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ga3配置蒸馏水

发布时间:2022-04-12 10:38:02

Ⅰ 传祺ga3用什么样的冷却液

防冻液的全称应该叫防冻冷却液,是指有防冻功能的冷却液。 汽车的防冻冷却液种类很多,一般来讲-25℃,-35℃的商品为市场主流.北方极端地区小编推荐使用-60℃. 汽车的防冻冷却液除防冻外,防冻冷却液还具有以下几种功能: 第一个是防腐蚀功能。发动机及其冷却系统是金属制造的,有铜、有铁、有铝、有钢还有焊锡。这些金属在高温下与水接触,时间长了都会遭到腐蚀,会生锈。而防冻冷却液不仅不会对发动机冷却系统造成腐蚀,还具有防腐和除锈功能。 第二个是防冻冷却液的沸点高。水的沸点是100℃,优质防冻冷却液的沸点通常在零上110℃,这样在夏季使用,防冻冷却液比水更难开锅。 第三是防冻冷却液可以防垢,用水作冷却液最让司机头疼的就是水垢问题,水垢附着在水箱、水套的金属表面,使散热效果越来越差,而且清除起来也很困难。优质的冷却液采用蒸馏水制造,并加有防垢添加剂,不但不生水垢还具有除垢功能。当然,如果你的水箱水垢很厚,最好还是先用水箱清洗剂彻底清洗后再添加冷却液。 选择-35的就完全可以

Ⅱ 植物组培步骤

组织培养的步骤
一、培养基配制
配制培养基有两种方法可以选择,一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、B5等。
自己配制可以节约费用,但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题,给实验带来麻烦。就目前国内的情况看,大部分还是自己配制。为了方便起见,现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液
(1)配制MS大量元素母液
一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。
分别称取
NH4NO3 165g KH2PO4 17g
KNO3 190g CaCl2·2H2O 44g
MgSO4·7H2O 37g
各自配成1L的母液。倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。
(2)配制MS微量元素母液
一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取
KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025g
H3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025g
MnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025g
ZnSO4·7H2O 0.86g
配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。
CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。
分别称取
CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g
各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量。
(3)配制MS有机母液
一般配制成100倍MS有机母液。
依次称取
肌醇 10g 盐酸硫胺素(VB1) 0.01g
烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g
盐酸吡哆醇(VB6) 0.05g
配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。
(4)配制MS铁盐母液
一般配制成100倍MS铁盐母液。
依次称取
EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g
配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。
所以MS母液有5种大量元素母液,加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液,共8种母液。
激素母液的配制
各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。
2、配制培养基
以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作:
(1)先在烧杯中放入一些蒸馏水。
(2)分别取上面八种母液10ml倒入。
(3)一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。
(4)加蒸馏水用量筒定溶至1L。
(5)按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。
(6)用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。
1当量HCL配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1当量NaOH配制:称取NaOH 4g 配成100ml溶液。
(7)称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。
(8)稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。
(9)放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。
(10)灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。

Ⅲ 高中生物必修三问题

这是我的答案:1、多株长势相同的正常玉米幼苗 2、等体积的蒸馏水 3计算甲乙两组幼苗的平均高度 结果:甲组明显高于乙组 最后一个结论和你的一样。第一个问题都用病毒处理减少了偶然误差 第2个问题你说的对,如果用别的就会不是单一变量了,但如果用同样的赤霉素处理,那么两组实验就都一样了,没有变量了,所以我们用等体积的蒸馏水,也可以说是空白实验,这不就可以了…

Ⅳ 当称量20mgGA3时,配制200ppm的浓度需要多少蒸馏水溶解

水溶解的话,密度的话已经够了,总解的话要到一两升热水。

Ⅳ 简述植物组织培养的步骤

植物组织培养方法 1 MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg/L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
铁盐(母液Ⅲ)
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
烟酸 100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸 400
以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0.1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液。
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中。
配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。
溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)。
2 BA为细胞分裂素 NAA 是萘乙酸,为生长素的一种
3 适于百合根的激素暂时没找到
以下是叶片和胚的激素:对麝香百合 (LiliumlongiflorumThunb)叶片进行离体培养 ,可成功获得无菌苗。试验结果表明 :培养基MS +BA 0 1mg/L +NAA 1 0mg/L适于初代培养 ,有助于根和芽的分化 ;MS +BA 0 5mg/L +NAA1 5mg/L适于增殖培养 ,利于愈伤组织的产生 ,并促进芽的分化 ;生根培养基为 1/ 2MS +NAA 1 0mg/L +多效唑 10 0mg/L ;当试管苗根长 1cm时移栽易成活
在含有1 mg/ L IAA,1 m g/ L GA3,6 0 0 m g/ L CH的 MS培养基上培养 ,蔗糖含量为 6 %~ 8%时 ,百合幼胚胚性生长最好 ,培养 30 d后可以得到正常胚 .在含有 0 .1 m g/ L NAA,1 m g/ L BA的 MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织 ,将这些愈伤组织转移到 1 / 2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽 ,不定芽生根移栽后 ,其成活率可达90 %以上

