絲分裂材料適宜在這種固定液里固定或長期保存。

15
、綠色標本保存液

配方一

硫酸銅

5




95
毫升

這種保存液適用於綠色植物和一切植物綠色部分的保存。植物放入硫酸銅液後,由綠變黃,再由黃變綠。
這時取出材料,用清水漂洗干凈,浸在
5%
福爾馬林液內長期保存。

配方二

硫酸銅

0.2


95%
酒精

50
毫升

福爾馬林

10
毫升

冰醋酸

5
毫升



35
毫升

先把硫酸銅溶於水中,然後加入配方中的其他組分。綠色標本能長期的貯存在該液中。

配方三

醋酸銅

15

30


50%
醋酸

100
毫升


50%
醋酸中逐漸加入醋酸銅,直到飽和。適用時取原液
1
份,加水
4
份,即成稀釋的硫酸銅溶液。

這種保存液適用於表面有蠟質、蛙質、質地較硬的綠色植物保色。加熱稀釋到醋酸銅溶液,放入植物,輕
輕翻動,到植物由綠轉黃再轉綠色時取出植物,用清水漂洗後,浸入
5%
福爾馬林液內保存。

16
、紅色標本保存液

配方一

甲液

硼酸

3


福爾馬林

4
毫升



400
毫升

乙液

亞硫酸

2
毫升

硼酸

10




488
毫升

把紅色的果實浸在甲液里
1

3
天,
等果實由紅色轉深棕色時取出,
移到乙液里保存,同時在果實內注入少
量乙液。

配方二

氯化鋅

2


福爾馬林

1


甘油

1




40


先把氯化鋅溶解在水裡,然後加入配方中其他組分。溶液如果渾濁而有沉澱,應過濾後使用。紅色果實能
在此液中保存。
2
、阿拉伯樹膠

用阿拉伯樹膠作為封藏劑的優點是便於在這種封藏劑中整理標本形態。
阿拉伯樹膠作為封藏劑有多種配方,
下述配方適於小型昆蟲的整體狀片。

配方

阿拉伯樹膠

8


水合氯醛

20

40


甘油

5
毫升

冰醋酸

3
毫升(可略)

蒸餾水

10
毫升

配置方法

先把純凈的阿拉伯樹膠放在蒸餾水裡,加熱,待膠溶化後,加入水合氯醛,邊加邊攪拌,使它充
分溶解後加入甘油和冰醋酸,攪拌均勻後,貯存在瓶里,密閉保存。貯存時要避免灰塵或濕氣浸入。

3
、乳酸—石炭酸

這種封藏劑用於整體裝片,尤其適用於封藏藻類、菌類、苔蘚的原葉體或其他較小材料。

配方

石炭酸

1


乳酸

1


甘油

1

2


蒸餾水

1


(十一)消毒劑

1
、酒精

70%
的酒精殺菌力最強,它能使蛋白質脫水和變性,在
3

5
分鍾內殺死細菌。因此,它用於消毒和防腐,
適用於皮膚和器械、塑料製品等的消毒。高濃度的酒精(
95

100%
)能引起菌體表層蛋白質凝固,形成保
護層,使酒精分子不易透入,因此殺菌能力反而弱。

2
、碘酒

碘酒是碘和碘化鉀的酒精溶液,
2%
的碘酒在
10
分鍾內能殺死細菌和芽

孢,可用於皮膚的消毒。葯房出售的一般是
2%
的稀碘酒。實驗室內也可自配碘酒,配方為:

碘化鉀

25.




3.5


95%
酒精

95%
酒精

蒸餾水

27
毫升

先取碘化鉀溶在
2
毫升蒸餾水中,再加入碘,攪拌後加入酒精,到碘充分溶解後,補足蒸餾水,即成碘酒。

3
、高錳酸鉀

高錳酸鉀是強氧化劑,有很強的殺菌作用。
0.1%
水溶液用作皮膚消毒,
2

5%
水溶液能在
24
小時內殺死細
菌芽孢。這溶液在空氣中溶液分解,失去氧化能力,要現用現配。

4
、苯酚(石炭酸)

石炭酸是有效的常用殺菌劑,
1%
水溶液能殺死大多數的菌體,
通常用
3

5%
水溶液作接種室噴霧消毒或器
皿的消毒,
5%
以上溶液對皮膚有刺激性。在生物製品中,加入
0.5%
石炭酸可作防腐劑。

5
、來蘇爾

來蘇爾即煤酚皂溶液。它的殺菌效力比石炭酸大
4
倍,通常以
1

2%
溶液用於手的消毒(浸泡
2
分鍾)和
無菌室內噴霧消毒,
5%
溶液多用於各種器械和器皿的消毒。

6
、新潔爾滅

新潔爾滅是常用的消毒劑,主要用於皮膚、醫療器械、器皿、接種室空氣等的消毒滅菌,對許多非芽孢型
病原菌、革蘭氏陽性菌和陰性菌經幾分鍾接觸即滅菌,尤其對格蘭氏陽性菌殺菌力更大。本品原液的濃度

