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egta能溶解在蒸餾水中嗎

發布時間:2022-09-19 05:36:01

A. 溶液配製:蒸餾水含250mmol.L-1蔗糖,1mol.L-1 EDTA,1mmol.L-1 EGTA,10 mmol.L-1 HEPES和1%BSA

加濃NaOH後就可以溶解了,因為EDTA是乙二胺四乙酸,要用強鹼來調pH,要是提前就加NaOH,很快就會溶解,效果很好

B. 請問配完的EGTA溶液是常溫放置還是放到4℃里呢EGTA葯品是常溫放置的。

下午好,EGTA如果你是溶解在無水甲醇或者乙醇等極性質子溶劑中幾乎不受影響,但是鹼性水溶液就不行了,本來這貨就只能微溶於水加鹼助溶,你放置到4度低溫環境里就飽和了很容易析出結晶的。EGTA不如EDTA好用,你要是專門鑒定鎂離子和鈣離子就沒辦法,請酌情參考。

C. 金屬硅的化驗EGTA(退色劑)製作方法。

EGTA(乙二醇二乙醚二胺四乙酸)標准滴定溶液(濃度=0.01mol/L )
配製
稱取3.80g乙二醇二乙醚二胺四乙酸(分子量=380),置於500mL燒杯中,加約250mL水,低溫加熱,在不斷攪拌下,滴加氫氧化鉀溶液(200g/L)至試劑溶解(控制PH值7.3~~7.5,不溶的用超聲溶解),冷卻至室溫。移入1000mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻。

D. EGTA能溶解在蒸餾水中嗎溶解度是多大

像這種多碳的有機酸都應該變成鹽類再溶解吧,參見詞條http://ke..com/view/1633343.htm,溶於氫氧化鈉溶液。

E. 用什麼溶解EDTA 與EGTA

去離子

F. EGTA溶於水嗎

egta和edta一樣微溶冷水,在熱水中溶解度比冷水大一些吧。除了偶爾滴定絡合鎂其他各方面性能均不如edta或者hedp。如果是egda(乙二醇二醋酸酯)溶解度大得多接近10g/100ml。

