① 稀释50*TAE溶液到1*TAE是用蒸馏水还是一般的水
做胶的TAE当然用双蒸水
如果是槽中使用的电泳缓冲液,单蒸水也可以
② 剃度稀释都用蒸馏水还是用溶解溶剂
做胶的TAE当然用双蒸水
如果是槽中使用的电泳缓冲液,单蒸水也可以
③ TAE缓冲液 配方
你好,我看了你的推断过程,有一个地方有误:Tris-乙酸不代表Tris与乙酸的比例是一专比一,实际上配TAE时,根据属所需的pH值,Tris与乙酸比例是2:1的。所以1X :0.04mol/l Tris-乙酸=0.04mol/LTris碱以及0.02mol/L乙酸,相应地你就能算出是57.1ml冰乙酸了。
另外,你发现没有,按照你的1X的配方EDTA是0.001mol/L,那么乘以50为0.05mol/L,而50×配方中是0.1mol/L。这两种配方都是正确的:分子克隆附录上面取的是0.05mol/L,takara的技术手册上用的是0.1mol/L,这个影响不大,主要是鳌合Mg,抑制DNase活性。
希望能够帮到你,有问题继续交流!
④ 50×TAE缓冲液配方
你好,我看了你的推断过程,有一个地方有误:Tris-乙酸不代表Tris与乙酸的比例是一比一,回实际上配TAE时,根据所需的答pH值,Tris与乙酸比例是2:1的。所以1X :0.04mol/l Tris-乙酸=0.04mol/LTris碱以及0.02mol/L乙酸,相应地你就能算出是57.1ml冰乙酸了。
另外,你发现没有,按照你的1X的配方EDTA是0.001mol/L,那么乘以50为0.05mol/L,而50×配方中是0.1mol/L。这两种配方都是正确的:分子克隆附录上面取的是0.05mol/L,takara的技术手册上用的是0.1mol/L,这个影响不大,主要是鳌合Mg,抑制DNase活性。
希望能够帮到你,有问题继续交流!
⑤ TAE缓冲液
按照
242g Tris碱
57.1ml冰乙酸
100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
是配置1L 50x的缓冲液
使用的时候取决于你的容回器有多大,一般用一个答2L的试剂瓶的话,就是40ml储存液+水补满到2L,然后拼命混匀就可以倒进电泳槽作电泳缓冲液或者配置agarose TAE胶了
⑥ 配置琼脂糖胶时,可以用蒸馏水和高浓度的TAE液吗
1.用蒸馏水将制胶工具洗干净 准备好制胶平板 用琼脂将模具边缘封闭 架好梳回子
2.根据要分离的答样品(DNA)大小配制合适浓度的琼脂凝胶 准确的称取一定量的琼脂糖干粉 加入到合适体积的锥形瓶中 加入一定量的电泳缓冲液(30ml左右TAE) 放入到微波炉内加热融化 冷却片刻(不烫手即可)
3.融化后的琼脂溶液摇晃混匀 倒入电泳槽中 等其凝固
4.室温下凝固30-40min左右 小心的拔出梳子 取出凝固好的凝胶放入电泳槽内 准备上样
5.在电泳槽中倒入电泳缓冲液(TAE)没过胶面1mm左右 去除胶孔内的气泡
6.上样 5ulDNA样品加入1ul上样缓冲液(loading buffer)和1ul的染料 用抢混匀后加入到凝胶孔内
.上样结束 接通电源 红色正极 黑色负极 DNA样品有负极往正极运动 加样孔侧为负 40-50v电压 电压30敏左右即可(< 40min)
8.电压结束 关闭电源 凝胶成像仪上观察电压位置并比对marker判断大小
⑦ 关于电泳缓冲液TAE配制的几个问题
按照说明上的量配的,一般问题不大,用精密pH试纸就可以。
完全可以的,只要使用前没有沉淀就可以。
一般不需要灭菌,因为就是用于电泳吗,甚至可以反复使用,隔一段时间换一次即可。
⑧ 10×Tris-乙酸(TAE)缓冲液配制方法
1.
称量Tris
48.4g,Na2EDTA·2H2O
7.44g
于1L烧杯中;
2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌溶解;
3加入11.4ml的冰醋酸回,充分搅拌;
4.用去答离子水定容至1L后,室温保存,待用。
⑨ 50倍的TAE缓冲液的配制
称下列试剂,1L烧杯
tris 242g
Na2EDTA.2H2O 37.2g
然后加入800ml的去离子水,充回分搅拌溶解。答
加入57.1ml的醋酸,充分混匀。
加去离子水定容至1L,室温保存。
需要使用的时候,稀释为1*的,
例如:需要使用200ml的1*TAE,则量4ml的50*TAE,196ml的去离子水,混匀即可。
⑩ 如何配制2%琼脂糖溶液
秤一克琼脂糖,加100毫升蒸馏水。
但是,一般跑电泳的时候,需要加tae缓冲液,50×tae加2毫升,再加98毫升蒸馏水。
配琼脂糖,差一两毫升没什么影响的,我们实验室用的是百分之二的。