Ⅵ 植物体细胞培养基操作

楼主好!! 实验八 培养基的制备与灭菌 一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。2. 掌握培养基的配置方法。3. 掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的操作方法。二、基本原理 正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。由于微生物种类及代谢类型的多样性.因而用于培养微生物的培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却大致相同.例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同。三、实验材料1. 药品:待配各种培养基的组成成分、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。3. 其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。2.灭菌前玻璃器皿的包装(1) 培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。(2)
图8-1 移液管的包扎移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。(二)液体及固体培养基的配制过程1.液体培养基配制1) 称量:一般可用0.01g天平称量配制培养基所需的各种药品,先按培养基配方计算出各成分的用量.然后进行准确称量。2) 溶解:将称好的药品置于一烧杯中,先加入少量水(根据实验需要可用自来水或蒸馏水),用玻璃棒搅动,加热溶解。3) 定容:待全部药品溶解后,倒入一量筒中,加水至所需体积。如某种药品用量太少时,可预先配成较浓溶液,然后按比例吸取一定体积溶液,加入至培养基中。4) 调pH:一般用pH试纸测定培养基的pH。用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,如培养基偏酸或偏碱时,可用1mol/L NaoH或1mol/L HCl溶液进行调节。调节pH时,应逐滴加入NaOH或HCI溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培养基中成分。边加边搅拌,并不时用pH试纸测试,直至达到所需pH为止。5) 过滤:用滤纸或多层纱布过滤培养基。一般无特殊要求时,此步可省去。2.固体培养基的配制 配制固体培养基时,应将已配好的液体培养基加热煮沸,再将称好的琼脂(1.5~2%)加入,并用玻棒不断搅拌,以免糊底烧焦。继续加热至琼脂全部融化,最后补足因蒸发而失去水分。(三)培养基的分装 根据不同需要,可将已配好培养基分装入试管或三角瓶内,分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口,造成污染。如操作不小心,培养基沾污管口或瓶口时,可用镊子夹一小块脱脂棉,擦去管口或瓶口的培养基,并将脱脂棉弃去。1.试管的分装取一个玻璃漏斗,装在铁架上,漏斗下连一根橡皮管,橡皮管下端再与另一玻璃管相接,橡皮管的中部加一弹簧夹。分装时,用左手拿住空试管中部,并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内,以右手拇指及食指开放弹簧夹,中指及无名指夹佐玻璃管嘴,使培养基直接流入试管内。装入试管培养基的量视试管大小及需要而定,若所用试管大小为15×150 mm时,液体培养基可分装至试管高度1/4左有为宜;如分装固体或半固体培养基时,在琼脂完全融化后,应趁热分装于试管中。用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1/5(约3—4mI),半固体培养基分装量为管高的1/3为宜。2.三角瓶的分装图8-2培养基的分装 用于振荡培养微生物时,可在250 m1三角瓶中加入50 m1的液体培养基;若用于制作平板培养基用时,可在250 m1三角瓶中加入150ml培养基,然后再加入3g琼脂粉(按2%计算),灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化。(四)棉塞的制作及试管、三角瓶的包扎 为了培养好气性微生物,需提供优良通气条件,同时为防止杂菌污染,则必须对通入试管或三角瓶内空气预先进行过滤除菌。通常方法是在试管及三角瓶口加上棉花塞等。1.试管棉塞的制作制棉塞时,应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块,铺展于左手拇指和食指扣成的团孔上,用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞.然后直接压入试管或三角瓶口。也可借用玻璃棒塞入,也可用折叠卷塞法制作棉塞。制作的棉塞应紧贴管壁,不留缝隙,以防外界微生物沿缝隙侵入,棉塞不宜过紧或过松,塞好后以手提棉塞,试管不下落为准。棉塞的2/3在试管内,1/3在试管外。目前也有采用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆,外面包上一层牛皮纸。用记号笔注明培养基名称及配制日期,灭菌待用。
图8-3 棉塞的制作