G. 瓊脂糖甲醛變性凝膠電泳

5月25日 09:54 瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖是從瓊脂中提純出來的,主要是由D-半乳糖和3,6脫水L-半乳糖連接而成的一種線性多糖。瓊脂糖凝膠的製作是將乾的瓊脂糖懸浮於緩沖液中,通常使用的濃度是1%-3%,加熱煮沸至溶液變為澄清,注入模板後室溫下冷卻凝聚即成瓊脂糖凝膠。瓊脂糖之間以分子內和分子間氫鍵形成較為穩定的交聯結構,這種交聯的結構使瓊脂糖凝膠有較好的抗對流性質。瓊脂糖凝膠的孔徑可以通過瓊脂糖的最初濃度來控制,低濃度的瓊脂糖形成較大的孔徑,而高濃度的瓊脂糖形成較小的孔徑。盡管瓊脂糖本身沒有電荷,但一些糖基可能會被羧基、甲氧基特別是硫酸根不同程度的取代,使得瓊脂糖凝膠表面帶有一定的電荷,引起電泳過程中發生電滲以及樣品和凝膠間的靜電相互作用,影響分離效果。市售的瓊脂糖有不同的提純等級,主要以硫酸根的含量為指標,硫酸根的含量越少,提純等級越高。
瓊脂糖凝膠可以用於蛋白質和核酸的電泳支持介質,尤其適合於核酸的提純、分析。如濃度為1%的瓊脂糖凝膠的孔徑對於蛋白質來說是比較大的,對蛋白質的阻礙作用較小,這時蛋白質分子大小對電泳遷移率的影響相對較小,所以適用於一些忽略蛋白質大小而只根據蛋白質天然電荷來進行分離的電泳技術,如免疫電泳、平板等電聚焦電泳等。瓊脂糖也適合於DNA、RNA分子的分離、分析,由於DNA、RNA分子通常較大,所以在分離過程中會存在一定的摩擦阻礙作用,這時分子的大小會對電泳遷移率產生明顯影響。例如對於雙鏈DNA,電泳遷移率的大小主要與DNA分子大小有關,而與鹼基排列及組成無關。另外,一些低熔點的瓊脂糖(62 ~ 65 °C)可以在65 °C時熔化,因此其中的樣品如DNA可以重新溶解到溶液中而回收。
由於瓊脂糖凝膠的彈性較差,難以從小管中取出,所以一般瓊脂糖凝膠不適合於管狀電泳,管狀電泳通常採用聚丙烯醯胺凝膠。瓊脂糖凝膠通常是形成水平式板狀凝膠,用於等電聚焦、免疫電泳等蛋白質電泳,以及DNA、RNA的分析。垂直式電泳應用得相對較少。
簡單介紹一個關於瓊脂糖凝膠電泳的實驗
CK同工酶的測定
標本採集、處理和貯存
CK同工酶檢測血清和血漿均可。在4℃可保存數天,-15℃可保存2周,若用血漿宜用EGTA,而不用EDTA抗凝。冷凍血漿測定時,應在30℃以下融化,需反復冰融者應加還原劑——巰基乙醇以穩定酶活性,速凍及貯存於-20℃或-70℃,在有β-巰基乙醇和EGTA存在時,MM和MB可穩定數年,而BB則僅穩定半年。由於CK同工酶半衰期短,故酶活性的高低受標本採集時間的影響較大。
瓊脂糖凝膠電泳法
1.原理
CK分子是由M和B兩種亞單位組成的二聚體,在電泳條件下,CK-BB遷移最快,CK-MB居中,CK-MM最慢。電泳後進行酶促反應顯色,觀察結果。顯色原理是:CK催化磷酸肌酸(CrP)及ADP,產生肌酸(Cr)及ATP,在偶聯的HK催化下葡萄糖被ATP磷酸化,形成G-6-P;在偶聯的G-6-PD催化下G-6-P被NADP+氧化,形成6-P-G,同時NADP+還原為NADPH。在365nm觀察NADPH的熒光或用熒光光密度計掃描定量。也可用四氮唑鹽顯色法,即利用酚嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)將NADPH的氫傳遞給氯化碘代硝基四唑(INT),使其還原成紫紅色的甲鐟,顯示CK同工酶區帶。
2.試劑
① 50mmol/L Tris-巴比妥緩沖液(pH8.0):稱取巴比妥6.716g,Tris 1.905g,溶於蒸餾水中並稀釋到1L,電泳用。
② 30mmol/L Tris-巴比妥緩沖液(pH8.6):稱取巴比妥1.21g,Tris 1.15g,以蒸餾水溶解並稀釋到500mL。
③ 5g/L瓊脂糖[內含14g/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)]:稱取0.5g瓊脂糖,1.4gPVP,加試劑「②」100mL隔水煮沸溶解,分裝後4℃保存。
④ 400mmol/L Bis-Tris緩沖液(內含20mmol/L醋酸鎂、4mmol/L EDTA),pH7.0:稱取Bis-Tris 8.36g,EDTA Na2•2H2O 0.149g,加蒸餾水95ml溶解,用lmol/L醋酸調至pH7.0後,稱取醋酸鎂(含4分子水)0.429g,加入,用蒸餾水稀釋到100mL。4'C保存可用2個月,-20℃保存可用6個月。
⑤ 輔酶溶液(ADP 4mmol/L,AMP10mmol/L,NADP+4mmol/L,葡萄糖40mmol/L):稱取ADP 17.1mg,AMP36.5mg,NADP+29.7mg,葡萄糖72.1mg,加試劑「④」9mL平衡至25℃後,用lmol/L醋酸調pH至6.4(約用lml),在4℃保存可用半個月。
