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离子交换色谱法出峰的先后顺序

发布时间:2023-11-22 17:38:16

『壹』 离子交换层析中流出物质顺序是什么

若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。

由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

(1)离子交换色谱法出峰的先后顺序扩展阅读:

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。

溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。

梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

『贰』 离子色谱七种阴离子曲线为什么只出六个峰

可能有一种离子峰值面积太小,默认未检出。

一般情况下出峰顺序是:氟、氯、亚硝酸、溴、硝酸、磷酸、硫酸。但出峰顺序规律并非绝对,有的柱子会有些变化,出峰时间与淋洗液浓度、柱子温度、柱子特性等都有关系。

一般的规律为:离子的价数越高,保留时间越长;离子半径越大,保留时间越长;离子极化度越大,保留时间越长。

离子

是指原子或原子基团失去或得到一个或几个电子而形成的带电荷的粒子。这一过程称为电离。电离过程所需或放出的能量称为电离能。

在化学反应中,金属元素原子失去最外层电子,非金属原子得到电子,从而使参加反应的原子或原子团带上电荷。带电荷的原子叫作离子,带正电荷的原子叫作阳离子,带负电荷的原子叫作阴离子。阴、阳离子由于静电作用而形成不带电性的化合物。

与分子、原子一样,离子也是构成物质的基本粒子。如氯化钠就是由氯离子和钠离子构成的。

以上参考资料来源:网络-离子

『叁』 各类色谱洗脱规律,简明扼要

HPLC高效液相色谱按 固定相与流动相的极性相对大小分为正相和反相色谱
正相版中流动相极性小于固定相权,极性组分被滞留,出峰顺序:非极性->弱极性->极性
反相色谱流动相极性大于固定相,固定相常用C8-C18,非极性组分最后流出,出峰顺序:极性->弱极性->非极性,反相色谱因其与组分无强烈作用,组分不会长时间滞留污染柱子,且反相色谱用水做底溶剂,掺入其他弱极性、非极性溶剂如乙腈等有机物改变流动相极性达到分离目的,水的紫外吸收遏制波长低,不会干扰检测,且水易得便宜
还有要注意的点:大量物质中分离杂质应先让含量小的杂质先流出,如果让量大的组分先流出会拖尾导致杂质分离不纯
GC气相色谱没什么说的,原理类似,主要就是保留时间、峰高峰宽、校正因子
毛细管电泳,一般毛细管壁修饰成带负电,电渗流速率大于电泳速率,正负离子、中性分子均向阴极移动,检出顺序:正离子->中性分子->负离子

『肆』 关于离子交换色谱法

我感觉应该选C
首先B中阳离子为+2价离子,最容易被吸附,通过试管速度最慢。
然后A和C作比较,其中A的离子半径比较大,而且配合物更易被吸附,所以A更容易被吸附。
通过比较得到C的吸附能力最弱。

『伍』 离子色谱中各种常见阴离子的色谱出峰时间是多少

不同的色谱条件,出峰时间也不一样,建议你去“色谱世界”网站看看,有很多离子色谱图,都有保留时间及条件,你可以借鉴。

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