为什么hplc不能用纯水洗

Ⅰ c8色谱柱用水冲了怎么办

不能。一般洞渣不能。HPLC多用C8,C18色谱柱，而这些柱子要求最少也要有5%的有机相，用纯水相容易破坏固定性，从而使柱效下降。

日常使用当中多数情况下是念颤薯反相色谱柱，c18，c8，苯基柱等等！因为这些柱子键合相极性极小，所仔者以流动相的极性肯定比他。

Ⅱ 反相柱怎么过

反相柱的具体操作方法如下：

1、基本操作和硅胶柱相同，湿法装柱好些，匀浆液用甲醇。

2、流动相基本是水、有机相混合物，有机相可选择甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯，氯仿，正己烷等正相溶剂。一般C18填料怕碱，多数C18填料使用pH范围2-8。慎用三乙胺，氨水之类的改性剂。流动相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。

3、梯度洗脱从高水相开始，但有机相比例不低于5%，最好不要用纯水，有机相比例越高越容易洗脱。

4、洗脱结束用纯有机相，如纯甲醇冲洗。

5、使用后的填料不要干燥，保存在纯甲醇里，也方便下次装柱。

硅胶基质键合反相柱的清洗：

再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。

经过等度运行后的色谱柱，有时用90～100％含量的溶剂B（双溶剂反相系统中洗脱能力较强的溶剂，如甲醇、乙晴、四氢 呋喃等）冲洗20个柱体积可以清除污染物（色谱柱的柱体积和空柱管体积概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱体积只有2.5ml，2.1x150mm的是0.28ml）。

如果使用的是缓冲盐系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC流动体系中的缓冲盐沉淀，这样会导致更大的问题，如柱头筛板堵塞、连接管路堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲盐流动相（即把缓冲液换成水），冲洗5～10个柱体积以后才切换到用强溶剂清洗。

有时候，强溶剂B也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么就需要用更强的溶剂或者是系列溶剂组合。如果污染物不是生物质的，一种强溶剂或几种溶剂组合清洗基本能解决问题。柱子生产厂家的网页和产品说明书上很多也有清洗方法推荐。