⑥ 底物顯色液甲(按兩張載玻片計):用前於甲管中加試劑「⑤」1.5mL,己糖激酶10.5 U,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶6 U。混合後置37℃水浴5min,加入PMS 0.02mg(2g/LPMS 0.01m1)。PMS須避光。在加PMS前的5min內配好底物顯色液乙,加PMS後,立即與乙液混合並覆蓋於電泳凝膠板上。
⑦ 底物顯色液乙:先配製下列試劑;
A. 450mmol幾磷酸肌酸:存4℃可用3個月。
B. 5g/L氯化碘代硝基四唑:置棕色瓶貯存,4℃可用3個月。
C. 12.5g/L瓊脂糖(含62.5mmol/L氯化鈉及35g/L聚乙烯吡咯烷酮):稱取1.25g瓊脂糖,加入100mL蒸餾水,隔水煮沸溶解後,再加入氯化鈉262.5mg及聚乙烯毗咯烷酮3.5g,溶解後分裝,置4℃保存。
用前於乙管中加入「A」液0.2mL,「B」0.2mL,置37℃水浴2min後,加入N-乙醯半胱氨酸(NAC)20mg,或還原型谷胱甘肽10mg。用預溫至37℃的滴管吸人,隔水煮沸融化後,溫度降至37~43℃(在37~43℃的水浴箱中平衡)的「C」液1.2mL,滴管吹吸混合,使NAC溶解。
⑧ 混合底物顯色液:當乙液配成後,立即吸甲液入乙液中,混合後立即使用。在水浴箱中操作,防止瓊脂糖凝固。必要時用0.2mL蒸餾水代磷酸肌酸溶液制備對照顯色液。如作熒光法,用不含PMS及INT的甲、乙液,用蒸餾水代INT溶液。
3.操作
(1)隔水煮沸溶解試劑「③」,取1.5mL鋪於1~1.2mm厚的載玻片上。於近陰極端並行挖兩個槽,作兩份標本,或作標本與控制物。
(2)加樣5μL,80V電泳50min。
(3)合理安排配製混合底物顯色液的時間,使配製完成時電泳結束。
(4)將電泳凝膠板置塗以黑漆的鋁盒中,吸底物顯色液1.5mL鋪於凝膠板上,加蓋,待凝後置37 ℃水浴1小時。
(5)置固定液(乙醇:醋酸:水=150:10:40)中2~4小時,轉入蒸餾水中數小時,取出觀察結果或用光密度計在500nm波長下掃描定量。需要時可平推至空白卡片紙上,37℃孵箱過夜,乾片保存。或用無PMS、INT底物顯色液,37℃水箱孵育20min。
(6)再置60℃乾燥箱中20min,在紫外燈(365nm)下觀察熒光。有條件者用熒光光密度計掃描定量,激發波長360nm,發射波長460nm。
4.結果觀察
瓊脂糖凝膠電泳法的結果觀察如圖9-14所示。
5.注意事項
廣泛存在於各種組織的腺苷酸激酶(AK)催化ADP產生ATP,干擾同工酶結果的判斷。加入AMP可抑制此反應,但過量AMP也抑制CK。NaF抑制AK,不抑制CK,與AMP合用可抑制各種AK同工酶的97%。NaF與CK激活劑Mg2+可逐漸形成MgF2沉澱,所以,NaF與Mg2+分開配製,臨時混合,不影響各自的作用。電泳需較高pH,酶反應需較低pH,本法中用低離子強度,pH低於8.6的電泳緩沖液;高離子強度,pH低於6.7的基質緩沖液。當含瓊脂糖的基質顯色劑覆蓋於電泳後的凝膠板,上下凝膠中的成分相互擴散後的pH,恰為酶作用的最適pH。Bis-Tris全名為Bis(2-羥乙基)亞氨基-Tris(羥甲基)甲烷,25℃時pKa=6.46,是CK同工酶。測定優選的緩沖劑,200mmol/L時,CK活力最大。如無Bis-Tris;亦可用咪唑加EDTA作基質緩沖液。EDTA作Ca2+的絡合劑,因Ca2+抑制CK活力。血清CK活力隨溫度升高而增加,直至45℃;更高溫度迅速下降,56℃時很快失活。瓊脂糖電泳法測CK同工酶,絕不能象作LDH同工酶用溫度較高的瓊脂糖基質顯色液,否則CK活力喪失。而非脫氫酶反應(Nothingdehydogenase,NDH)顯著。NDH是相當於白蛋白及β球蛋白區帶處的紫紅色區帶,與蛋白質的巰基有關,標本用量大,pH高時尤其明顯,僅四唑鹽及PMS就可與標本產生,用測NADPH熒光法可避免。本法中標本用量少,顯色時pH較低,NDH反應不明顯。CK是巰基酶,絕對需要巰基試劑活化。但巰基試劑可還原四唑鹽,N-乙醯半胱氨酸及谷胱甘肽還原四唑鹽能力弱,可使背景清晰。PVP是隋性聚合體,作為酶擴散的障礙物加入,可改善區帶分離效果。CK不穩定,對光、熱及高pH敏感,最好將及時分出的血清充C02後塞緊管口,置冰室或-30℃保存,至少可穩定半個月,及時測定更好。不主張加巰基活化劑保存。影響CK同工酶電泳與顯色的因素很多,必須同時作控制物。

附件:新建 Microsoft Word 文檔.doc
該回答在5月25日 09:58由回答者修改過

參考文獻:儀器信息網,http://www.xbmu.e.cn/k

H. egta 溶解後為什麼ph還是4.5

在蒸餾水中幾乎不溶。EGTA的溶解度隨著pH值的增大而增加。
既可以用1M的氫氧化鈉溶解的,之後再用Buffer稀釋
,有可能會有部溶物產生,之後再超聲2分鍾即可。

I. EGTA能溶解在蒸餾水中嗎溶解度是多大

我今天也用到了EGTA,在蒸餾水中幾乎不溶。EGTA的溶解度隨著pH值的增大而增加。既可以用1M的氫氧化鈉溶解的,之後再用Buffer稀釋,有可能會有部溶物產生,之後再超聲2分鍾即可。

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