真蛋白的测定中过滤使用定性滤纸

① 求助：豆粕中真蛋白的测定

1、原理 硫酸铜在碱性溶液中，可将蛋白质沉淀，且不溶于热水过滤和洗涤后，可将纯蛋白质和非蛋白质含蛋物分离，再用凯氏定蛋法测定沉淀中的蛋白质含量。 2、仪器设备 （1）烧杯：200ml。 （2）定性滤纸。 （3）其他设备与粗蛋白质测定法的相同。 3、试剂及配制 （1）100g/L硫酸铜溶液：分析纯硫酸铜（CuSO4•5H2O）10g溶于100mL蒸馏水中。 （2）25g/L氢氧化钠溶液：将2.5g分析纯氢氧化钠溶于100mL蒸馏水中。 （3）10g/L氯化钡溶液：1g氯化钡（BaCl•H2O）溶于100mL蒸馏水中。 （4）2moL/盐酸溶液。 （5）其他试剂预一般粗蛋白测定法的相同。 4、测定步骤 准确称取试样1g左右（精确到0.0001g），置于200mL烧杯中，加50mL蒸馏水，加热至沸，加入20mL硫酸铜溶液，20mL氢氧化钠溶液（加入以上两种溶液多要缓慢，且要边加入边搅拌），用玻璃棒充分搅拌，放置1h以上，用倾斜过滤（用定型滤纸），然活后用60~80℃热蒸馏水洗涤沉淀5~6次，用氯化钡溶液5滴和盐酸溶液1滴检查滤液，直至不生成白色沉淀为止。将沉淀和滤纸放在65℃烘箱干燥2h，然后全部转移到凯氏烧瓶中，消化后进行定蛋测定。 5、结果计算 同粗蛋白测定。

② 饲料中真蛋白的检测方法，尽可能详细说明步骤

饲料中纯蛋白质的测定 一、测定原理 硫酸铜在碱性溶液中，可将蛋白质沉淀，且不溶于热水，过滤和洗涤后，可将纯蛋白质和非蛋白质含氮物分离，再用凯氏定氮法测定沉淀中的蛋白质含量。 二、仪器设备 （1）烧杯：200mL。 （2）定性滤纸。 （3）其它设备与粗蛋白质测定性相同。 三、试剂及配制 （1） 100g/L硫酸铜溶液：分析纯硫酸铜（CuSO4 5H2O）10g溶于100mL水中。 （2） 25g/L氢氧化钠溶液：将2.5g分析纯氢氧化钠溶于100mL水中。 （3） 10g/L氯化钡溶液：1g氯化钡（BaCl2 H2O）溶于100mL水中。 （4） 2mol/L盐酸溶液。 （5） 其它试剂与一般粗蛋白质测定法相同。 四、测定步骤 准确称取试样1g左右（精确至0.0001g），置于200mL烧杯中，加50mL水，加热至沸，加入20mL硫酸铜溶液，20mL氢氧化钠溶液，用玻璃棒充分搅拌，放置1小时以上，用倾斜过滤（用定性滤纸），然后用60-80℃热水洗涤沉淀5-6次，用氯化钡溶液5滴和盐酸溶液1滴检查滤液，直到不生成白色硫酸钡沉淀为止。将沉淀和滤纸放在65℃烘箱干燥2小时，然后全部转移到凯氏烧瓶中，消化后进行氮测定。 五、结果计算 同粗蛋白质测定。

③ 定性滤纸使用注意事项有哪些

一般情况下,定性滤纸使用都不会在高温下进行过滤的,这个温度有一个限度只要不超过就行了,别外不要过滤热的浓硫酸或硝酸溶液热的酸性可以破坏定性滤纸的过滤效果。

一般采用自然过滤，利用滤纸体和截留固体微粒的能力，使液体和固体分离。

定性滤纸在过滤机器中的使用,滤纸的机械强度和韧性都较尽量少用抽滤的办法过滤，如必须加快过滤速度，为防止穿滤而导致过滤失败，在气泵过滤时，可根据抽力大小在漏斗中叠放2～3层滤纸，在用真空抽滤时，在漏．先垫一层致密滤布，上面再放滤纸过滤。

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④ 定性滤纸与定量滤纸在过滤时有什么区别

过滤过程中没有区别。区别在于定量滤纸有稳定的灰分值，可以用于分析中的炽灼残渣指标或者沉淀分析。定性滤纸不行。

⑤ 真蛋白是怎么定义的怎么测定

真蛋白是生物学上的概念，是相对与粗蛋白而言的1、粗蛋白质是含氮物质的总称。2、真蛋白指纯蛋白质。3、粗蛋白质包括真蛋白质和含氮物(氨化物)。4、测定方法：粗蛋白质的测定以测总含氮量为定。 真蛋白质的测定以测总蛋白质含量为定。

⑥ 国家标准检测蛋白质含量测定方法

蛋白质含量测定方法就是检测元素的含量，像三聚氰胺的问题，就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。

国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法，食物中的蛋白质在催化加热条件下分解，导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫，硼酸吸收，用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸耗计算氮含量，再乘以转化系数，即蛋白质含量。

