㈠ 我想请教一下，我做油红0 ，没封片时候图像清晰，为什么拿中性树脂封片以后再看感觉红色团一块了
中性树胶里面有二甲苯啊，二甲苯溶解脂肪，建议使用甘油明胶等回水溶性封固剂答封片，其实你可以买现成的试剂盒，南京建成就有，他家的油红O试剂盒里有个专门的封固剂，就是要加热才能溶解，麻烦是麻烦，但效果还不错。
㈡ 原位杂交的主要程序
1、使用地高辛标记的核酸探针进行石蜡切片的RNA原位杂交第一天
1） 二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟；
2） 无水乙醇浸泡2次，每次3分钟；
3） 95%乙醇浸泡2次，每次3分钟；
4） PBS清洗3分钟；
5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟；
6） PBS清洗10分钟；
7） 加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育15分钟；
8） PBS清洗2次，每次3分钟；
9） 0.2N的HCl孵育30分钟；
10）PBS清洗2次，每次3分钟；
11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟；
12）PBS清洗2次，每次5分钟；
13）预杂交缓冲液孵育30分钟；
14）准备核酸探针混合物：使用预杂交缓冲液稀释探针，85℃加热5分钟，置于冰块中10分钟；
15）杂交；第二天
16）将玻片置于SSC中2次，每次5分钟以去除封片；
17）PBS清洗3分钟；
18）RNA酶A溶液中（或0.1-1ng/mlPBS中），37℃孵育30分钟；
19）PBS清洗5分钟；
20）室温，2×SSC清洗10分钟；
21）37℃，1×SSC清洗10分钟；
22）37℃，0.5×SSC清洗10分钟；
23）缓冲液A孵育10分钟；
24）缓冲液A（1%正常绵羊血清和0.03%三重氢核X-100）孵育30分钟；
25）加入抗地高辛抗体（1/200的上述缓冲液，来自Boehringer Mannheim），37℃孵育3 小时；
26）缓冲液A清洗2次，每次10分钟；
27）缓冲液B清洗2次，每次5分钟；
28）制成NBT/BCIP暗处保存30-60分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可延长到16小时；
29）停止缓冲液B的反应，用水进行简单的清洗；
30）固红，脱水以及封片进行核的复染。
2、使用地高辛标记的寡核苷酸探针进行石蜡切片的原位DNA杂交第一天
1） 二甲苯于37℃脱蜡2次，每次15分钟；
2） 无水乙醇浸泡2次，每次5分钟；
3） 95%乙醇浸泡2次，每次5分钟；
4） PBS清洗5分钟；
5） 2%焦碳酸二乙酯室温下浸泡10分钟；
6） PBS清洗5分钟；
7） 加入胃蛋白酶25ul/ml，37℃孵育10分钟；
8） PBS清洗2次，每次5分钟；
9） 0.2N的HCl孵育30分钟；
10）PBS清洗2次，每次5分钟；
11）0.25%无水乙酸和0.1M三乙醇胺孵育10分钟；
12）PBS清洗5分钟；
13）预杂交缓冲液孵育30分钟；
14）准备寡核苷酸探针混合物：使用预杂交缓冲液稀释探针；
15）杂交；第二天
16）将玻片置于SSC中以去除封片；
17）室温，2×SSC清洗10分钟；
18）37℃，1×SSC清洗10分钟；
19）37℃，0.5×SSC清洗10分钟；
20）缓冲液A孵育10分钟；
21）缓冲液A孵育30分钟；
22）加入抗地高辛抗体37℃孵育3小时；
23）缓冲液A清洗2次，每次5分钟；
24）缓冲液B清洗2次，每次5分钟；
25）制成NBT/BCIP暗处保存30-60分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可长到16小时；
26）停止缓冲液B的反应，用水进行简单的清洗；
27）固红，脱水以及封片进行核的复染。
㈢ 病理片子用什么胶封片
树脂胶
㈣ 细胞爬片做免疫荧光用什么封片
甘油不会凝固，片子不易长时间保存。指甲油、树脂对荧光有影响，而且指甲油所含有机回溶剂对物镜不好。最答好用专门的荧光封片剂。
Aqua-Poly/Mount (Polysciences, Inc.) #18606 20ml $37.65
*HISTOTEC PERMANENT AQUEOUS MOUNTANT(serotec,Immunological Excelence)
(HIS002B)30ml $89
这两个是现成的，买来就可以用，但价格较贵。
sigma Mowiol 4-88 是颗粒，需自己配制，量大，价格很便宜。
㈤ 怎样用中性树脂封片
晾干后滴在上面两滴中性树脂然后放盖玻片，轻压盖玻片让液滴充满整个玻片，然后晾干，最好晾一个星期再看，不然容易脱落。当然不用油镜的话应该就不用晾那么久了。
㈥ 中性树脂封片用什么溶解中性树脂
可以试试飞秒实验室的脱胶剂，或则脱漆剂，都可以，或者你自己用醇试试