图8-4 正确与不正确的棉塞1.金属塞 2正确 3、4不正确 2.三角瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布,再塞在瓶口上。有时为了进行液体振荡培养加大通气量,则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上,目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上,再包上一层牛皮纸并用线绳捆好,灭菌待用。(五)培养基的灭菌培养基经分装包扎后,应立即按配制方法规定的灭菌条件进行进行高压蒸汽灭菌。(六)斜面和平板的制作1.斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管,趁热置于木棒或玻棒上,使成适当斜度,凝固后即成斜面。斜面长度不超过试管长度l/2为宜。如制作半团体或固体深层培养基时,灭菌后则应垂直放置至凝固。2.平板的制作将装在三角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后,待冷至50℃左右倾入无菌培养皿中。温度过高时,皿盖上的冷凝水太多;温度低于50℃,培养基易于凝固而无法制作平板。平板的制作应在火旁进行,左手拿培养皿,右手拿三角瓶的底部或试管,左手同时用小指和手掌将棉塞打开,灼烧瓶口,用左手大拇指将培养皿盖打开一缝,至瓶口正好伸入,倾入10~15mL培养基,迅速盖好皿盖,置于桌上,轻轻旋转平皿,使培养基均匀分布于整个平皿中,冷凝后即成平板。(七)培养基的灭菌检查灭菌后的培养基,一般需进行无菌检查。最好取出1~2管(瓶),置于37℃温箱中培养1~2天,确定无菌后方可使用。(八)无菌水的制备在每个250mL的三角瓶内装100mL的蒸馏水并塞上棉塞或硅胶塞。在每支试管内装4.5mL蒸馏水,塞上棉塞或硅胶塞。再在棉塞上包上一张牛皮纸,高压蒸汽灭菌。0.1MPa灭菌20~30min。五、实验内容1. 根据要求清洗各种玻璃器皿,并进行包扎。2. 根据要求配制各种培养基。3. 用电热鼓风干燥箱对玻璃器皿进行干热灭菌。4. 用高压蒸汽灭菌锅对所配各培养基灭菌。六、实验报告1. 简述移液管和培养皿的包扎注意事项。2. 简述配制培养基的基本步骤及注意事项。3. 为什么微生物实验室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞入一小段棉花,再用报纸包起来,经高压蒸汽灭菌后才能使用?4. 为什么微生物实验室所用的三角瓶口或试管口都要塞上棉塞(硅胶塞)才能使用?5. 配制培养基时为什么要调节pH?6. 高压蒸汽灭菌为什么比干热灭菌要求温度低、时间短? 附录 灭菌技术一、目的要求了解消毒和灭菌的原理,并掌握各种灭菌方法的操作步骤。二、实验材料1. 仪器或其他用具:上述包扎的培养皿、试管、移液管等,电热鼓风干燥箱,高压蒸汽灭菌锅,微孔滤膜过滤器,0.22μm滤膜,注射器,镊子,玻璃涂棒。2. 培养基:上述配制的培养基及生理盐水三、基本原理在微生物实验中,需要进行纯培养,不能有任何杂菌污染,因此必须对所用器材、培养基和工作场所进行灭菌和消毒。灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物,包括微生物的营养体、芽孢和孢子。实验室常用的灭菌方法包括直接灼烧、恒温干燥箱灭菌、高压蒸汽灭菌、间歇灭菌、煮沸灭菌等方法。这些方法的基本原理是通过加热使微生物体内蛋白质凝固变性,从而达到灭菌的目的。四、操作步骤(一)干热灭菌法干热灭菌是在电热干燥箱内利用高温干燥空气(160℃~170℃)进行灭菌,它是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。此法适用于玻璃器皿如移液管、试管和培养皿的灭菌。培养基、橡胶制品、塑料制品不能采用干热灭菌。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固越慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160℃~170℃),时间长(1~2h)。但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。干热灭菌使用的是电热干燥箱(干燥箱)。具体操作步骤如下:1. 装入待灭菌物品:将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内,关好箱门。堆积时要留有空隙,物品不要摆放得太挤,以免妨碍空气流通,灭菌物品不要接触电热干燥箱内壁的铁板、温度探头,以防包装纸烤焦起火。2. 升温:接通电源,打开开关,适当打开电热干燥箱顶部的排气孔,旋动恒温调节器,使温度逐步上升。当温度升至100℃时,关闭排气孔。在升温过程中,如果红灯熄灭,绿灯亮,表示电热干燥箱内停止加温,此时如果还未达到所需的160℃~170℃,则需要转动温度调节器使红灯亮,如此反复调节,直至达到所需的温度。3. 恒温:当温度升到160℃~170℃时,借助恒温调节器的自动控制,保持此温度2h。干热灭菌过程中,严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。4. 降温:切断电源,自然降温。5. 开箱取物:待电热干燥箱内温度降到60℃以下后,才能打开箱门,取出灭菌物品。同时,应将温度调节旋钮调到零点,并打开排气孔。电热干燥箱内温度未降到60℃以前,切勿自行打开箱门,以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。(二)高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内,在一定的压力下保持15~30分钟进行灭菌。此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌,也可用于玻璃器皿的灭菌。将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅夹套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中排尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,获得高于100℃的温度,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在相同的温度下,湿热灭菌的效果好于干热灭菌。