稀释涂布法用蒸馏水稀释

『壹』 什么是稀释涂布平板法

显微镜计数法即血球计数法，事先把菌液稀释到一定的倍数，然后通过血球计数板在显微镜下计数。此法计数比较精准。

活菌计数法是将待测样品经一系列 10 倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取 0.2ml 放入无菌平皿，再倒入适量的已熔化并冷至 45 ℃ 左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放入适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：
每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿
菌落平均数×稀释倍数× 5
稀释涂布平板法是一种粗略的活菌计数法，即通过一定的稀释倍数，涂布到平板上，在适宜的条件下培养后，观察活菌数。
平板划线法是用来分离单菌落的一种方法，不是计数的方法。

『贰』 关于稀释涂布平板法

简单的数学问题:因为你要计算的是菌体的浓度，不是菌体的个数，与体积无关。
浓度
=
菌体个数/菌液体积。稀释到10-4浓度时，取出的1ml和取出的0.1ml二者浓度一样。0.1ml培养出来的菌落数虽然是1ml培养出来的菌落数的十分之一，但体积也是它的十分之一(0.1ml是1ml的十分之一)。计算原来菌液的浓度，直接将二者得出的菌液浓度乘以1×10^4即可。

『叁』 稀释涂布法是怎么样的

稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。

稀释平板涂布大部分是用于统计细菌数目的，不知道哪个稀释浓度最后长出来有适合统计的菌落数，所以必须每个稀释度都涂板子。

倒平板的方法

如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。

平板培养基的冷凝方法有两种，一种是将平板一个个摊开在桌面上冷凝，另一方法是将几个平板叠在一起冷凝。前者冷凝速度较快，在室温较高时采用；而后者冷凝速度较慢，可在室温较低时采用，其优点是形成冷凝水少，尤其适用于平板划线等的需要。

以上内容参考：网络-稀释倒平板法

『肆』 稀释涂布平板法是什么

由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是稀释涂布平板法。

用于部分成品的验证、生物制品的检验、土壤中细菌含量的测定以及食品和水源污染程度的检验。将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量分散样品中的微生物细胞，使其以单细胞形式存在。

其特征：

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。

计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。

经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些成品检定（如杀虫菌剂等）、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。

『伍』 稀释涂布平板法和稀释倒平板法操作和适用范围有什么区别

稀释涂布。

简单说一下两者的优点来方便你判断什么时候用什么吧：

稀释涂布平板法的结果是整个平板都是单菌落，可以得到大量的单菌落，要是平板划线法接影印，我建议不用影印了直接把你能从划线法中pick到的单菌落分别扔到筛选培养液中去摇，反而还省事些；

平板划线法相当于自带梯度稀释，比较适合是由固体培养基菌落之类的不太好判断具体菌量的菌源去筛选单菌落（否则用稀释法不熟悉的话还要设置梯度，麻烦），再一个就是本身菌源就基本是单一的，只是想保险起见分个单菌落挑个一两个菌落这种，比如从冰冻中复苏细菌就比较适合划个线，如果用稀释涂布的话要的菌太多了浪费。
两种方法基本相同，无菌操作也一样，不同的是先分别吸取0.5mol10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)稀释度的土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却到45℃左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品基中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别倒至于28℃和37℃温室中培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养

『陆』 稀释涂布平板法为什么要稀释

稀释涂布平板的目的是降低菌的浓度。浓度过高的菌会在培养基上长出过多的菌落，以至于没法挑出单菌落，那样就无法获得单一种类的菌，或者无法统计菌落数来计算菌液浓度了。

明白否？

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在涂平板计数计算菌液浓度时，不同稀释浓度下的平板菌落数可作为参考使用。

需要做梯度稀释。如果菌多的话就会长成一片。

『柒』 稀释涂布平板法

稀释平板涂布大部分是用于统计细菌数目的，你不知道哪个稀释浓度最后长出来有适合统计的菌落数，所以必须每个稀释度都涂板子。

『捌』 稀释涂布平板法稀释后涂布的原因

稀释操作：
1、将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10^1到10^6的顺序进行编号.
2、用移液试管吸取1ml培养的菌夜,注入10^1倍稀释的试管中.用手指轻压移夜管上的橡皮,吹吸三次,使菌液与水充分混匀.
3、从10^1倍稀释的试管中吸取1ml稀释液,注入10^2倍稀释的试管中,重复第二步的混匀操作.以此类推,直到完成最后一支试管的稀释.注意：移夜管需要经过灭菌.操作时,试管口和移夜管应在离火焰1~2cm处
涂布操作：1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中.
2、取少量菌夜（不超过0.1ml）滴加到培养基表面.
3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s.4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀.
注意：1.将涂布器末端浸在盛有体积分数为百分之七十的酒精的烧杯中.取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃.