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污水处理中微生物的计数方法

发布时间:2021-02-20 16:27:57

❶ 微生物涂抹怎么计数啊

如吸取来0.2ml倒平板,计数时乘5倍自,另乘以涂抹液稀释倍倍数(如1000倍),则细菌含量为5000cfu/ml.cfu表示菌落数.,一般稀释计数时平板中30-300个菌落的数量级为佳,平板中只1个,可能实际数量小于该数值

❷ 论述污水处理的微生物学原理及主要的处理方式

参与污废水抄处理的生物主要袭有四类:
1.细菌类:在污水处理所利用的生物群中,细菌是体型最微小的一种,它具有在好氧及厌氧条件下分解吸收各种有机物的能力.对污水生物处理起作用的细菌有.菌胶团.球衣细菌.硝化菌.脱氮菌.聚磷菌等几种.
2.原生动物:原生动物具有吞食污水中的有机物,细菌,在体内迅速氧化分解的能力,因此在活性污泥法和生物膜中.它除了能除去的有机物,加快有机物的分解速度外,还能使生物膜的表面附着能力再生,原声动物是单细胞的好氧性生物.
3.藻类:藻类是植物,含有叶绿素,当叶绿素吸收二氧化碳和水进行光合作用而产生碳水化合物时将放出大量的氧于水中,稳定塘就是利用这种氧来氧化污水的有机物.
4:后生动物,以上所介绍的生物都是单细胞构成,体内还有各种器官,参与污水处理的后生动物,包括从形态较小的轮虫到栖息于生物滤池的甲壳虫,昆虫,幼虫等体形较大的种种类型.

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❸ 微生物计数方法有哪些我想知道详细的操作步骤

微生物的显微直接计数法

一、实验目的
了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。
二、实验原理
测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。
显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清。
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图21-1),计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为l mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
已知:1mm3体积=10 mm×10 mm×10 mm= 1000mm3
所以:1mm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格,即系数K=4×106 。
因此:每ml菌悬液中含有细胞数= 每个小格中细胞平均数(N)×系数(K)×菌液稀释倍数(d)
三、实验器材
1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)斜面或培养液。
2.器材:显微镜、血球计数板、盖玻片(22mm×22mm)、吸水纸、计数器、滴管、擦镜纸。
四、实验方法
1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释到10-2),以每小格的菌数可数为度。
2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。
3.将酵母菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上,不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高。然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。4.静置片刻,将血球计数板置载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。
5.计数时若计数区是由16个大方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的菌数。如果是25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央l个大方格的菌数(即80个小格)。如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。
6.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2—3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),求出每一个小格中细胞平均数(N),按公式计算出每ml(g)菌悬液所含酵母菌细胞数量。
7.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。
五、实验作业:
将实验结果填入下表中:
计数次数 每个大方格菌数 稀 释
倍 数 试管斜面中的总菌数 平均值
1 2 3 4 5
第一次
第二次

❹ 废水中微生物多样性的检测有几种方法

solemon23(站内联系TA)有没有水来处理的高手,只源想得到水中微生物多样性程度,比如某水体中微生物多样性达到中度多样性。 现在分子生物学手段比较盛行,PCR,克隆,DGGE等。凡龙(站内联系TA)没有简单方法,只有专业方法,PCR喽bill2064(站内联系TA)可以尝试biolog 但它只针对好氧微生物echo1234(站内联系TA)PCR-DGGE吧 大概可以看出多样性程度 成本相对不高cz200717(站内联系TA)一般的生态分析方法的话,DGGE和RFLP应该都可以。稍微先进点的话就做一下RT-PCR……

❺ 微生物计数方法有哪些

测定微生物细胞数目的方法有很多,介绍几种

1.血细胞计数法

将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数。

①此法的缺点是不能区分死菌和活菌。

②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数。

③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化

2.稀释涂布平板法

原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。

①这一方法常用来统计样品中活菌的数目

②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。

③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定。但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等。

④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法。染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞。

3.滤膜法

滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的细菌数。

此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数。例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目。

此法也是统计样品中活菌的数目。

4.比浊法

原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大。因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量。实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确。

5.显微镜直接计数法

在课本生物选修1生物技术实践P22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数。再如滤膜法也一样,可以有两种情况。

另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目。

❻ 请问 活性污泥法污水处理中 BOD,DO,微生物数量之间的相互关系

在有氧情况下(DO足够)微生物去除BOD,也可以理解为以BOD为食物
所以在DO适当,BOD以及其余营养物质足够量的情况下,微生物可以较快的增殖(数量增多)

❼ 生化污水镜检正常时各种微生物数量各多少

检测方法 采用经典的计数法作为微生物定量方法。用滴管精确 取 0. 05ml( 一滴) 充分混匀的专混合液滴在载玻片上, 从一属侧 推压好盖玻片。制作过程要注意避免气泡的发生。样品制 作完成后利用 10 × 15 倍显微镜进行全片计数。形成结果记 录时, 需同时记录观测微生物种类、 数量和状态活性。 2 指示性微生物 2. 1 指示微生物的概念 微生物的现代定义为: 一切肉眼不可见的微小生物, 个 体微小, 结构简单。在本文中, 指示性微生物指的是在污水 处理中易于镜检观察, 对活性污泥状态具有良好反映力的微 生物。其中因污水处理厂的工艺不同、 进厂污水原液成分不 同, 各厂各工艺中占主导作用指示性微生物也不尽相同。

❽ 数量的方法怎样准确测定一定水质中微生物的数量

一、2mm×2mm方格的计数
2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。
计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。

1.16×25型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数

二、1mm×1mm方格的计数
1.16×25型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数

第二:选择的稀释度,做平板计数
选择适宜的稀释度,吸取1mL加入平板,注入孟加拉红培养基,29摄氏度培养5-7天,计数。
酵母总数/mL=平板数X稀释倍数
微生物的方法同理

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