有三点原因:在湿热灭菌中菌体吸收水分,蛋白质容易凝固变性,蛋白质随着含水量的增加,所需凝固温度降低;湿热灭菌中蒸汽的穿透力比干燥空气大;蒸汽在被灭菌物体表面凝结,释放出大量的汽化潜热,能迅速提高灭菌物体表面的温度,从而增加灭菌效力。实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅,其结构和工作原理是相同的。本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅,自控式灭菌锅的使用可参考厂家说明书。具体操作步骤如下:1. 加水:首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面没过加热蛇管,与三角搁架相平为宜。切勿忘记检查水位,加水量过少,灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。2. 装料:放回内层锅,并装入待灭菌的物品。注意不要装得太挤,以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。装有培养基的容器放置时要防止液体溢出,三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。3. 加盖:将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内,摆正锅盖,对齐螺口,然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气,并打开排气阀。4. 排气:打开电源加热灭菌锅,将水煮沸,使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。一般认为当排出的气流很强并有嘘声时,表明锅内的空气已排尽,沸腾后约需5分钟。5. 升压:冷空气完全排尽后,关闭排气阀,继续加热,锅内压力开始上升。6. 保压:当压力表指针达到所需压力时,控制电源,开始计时并维持压力至所需的时间。如本实验中采用0.1Mpa,121.5℃,20分钟灭菌。灭菌的主要因素是温度而不是压力,因此锅内的冷空气必须完全排尽后,才能关闭排气阀,维持所需压力。7. 降压:达到灭菌所需的时间后,切断电源,让灭菌锅温度自然下降,当压力表的压力降至“0”后,方可打开排气阀,排尽余下的蒸汽,旋松螺栓,打开锅盖,取出灭菌物品,倒掉锅内剩水。压力一定要降到“0”后,才能打开排气阀,开盖取物。否则就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口,造成瓶口被污染,甚至灼伤操作者。8. 无菌检查:将已灭菌的培养基放入37℃恒温培养箱培养24h,检查无杂菌生长后,即可使用。 (三)过滤除菌有些物质,如抗生素、血清、维生素、糖溶液等采用加热灭菌法时,容易受热分解而被破坏,因而要采用过滤除菌法。过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法,该方法最大的优点是不破坏溶液中各种物质的化学成分。过滤除菌法除实验室用于溶液、试剂的除菌外,在微生物工作中使用的净化工作台也是根据过滤除菌的原理设计的,可根据不同的需要来选用不同的滤器和滤板材料。应用最广泛的过滤器种类有:1. 微孔滤膜过滤器:是一种新型过滤器,它由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盒组成,出口处可连接针头,入口处可连接针筒,使用时将滤膜装入两塑料盒之间,旋紧盒盖,当溶液从针筒注入滤器时,各种微生物被阻留在微孔滤膜上面,而液体和小分子物质通过滤膜,从而达到除菌的目的。其滤膜是由硝酸纤维素、醋酸纤维素等制成的薄膜,有孔径大小不同的多种规格(如0.1μm、0.22μm、0.3μm、0.45μm等),实验室中用于除菌的微孔滤膜孔径一般为0.22μm。根据待除菌溶液量的多少,可选用不同大小的滤器。该滤器的优点是吸附性小,即溶液中的物质损耗少,过滤速度快,每张滤膜只使用1次,不用清洗。2. 蔡氏(Seitz)过滤器:是一种金属制成的过滤漏斗,其过滤部分是一种用石棉纤维和其他填充物压制成的片状结构。溶液中的细菌通过石棉纤维的吸附和过滤而被去除,但对溶液中其他物质的吸附性也大,每张纤维板只能使用1次。3. 玻璃过滤器:是一种玻璃制成的过滤漏斗,其过滤部分是由细玻璃粉烧结成的板状构造。玻璃滤器的规格很多,5号(孔径2~5μm)和6号(孔径<2μm)适用于过滤细菌,其优点是吸附量少,但每次使用后要洗净再用。本实验采用微孔滤膜过滤器进行过滤除菌,具体操作步骤如下:1. 组装、灭菌:将0.22�0�8m孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中,旋紧压平,包装灭菌后待用(0.1Mpa,121.5℃,灭菌20分钟)。2. 连接:将灭菌滤器的入口在无菌条件下,以无菌操作方式连接于装有待滤溶液的注射器上,将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中。3. 压滤:将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中,滤毕,将针头拔出。压滤时用力要适当,不可太猛太快,以免细菌被挤压通过滤膜。4. 无菌检查:无菌操作吸取除菌滤液0.1mL于肉汤蛋白胨平板上,均匀涂布,置37℃恒温培养箱培养24小时,检查是否有杂菌生长。5. 清洗:弃去塑料滤器上的微孔滤膜,将塑料滤器清洗干净,并换上一张新的微孔滤膜,组装包扎,再经灭菌后使用。整个过程应严格按照无菌操作,以防污染,过滤时应避免各连接处出现渗透现象。 来自网络,本人整理,没法上图!

