DEAE52只有蒸馏水的峰

A. 请问蒸馏水的拉曼峰是什么意思

-- 拉曼光谱小常识
拉曼是一种光散射过程 Raman Effect = Light Scattering
激光能量 - 振动谱能量 = 拉曼散射光能量 (振动谱能量对应分子结构)
激光能量 - 拉曼散射光能量 = 振动谱能量 （所得拉曼谱即为分子的指纹）
拉曼光谱系统常用激光波长
拉曼光谱系统组成部分拉曼光谱的优点和特点
• Fingerprint for Qualitative identification 指纹性振动谱
•No sample preparation 不用样品制备
• Fast and non destructive 快速，无损
• Highly selective technique 高选择度北 为何使用微区拉曼 高空间分辨率； 所须样品量少
拉曼散射光谱应用
拉曼光谱是直接联系于分子结构的振动谱，可对物质进行指纹性认证。物质结构的任何微小变化会非常敏感反映在拉曼光谱中，因而可用来研究物质的物理化学等各方面性质随结构的变化。
广泛的应用领域：
* 高分子聚合物 * 纳米材料 * 电化学 * 半导体 * 薄膜 * 矿物学 * 生物 * 医学药品 * 碳化物 * 在线过程监测 * 质量控制
* 刑侦：
- 玻璃材料 - 氧化物 - 油漆和颜料 - 氢氧化物 - 高分子 - 硫化物 - 爆炸 - 碳酸盐 - 纤维 - 硫酸盐 - 化学残留物 - 磷酸盐 - 颗粒性包裹体 - 麻醉剂和可控制物质 等等……

http://www.oacc.com.cn/printpage.asp?BoardID=4&ID=137

http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/001309.shtml

B. 紫菜多糖用deae提取为什么出现两个波峰

EDAE是哪种凝胶柱？ 是不是弱阴离子交换柱DEAE？ 如果是DEAE的话给你一点清洗的参考 一，在位清洗 1， 用2M的NaCl至少清洗2个柱体积。
2， 用1M的NaOH 至少清洗4个柱体积。 3， 用2M的NaCl至少清洗2个柱体积。 4， 用至少2个柱体积的蒸馏水润洗。

C. 为什么分子量较大的部分经DEAE-52洗脱后分子量变小

分子量大的多元醇相对柔软，分子量小的相对硬，所以就如你问的问题一样。软的做软泡，硬的做硬泡。这些都可以通过实验可以体会得到的。

D. DEAE-52离子交换层析中怎样确定Nacl浓度范围

要是没有任何文献报道过的，预试验建议作全部的0%-100%，然后看最后的内OD值合并峰值附近的收集液SephadexG-25除盐，容然后测定活性，确定你要收集的峰。这样肯定不会漏掉你要的峰。然后你就可以重复实验了。

E. 您好！请教：我在处理DEAE-52纤维素，刚开始用碱洗都很好抽滤，可是后来酸浸泡之后用水洗很难抽滤

..............这个底下不是有。。一层膜吗！不用可以塞棉花的。

F. DEAE-52纤维素柱求助

DEAE-纤维素复 DEAE cellulose DEAE-纤维素 DEAE cellulose 为二乙氨乙基纤制维素。是阴离子交换纤维素之一。 DEAE—纤维素的活化：称取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸馏水浸泡过夜，观察溶胀后DEAE的体积。根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE

G. 过完deae52柱子，怎么把nacl 洗脱干净

DEAE-52因是离子型介质，一般常用酸碱处理，先用0.5mol
NaOH碱洗，蒸馏水洗至中性后，再用0.5molHCl酸洗，蒸馏水洗至中性，再用0.5mol
NaOH碱洗，蒸馏水洗至中性。然后用你的初始洗脱液平衡后上样正常分离就可以了。

H. 纤维素DE-52的提取方法

纤维素DE-52提取法纯化多克隆抗体
该法提取IgG简便，既可小量提取，也可大量制备。
1．批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE52)50g，置于1000ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05mol/L，pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。将水分抽干，或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤，收集湿纤维素，以降低其离子强度。按1ml血清加湿重5g DE52，经过充分搅拌，置4℃吸附1h。上清液可再如此处理一次，即获得较纯的IgG。该法提取IgG简便，既可小量提取，也可大量制备。
2．Tris-Cl离子交换层析法(Ion-exchange chromatography)
【材料和试剂】
（1）DE52纤维素。
（2）HCl；NaOH；0.01～0.05mol/L，pH8.0 PB；0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl；0.5mol/L NaCl。
（3）待纯化标本：杂交瘤腹水或培养上清，免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。
（4）1.5×50cm 层析柱；透析袋；紫外分光光度计及其他透析和层析所需的试剂和器材。
【操作步骤】
（1）DE52纤维素的处理：DE52经酸、碱处理，0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡。
（2）装柱：将层析柱固定于滴定架上，柱底垫一圆形尼龙纱，出口接一细塑料管并关闭出水。将浸泡于0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl中的DE52沿玻璃棒倒入柱中，待DE52自然沉降3～5cm高时，吸除0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl，或松开出水口螺旋夹，控制流速1～2ml/min，同时连续加入DE52至所需高度。待DE52完全沉降后，柱面放一圆形滤纸片。
（3）平衡：松开出水口螺旋夹，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡，控制流速为15滴/min，待流出液与洗脱液之pH值达到一致时，停止平衡。
（4）待提取样品的准备：将蛋白装入透析袋里，置4℃冰箱，对0.01mol/L pH8.6 Tris-Cl透析过夜。
（5）加样、洗脱与收集：用吸管吸去柱面液体，以毛细吸管沿柱壁加入样品，样品体积相当于柱床体积的1%～2%，蛋白浓度为50～70mg。启开出水口螺旋夹使样品缓慢进入柱床内，并用少量洗脱液清洗柱壁；待液体进入柱床后，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl洗脱，控制流速为14～16滴/min。分部收集器收集，紫外监测，或人工收集，以紫外分光光度计分别测定每管280nm OD值，描绘洗脱液峰。
（6）浓缩：将洗脱液的280nm OD上峰段与下峰段各管分别合并，装入透析袋，以PEG浓缩至所需体积。
Tris-PO4离子交换层析法
该法在上述方法的基础上稍加改良，即通过梯度洗脱，可用于血清中IgG和IgM的提取。
【材料和试剂】
（1）DE52纤维素。
（2）待纯化标本：杂交瘤腹水或培养上清，免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。
（3）1.5×50cm 层析柱；透析袋及其他透析和层析所需的试剂和器材。
（4）梯度洗脱液包括：0.005 mol/L，pH8.6 Tris-PO4；0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4；.5mol/L，pH5.1 Tris-PO4。
【操作步骤】
（1）蛋白标本对0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4透析。
（2）DE52装柱，并以0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4平衡。
（3）加样，以0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4洗脱，紫外监测直至洗脱液280nm OD回到基线。这一步骤可除去血清中其他蛋白。
（4）以350ml 0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4洗脱，这一步骤可用于纯化血清IgG和IgM。
（5）以125ml 0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4和125ml 0.5mol/L，pH5.1 Tris-PO4梯度洗脱，总量收集250ml；重复步骤（5）。
（6）根据280nm峰值合并蛋白峰，透析浓缩和保存同上。
用过的DE52可用0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl和0.5mol/L NaCl、0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl梯度洗脱回收。再用蒸馏水洗至中性，加入0.02%叠氮钠于4℃保存备用。

I. DEAE-52交换层析洗脱曲线为什么那么平缓呢

洗脱什么物质？