5%
,通常用
0.1

0.25%
水溶液。用新潔爾滅消毒金屬器械時,要在
1
升溶液中加入
5
克亞硝酸鈉,以
防生銹。

7
、福爾馬林

福爾馬林是常用的殺細菌、
真菌劑。
它的
2

5%
水溶液能在
24
小時內殺死細菌芽孢,
常用來消毒器皿和器
具。如果用作無菌室等房屋消毒,取
100
毫升福爾馬林,放在盆內,用小火微熱,促使蒸發,在
10
小時內
可消菌
3
立方米左右體積房屋的空氣。

2. 常用染色劑的染色劑

1、細菌染色劑
配方一 齊氏(Ziehl)石炭酸品紅染液
甲液 取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸餾水中。
乙液 取0.3克鹼性品紅,放入研缽中研磨,逐漸加入10毫升95%酒精,繼續淹沒,使它溶解。
將甲液和乙液混合後,搖勻,過濾,裝瓶,備用。
配方二 羅氏(Loeffler』s)美藍染液
甲液 取5克美藍,溶於100毫升95%酒精中,製成美藍—酒精飽和液。
乙液 取氫氧化鉀0.01克(或1%氫氧化鉀溶液1毫升),溶液也可用於放線菌染色,0.1%濃度可用於酵母菌染色。
配方三 革蘭氏(Gram』s)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液處理,最後用丁液復染。四種液體的配方如下:
甲液(結晶紫液)
(1)結晶紫2克 95%酒精 20毫升
(2)草酸銨0.8克 蒸餾水 80毫升
使用錢江(1)、(2)液相混,靜置48小時後使用。
乙液(碘液)
碘1克 碘化鉀2克 蒸餾水 300毫升
將碘化鉀溶於少量蒸餾水中,然後加入碘,待碘全部溶解後,加水稀釋至300毫升。
丙液 95%酒精溶液
丁液(番紅花紅液)
2.5%番紅花紅酒精溶液 10毫升 蒸餾水 100毫升
2、細菌特殊染色劑
配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色後,用乙液復染。
甲液 取5克孔雀綠,加入少量蒸餾水,使它溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,即成孔雀綠染液。
乙液 取番紅花紅0.5克,加入少量蒸餾水,使它溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,集成番紅花紅復染液。
配方二 莢膜染液 此配方先用甲液染色,後用乙液復染。
甲液 取結晶紫0.1克,溶於少量蒸餾水後,加水稀釋到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一結晶紫染液。
乙液 取硫酸銅( )31.3克,溶於少量蒸餾水後,加水稀釋到100毫升,即成20%硫酸銅脫色劑。
配方三 鞭毛染液
甲液
飽和明礬溶液 2毫升 5%石炭酸溶液 5毫升
20%丹寧酸溶液 2毫升
乙液
鹼性品紅11克 95%酒精 100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,過濾即可。
3、植物細胞壁染色劑
配方一 纖維素細胞壁染液(Ⅰ)
取固綠0.1克,溶於100毫升95%酒精中,即成0.1%固綠—酒精溶液。
該液能染色纖維素細胞壁,還用於動植物中作漿質染色劑。
配方二 纖維素細胞壁染液(Ⅱ)
氯化鋅20克 碘化鉀6.5克
碘1.5克 蒸餾水加至100毫升
先把氯化鋅溶於少量蒸餾水中,再加入6.5克碘化鉀,在碘完全溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,即成碘—氯化鋅溶液。
該染液能把細胞壁染成紫色,胞質染成淡黃色,胞核染成棕色。
配方一 纖維素細胞壁染液(Ⅲ)
甲液 取1克碘和1.5克碘化鉀,溶於100毫升蒸餾水中,即成1%碘液。
乙液 取7份硫酸和3份蒸餾水相混,即成66.5%硫酸溶液。
染色時,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纖維素細胞壁就染成黃色。
配方四 木質化細胞壁染液(Ⅰ)
硫酸化苯胺(或鹽酸話本安) 1份