Ⅶ 铁盐的配置

在实验中常用的培养基,可将其中的各种成分配成10倍、100倍的母液,放入冰箱中保存,用时可按比例稀释。配制母液有2点好处:一是可减少每次配制称量药品的麻烦,二是减少极微量药品在每次称量时造成的误差。母液可以配单一化合物母液,但一般都配成以下四种不同混合母液。应注意以下几个方面:A.药品称量应准确,尤其微量元素化合物应精确到0.0001克,大量元素可精确到0.01克。B.配制母液的浓度适当,一是长时间保存后易沉淀,二是浓度大,用量少,在配制培养基时易影响精确度。C.母液贮藏不宜过长,一般几个月左右,要定期检查,如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象,就不能使用。D.母液应放在2-4℃的冰箱中保存。

(1)大量元素混合母液:指浓度大于0.5mmol/L的元素,即含N、P、K、Ca、Mg、S等六种盐类的 混合溶液,可配成10倍母液,用时每配1000ml取100ml母液,配时要注意以下几点:a.各化合物必须充分溶解后才能混合。b.混合时注意先后顺序,特别要将钙离子与硫酸根离子,磷酸根离子错开,以免产生硫酸钙、磷酸钙等不溶性化合物沉淀。c.混合时要慢,边搅拌边混合。

(2)微量元素混合母液:指小于0.5mmol/L的元素即含除Fe以外的B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等盐类的混合溶液,因含量低,一般配成100倍甚至1000倍,用时每配1000ml取10ml或1ml。配时也要注意顺次溶解后再混合,以免沉淀。

(3)铁盐母液:铁盐必须单独配制,若同其他无机元素混合配成母液,易造成沉淀。配法是将5.57g FeSO4.7H2O水溶液缓慢加入到7.45gNa2-EDTA微沸水溶液中,并不断搅拌,最后定容到1000ml,用时每配1000ml培养基取5ml。

(4)有机化合物母液:主要是维生素和氨基酸类物质,这些物质不能配成混合母液,一定要分别配成单独的母液,其浓度有每ml含0.1、1.0、10mg化合物,用时根据所需浓度适当取用。

(5)植物激素:每种激素必须单独配制成母液,浓度为每ml含0.1、0.5、1.0mg激素,激素浓度的表示方法有两种,一种是ppm(或每升中mg数),另一种是mol.用时根据需要取用。由于多数激素难溶于水,它们的配法如下:

1) IAA IBA GA3先溶与少量95%酒精,再加水定容到一定浓度。

2) NAA可溶于热水或少量95%的酒精中,再加水定溶到一定浓度。

3) 2,4-D不溶于水,可用1mol的NaOH溶解后,再加水定容至一定浓度。

4) KIN和BA先溶于少量1mol的HCl中,再加水定容。

5) 玉米素先溶于少量95%酒精中,再加水至一定浓度。

2培养基的配置

(1)混合培养基中的各成分。先量取大量元素母液,再依次加入微量元素母液、铁盐母液、有机成分,然后加入植物激素及其他附加成分。

(2)溶化琼脂。称取应加的琼脂和蔗糖,将琼脂浸泡到透明后,用蒸馏水加热烧开熔化琼脂,待琼脂完全溶化后,把1加入,用pH试纸测pH值,并用0.1mol的NaOH或HCl调pH为5.6-5.8,最后加水定容至所需体积。

(3)分装。将熬好的培养基分装于培养瓶中,分装时注意不要把培养基倒在瓶口上,以防引起污染,然后用封口膜或瓶盖封口。

(4)灭菌。由于培养基内有丰富的营养物质,极利细菌和真菌繁殖,造成污染,影响组培的成功,一般有高温高压消毒和过滤消毒两种方法。⒈高温高压消毒:一般用消毒锅消毒,注意消毒锅不能装的过满,采用三次放气灭菌法,即0.05Mpa下放三次气,在0.1Mpa维持15-20分钟。⒉过滤消毒:一些易受高温破坏的培养基成分如IAA、IBA、ZT等,不宜用高温高压法消毒,可用过滤消毒,可过滤消毒后再加入已高温高压消毒的培养基中,过滤消毒应在无菌室或超净工件台上进行,以避免污染培养基。

Ⅷ 培养基的配方,希望给我详细点咯~!

高氏一号琼脂培养基(培养放线菌用)
可溶性淀粉20g,硝酸钾1g,氯化钠0.5g,K2HPO4 •3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O 0.5g,FeSO4•7H2O 0.01g,琼脂20g,水1000ml,pH7.2~内7.4。配制时,先用冷水,将淀容粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。112℃灭菌20分钟。
马丁氏琼脂培养基(分离真菌用)
葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO4 1g,MgSO4•7H2O 0.5g,孟加拉红(1mg/ml)3.3ml,琼脂20g,pH自然,水1000ml,112℃灭菌30分钟。临用前加入0.03%链霉稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30微克,2%去氧胆酸钠溶液2ml(预先灭菌,临用前加入)。
不好意思只找到两个,你先看看行不行。

Ⅸ 配置好的人工合成培养基可以用湿热灭菌法进行灭菌吗为什么

培养基灭菌方法需要由培养基种类决定。
湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法,由于蒸汽潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高,是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。湿热灭菌法可分为:煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。
影响湿热灭菌的主要因素有:微生物的种类与数量、蒸汽的性质、药品性质和灭菌时间等。
(1)煮沸灭菌法:将水煮沸至100摄氏度,保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体,保持1-3小时可杀死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度,能增强杀菌作用,还可去污防锈。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。
(2)巴氏消毒法:一种低温消毒法,因巴斯德首创而得名。有两种具体方法,一是低温维持法:62摄氏度维持30分钟;二是高温瞬时法:75摄氏度作用15-30秒。该法适用于食品的消毒。
(3)流通蒸气灭菌法:利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。
(4)间歇蒸汽灭菌法
(5)高压蒸汽灭菌法:103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度,维持15-20分钟。
湿热灭菌法 湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果,因为:①湿热中蛋白吸收水份,更易凝固变性;②水分子的穿透力比空气大,更易均匀传递热能;③蒸汽有潜热存在,每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能,可迅速提高物体的温度。
湿热灭菌法一般采用121摄氏度,灭菌20-30min,如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时,再灭菌一次,以用于杀死刚刚萌发的孢子。

拓展:培养基的灭菌方法
1、高压蒸汽灭菌:
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。 灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌:
一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。

Ⅹ 赤霉素ga3,ga4,ga7有什么不同

赤霉素ga3、ga4、ga7的区别:

1、生理活性:GA3(俗称920)具有较强的生理活性,GA4和ga7具有较弱的生理活性。

2、性能作用:GA3能促进植物生长;(ga4-ga7)是“920”的改良型,更高效、更稳定、更安全,它能显著促进茎叶的生长,特别是对遗传性和生理性矮秆植物。

3、化学性质:GA3、GA4和ga7都是赤霉素的同系物。

赤霉素中GA3具有最强的生理活性和研究最多的活性,能显著促进植物茎叶的生长,特别是对遗传和生理类型的矮生植物,它可以替代一些种子萌发所需的光照和低温条件,从而促进发芽,使长日照植物在短日照条件下开花,缩短生命周期,诱导开花,增加甜瓜雄花数。

可诱导单性结实,提高坐果率,促进果实生长,延缓果实衰老,GA3还可以防止果皮腐烂,棉花开花期喷施可以减少芽、铃脱落,浸泡马铃薯可以打破休眠,浸泡大麦可以提高麦芽糖产量等。


(10)ga3配置蒸馏水扩展阅读:

赤霉素使用注意事项:

1、赤霉素是在日平均气温23℃以上的天气中喷洒的,因为气温较低时花果不发育,赤霉素不起作用。

2、喷洒时,要迅速喷洒细雾,并将药液均匀地喷洒在花朵上,如果浓度过高,植物就会徒然生长,变白,甚至死亡或变形。

3、如果市场上活性成分含量不一致,建议在使用赤霉素时严格按照说明书进行喷施。

4、由于赤霉素使用时需要精确配置,需要专人检查集中配置和使用。

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