具体操作步骤如下：

1.样品处理

精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸收10-20ml液体样品（约30-40mg氮当量）。将其转移至干燥的100毫升或500毫升氮气固定瓶中，加入0.2克硫酸铜，6克硫酸钾和20毫升硫酸，轻轻摇动，在瓶口放置一个小漏斗，将瓶子倾斜石棉网上有45度角，有小孔。

加热小火后，内容物碳化，泡沫完全停止，加强火力，保持瓶内液体稍微沸腾，直至液体呈蓝绿色澄清透明，然后继续加热0.5小时。取出并冷却，小心加入20毫升水，冷却，移入100毫升容量瓶中，用少量水洗净氮气瓶，洗净液放入容量瓶中，然后用水冲洗至刻度，混匀备用。

取相同量的硫酸铜，硫酸钾和浓硫酸作为试剂进行空白试验。然而，这种方法很危险，很难在实验室中证明。大多数实验室都有一个消化器，可以一次处理16个以上的样品和一个可以自行设定温度的呼吸机。它更安全，更可操作。

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除了凯氏定氮法以外，标准的测量方法还有：

• 分光光度法

食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，在pH4.8的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。在波长400nm 下测定吸光度值，与标准系列比较定量,结果乘以换算系数，即为蛋白质含量。

• 燃烧法

样品在900~1200℃下燃烧。在燃烧过程中，产生混合气体。 诸如碳，硫和盐的干扰气体被吸收管吸收，氮氧化物被还原成氮。 形成的氮气流由热导检测器（TCD）检测。

⑦ 饲料中真蛋白的检测方法

凯氏定氮法 网上没找到，就自己打了一份
饲料中纯蛋白质（真蛋白）的测定
一、测定原理
饲料蛋白质经沸水提取并在碱性溶液中被硫酸铜沉淀。过滤和洗涤后，可将纯蛋白质和非蛋白质含氮物分离，再用凯氏定氮法测定沉淀物中的蛋白质含量。

二、仪器设备
（1）烧杯：200ml
（2）定型滤纸
（3）其他设备与粗蛋白质测定法相同

三、试剂与配制
（1）100g.L-1硫酸铜溶液；分析纯硫酸铜（5水硫酸铜）10g溶于100ml水中
（2）25g.L-1氢氧化钠溶液：将2.5g分析纯氢氧化钠溶于100ml水中
（3）10g.L-1氯化钡溶液：1g氯化钡溶于100ml水中
（4）2mol.L盐酸溶液
（5）其他试剂与粗蛋白质测定法相同

四、测定步骤
准确称取试样1g左右（精确至0.0001g）置于200ml烧杯中，加50ml水中，加热至沸。
加入20ml硫酸铜溶液，20ml氢氧化钠溶液，用玻璃棒充分搅拌，放置1h以上。用定性滤纸过滤，然后用60~80摄氏度热水洗涤沉淀5或6次，用氯化钡溶液5滴和盐酸溶液1滴检查滤纸，直至不生成白色硫酸钡沉淀为止。将沉淀和滤纸放在65摄氏度烘箱干燥2h，然后全部转移到凯氏烧瓶中，按半微量凯氏定氮法进行氮的测定。

⑧ 用凯氏定氮法能检测出真蛋白质吗如果能其测定方法具体步骤

凯氏定氮法测的是样品中的有机氮含量，而除了蛋白质中的氮是有机氮外，还有很多有机物中的氮也是以氨基（-NH3）、亚氨基（-NH-）等有机氮形式存在的，因此只有在已知被测物由蛋白质组成的情况下，才能使用凯氏定氮法来定量蛋白质含氮量。具体测定方法网上很多，在这里不赘述。

⑨ 为什么“在叶绿体中提取和分离色素时，要用定性滤纸过滤研磨液。”这句话不对

因为是用单层尼龙布来过滤研磨液的。用滤纸会把色素吸收掉。

⑩ 怎样快速检测鱼粉真蛋白

检测真蛋白
粗蛋白质只反映鱼粉中所有含氮物质的含量，而不能反映其中真蛋白（即纯蛋白）的含量。所以通过测定真蛋白的含量，利用真蛋白与粗蛋白含量之比（即真蛋白的比率），可以判断鱼粉中是否掺入水溶性非蛋白含氮物质。

在鱼粉粗蛋白含量符合产品规定时，鱼粉真蛋白的比率应不小于80%，当测得鱼粉真蛋白比率小于80%，该鱼粉中掺有水溶性非蛋白物质。

鱼粉真蛋白的测定方法：称取0.5克左右的样品（精确至0.0002克）于250ml烧杯中，加入50
m蒸馏水煮沸，加入10%的硫酸铜溶液20ml，边加边搅拌，再加入2.5%的NaOH溶液20ml，静置1小时或静置过液，沉淀物以中速定性滤纸过滤，用70℃以上的热蒸馏水反复洗残渣，直至滤液无SO2-4（取5%氯化钡试液5滴滴于表面皿，加2mol/L盐酸1滴，滴入滤液，在黑色背景下观察，无白色沉淀）。将滤纸与残渣包好，在65-75℃下，烘干，将烘干的试样连同滤纸一起放入烧瓶中消化