蒸餾水 70份 95%酒精 30份
硫酸 30份
將上述各組分相混,將細胞材料放入混合液里染色,可是木質化細胞壁呈鮮黃或姜黃色。
配方五 木質化細胞壁染液(Ⅱ)
取間苯三酚4~5克,溶於100毫升95%酒精中,即成間苯三酚—酒精液。
先在材料上滴上1滴濃鹽酸,然後滴上間苯三酚—酒精液1滴,木質化的細胞壁就染上櫻紅或紫紅色。
配方六 木質化細胞壁染液(Ⅲ)
取1克番紅,溶於99毫升蒸餾水中,即成1%番紅溶液。
4、細胞質染色劑
配方一 伊紅染液
伊紅染液一般配用水溶液和酒精溶液兩種。
(1)取1克伊紅,溶於99毫升蒸餾水中,即成1%伊紅水溶液(市售紅墨水內含伊紅成分,可以用紅墨水稀釋液來代替本溶液)。
(2)取1克伊紅,溶於99毫升70%酒精中,即成1%伊紅—酒精溶液。
配方二 甲基藍染液
取1克甲基藍,溶於29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸餾水,即成1%甲基藍染液。
配方三 亮綠染液
取0.5克亮綠,溶解在100毫升蒸餾水中,即成0.5%亮綠溶液。
5、細胞核染色劑
配方一 甲基綠染液
取1克甲基綠,溶於99毫升蒸餾水中,加入1毫升冰醋酸。本染液能染細胞核,還用來染木質化細胞壁。
配方二 龍膽紫染液
取1克龍膽紫,溶於少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。
配方三 美藍(亞甲基藍)染液
取0.5克美藍,溶於30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氫氧化鉀溶液,保存在棕色瓶內 。
此溶液能染細胞核,還用來染細菌、血和神經組織等。
配方四 硼砂—洋紅染液
取4克硼砂,溶於96毫升蒸餾水中。再加入2克洋紅,加熱溶解後煮沸30分鍾,靜置3日,用100毫升70%酒精沖淡,放置24小時後過濾。
此染液能染細胞核,還用來染糊粉粒和一般動物、植物的整體染色,如水螅、血吸蟲等整體標本。
配方五 德氏(Delafield』s)蘇木精染液
甲液 取1蘇木精,溶於6毫升無水酒精中,即成蘇木精—酒精溶液。
乙液 取10克銨礬溶於90毫升蒸餾水中,即成10%銨礬水溶液。
取甲液逐滴加入到乙液中,用紙遮蓋,放在陽光明亮處,使它充分氧化。3~4天後將溶液過濾,在濾液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密閉玻璃瓶內。靜置1~2個月,待該液顏色變深時過濾,可長久保存。
本染液是染色體的優良染色劑,除能染細胞核外,還用來染纖維素、細胞壁和動植物組織。
配方六 席夫(Schiff』s)試劑
稱取0.5克鹼性品紅,加到100毫升煮沸的蒸餾水中,再微微加熱5分鍾,不斷攪拌,使它溶解。在溶液冷卻到50攝氏度時過濾,濾液中加入10毫升1N鹽酸。再冷卻到25攝氏度時加入0.5克偏重亞硫酸鈉()或無水亞硫酸氫鈉( )。把溶液裝入棕色試劑瓶內,搖盪後,塞緊瓶塞,放在黑暗中24小時。在溶液顏色退到淡黃色時,加入0.5克活性炭,用力搖盪1分鍾,過濾後把濾液貯在棕色試劑瓶內,塞緊瓶塞,濾液應該是無色的。在使用時勿讓溶液長時間暴露在空氣中和見光(瓶外用黑紙或暗盒遮光)。如溶液變成紅色,即失去染色能力。
鹼性品紅是較強的核染色劑,在孚爾根氏(Feulgen』s)反應中作為組織化學試劑,以檢查DNA。
6、染色體染色劑
配方一 醋酸—洋紅染液
取45毫升冰醋酸,加蒸餾水55毫升,煮沸後徐徐加入洋紅1克,攪拌均勻後加入1顆鐵銹釘,煮沸10分鍾,冷卻後過濾,貯存在棕色瓶內。
配方二 醋酸—地衣紅染液
取45毫升醋酸,跟55毫升蒸餾水相混,加熱,徐徐加入地衣紅粉末1~2克,攪拌溶解後,緩緩煮沸2小時。冷卻後過濾,貯存在棕色瓶里。
配方三 龍膽紫染液
取1克龍膽紫,用少量蒸餾水溶解後,加蒸餾水,稀釋到100毫升,保存在棕色瓶內。
配方四 甲苯胺藍染液
取0.5克甲苯胺藍,溶解在100毫升蒸餾水中,即成0.5%甲苯胺藍水溶液。

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