Ⅰ 求助：第一次使用超滤离心管应该怎么处理
可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。版权
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。
Ⅱ 超滤离心管怎么使用
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。
Ⅲ 超滤管能虑含有DMSO的水溶液吗
现在的膜过滤技术包括“气膜”和“液膜”，不管是气膜还是液膜，他们都不是单一的进行“分子过滤或颗粒过滤”，同时还有“选择过滤”，选择过滤是利用超滤管的选择特性来分离两种物质，而不像分子过滤一样只区分大小，选择过滤区分的是不同特性的物质。所以说，超滤是可以过滤等尺寸不同物质分子的。
Ⅳ 请问DMSO作溶剂效果怎么样，毒性很大吗想用它替代甲醇来配溶液
你好！DMSO学名是二甲基亚砜，是一种含硫有机化合物，分子式为C2H6OS，常温下为无色无臭的透明液体，是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物，被誉为“万能溶剂”。在酸存在时加热会产生少量甲基硫醇、甲 醛、二甲基硫、甲磺酸等化合物。在高温下有分解现象，遇氯能发生剧烈反应,在空气中燃烧发出淡蓝色火焰。可作有机溶剂、反应介质和有机合成中间体。也可用作合成纤维的染 色溶剂、去染剂、染色载体,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收剂。 综上所述，DMSO是一种不错的溶剂，如果你原来配溶液是用甲醇做溶剂，建议还用甲醇好，因为甲醇相对DMSO来说不仅毒性小，且纯度高，而且DMSO做溶剂，容易产生干扰（S）。供参考吧！
Ⅳ 离心管和离心超滤管
离心管就来是一个简单的可自以承受高转速压力的管子，比如离一些样品，分离出上清沉淀。
离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了，分子量比它大的就截留在上面（即内管中），就是超滤的原理。。。。常用于浓缩样品。
Ⅵ 做HPLC或者紫外用DMSO做溶剂可以吗
做紫外的时候没有问题，拿dmso做参比就是了。
做hplc的时候有点问题就是，dmso与流动相的相溶性问题，相容性不好，出的峰肯定很丑。还有就是你的分析物如果只能溶在dmso里，遇到流动相会有析出的话，我劝你还是不
...
呵呵，本来想查一下甲醇跟dmso是不是互溶，突然一想直接把两个加起来实验一下就好了嘛，结果显示：两者互溶良好。因为hplc流动相有甲醇跟水的组合，而dmso跟水也任意混的，所以二者相溶性很好。谢谢啦~~cooldogcl(站内联系ta)dmso要是量大会影响,会影响目标峰的观察.阿拉9983(站内联系ta)originally
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2010-09-06
09:07:28:
dmso要是量大会影响,会影响目标峰的观察.
你好！能讲详细一些吗？如果我的样品直接就是用dmso溶解的，做液相进一针也就是几微升啊，不知道“量大”是怎么讲啊？cooldogcl(站内联系ta)我说的量大是dmso的浓度或者说是dmso在溶剂中的比例,要是直接溶解的话就是很大了.dmso的液相峰很大,会掩盖其他的峰.你那个不能用dmso溶解后加入其他溶剂来稀释dmso吗阿拉9983(站内联系ta)originally
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2010-09-07
09:23:57:
我说的量大是dmso的浓度或者说是dmso在溶剂中的比例,要是直接溶解的话就是很大了.dmso的液相峰很大,会掩盖其他的峰.你那个不能用dmso溶解后加入其他溶剂来稀释dmso吗
哦，可以用其他溶剂来稀释的，甲醇就可以，但是要稀释到多大比例呢，用甲醇跟dmso1:1稀释可以吗？
Ⅶ 【求助】做HPLC或者紫外用DMSO做溶剂可以吗
做紫外的时候没有问题，拿DMSO做参比就是了。
做HPLC的时候有点问题就是，DMSO与流动相的相溶性问题，相容性不好，出的峰肯定很丑。还有就是你的分析物如果只能溶在DMSO里，遇到流动相会有析出的话，我劝你还是不 ... 呵呵，本来想查一下甲醇跟DMSO是不是互溶，突然一想直接把两个加起来实验一下就好了嘛，结果显示：两者互溶良好。因为HPLC流动相有甲醇跟水的组合，而DMSO跟水也任意混的，所以二者相溶性很好。谢谢啦~~cooldogcl(站内联系TA)DMSO要是量大会影响,会影响目标峰的观察.阿拉9983(站内联系TA)Originally posted by cooldogcl at 2010-09-06 09:07:28:
DMSO要是量大会影响,会影响目标峰的观察. 你好！能讲详细一些吗？如果我的样品直接就是用DMSO溶解的，做液相进一针也就是几微升啊，不知道“量大”是怎么讲啊？cooldogcl(站内联系TA)我说的量大是DMSO的浓度或者说是DMSO在溶剂中的比例,要是直接溶解的话就是很大了.DMSO的液相峰很大,会掩盖其他的峰.你那个不能用DMSO溶解后加入其他溶剂来稀释DMSO吗阿拉9983(站内联系TA)Originally posted by cooldogcl at 2010-09-07 09:23:57:
我说的量大是DMSO的浓度或者说是DMSO在溶剂中的比例,要是直接溶解的话就是很大了.DMSO的液相峰很大,会掩盖其他的峰.你那个不能用DMSO溶解后加入其他溶剂来稀释DMSO吗 哦，可以用其他溶剂来稀释的，甲醇就可以，但是要稀释到多大比例呢，用甲醇跟DMSO1:1稀释可以吗？
Ⅷ 请问DMSO和ep管会发生什么化学反应么
不会。ep管 离心管 等试验用耗材都是多聚物的 很稳定。我们做核磁氢谱碳谱时用DMSO在EP管里溶解样品，在转移到核磁管中去测试，没有任何干扰信号。这都是纯DMSO呢，你溶解药品再稀释，就更不会有事了。做细胞培养也都是用DMSO，也接触到了同样材质的一次性耗材，也对细胞没有影响。况且，药理实验中允许DMSO溶解再用溶媒稀释药品，对实验结果没有影响的，放心吧。
Ⅸ 超滤离心管能耐受甲醇等有机溶剂吗
超滤机的超滤膜，很多都是用酒精（乙醇）试剂来杀菌的
Ⅹ 超滤离心管用材要求
摘要 （1）选择合适的超滤离心管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的产品。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。