15g蒸馏水84g滤液

Ⅷ 如果在食用油工厂做化验员，应做哪些指标的检验方法是什么

常测指标
1、酸值
是中和1克油脂中的游离脂肪酸所需KOH的质量（mgkOH/g）,是油脂的精炼程度和品质好坏的重要标志之一。酸值高的油脂不宜储存，也不宜食用。
2、过氧化值
氢过氧化物是油脂初期氧化程度的标志，是判断油脂酸败和酸败程度的指标。氢过氧化物是油脂与空气中的氧发生氧化作用所产生的，是油脂自动氧化的初级产物，具有高度活性，能够迅速地继续变化，分解为醛酮类和氧化物等致使油脂酸败变质。氢过氧化物对人体健康有害，是致癌物质，过氧化值高的油脂不宜食用。
3、熔点
棕榈油分提程度不同，熔点不同。毛棕榈油熔点通常为35-37度，即33度棕榈油，经过分提可以得到24度，44度，18度等不同熔点棕榈油。
4、碘值
是油样在规定的操作条件下于100克油脂发生加成反应所需要的碘的克数。油脂中不饱和脂肪酸含量越高、碘值越高。碘值在一定程度上反应了棕榈油的熔点，碘值越高、熔点越低。
5、色泽
植物油通常是呈现淡黄色或淡绿色等不同的色泽，这是由于胡萝卜素、叶绿素、叶黄素、维生素E的氧化物等脂溶性色素存在所致。不同油料、不同加工方法的油脂具有不同的色泽。

植物油检测指标
主要的理化指标：
色泽
气味、滋味
透明度
酸值
过氧化值
碘值
熔点
水分及挥发物
杂质

特殊的理化指标：
棕榈油：
毛棕DOBI的测定
大豆油：
皂化值
不皂化物
含磷
残皂量
皂脚
植物油色泽鉴定法
1、取澄清（或过滤）的试样注入比色槽中，达到距离比色槽口约5mm处
2、将比色槽置于比色计中
3、按规定固定黄色玻片色值
4、打开光源，移动红色片调色，直至玻片色与油样色完全相同为止
5、记下黄、红玻片号码的各自数值，即为被测油样的色泽
6、同时注明比色槽厚度（小槽25.4mm即1英寸，大槽133.4mm即51/4英寸）。
注意事项：
1.观色之前须保证油样是澄清透明的；
2.精炼棕榈油和一级大豆油的色泽一般呈10倍关
系，即“黄Y”是“红R”的10倍；
3.精炼椰子油的色泽，“黄”与“红”一般不呈10倍关
系；
4.毛豆油观色时，黄一般可固定在35或30，毛棕榈
油观色时，黄一般可固定在70或75。

植物油气味、滋味检测方法
1.取少量试样于烧杯中
2.在电炉上加热到80度左右。
3.取下，边搅拌边闻气味，同时取适量稍冷后尝辨滋味
4.凡具有该油固有的气味和滋味，无异味的为合格
5.不合格的应注明异味情况

1.植物油透明度检测方法
2.取一定量的试样于比色管中
3.移至光亮处或在比色管后衬以白纸
4.观察透明程度，记录观察结果
结果表示
以透明，微浊，混浊表示

酸值的检测
1.称取均匀试样W于250ml锥形瓶中；
2.加入30~50ml中性异丙醇，溶解油样，加3滴酚酞指示剂；
3.用0.05mol/L KOH标准溶液滴定至出现粉红色，30秒内不消失。

油品 样品称重量，W
精炼油 约15g~20g
毛油 约5g~10g
脂肪酸 约0.2g~0.5g

过氧化值的检测
1.称取混匀油样W于250ml碘价瓶中；
2.加入氯仿－冰乙酸（2:3）混合液约30ml溶解试样，加1ml饱和碘化钾溶液，加塞，摇匀，置暗3.处静置3分钟；
4.加水50ml，摇匀后，用0.01ml/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色时，加淀粉指示剂1ml，继续滴定至蓝色消失为止。
同样步骤重复空白试验

估计过氧化值， 样品重量
≤1 10g~15g
1~6 5g~10g
≥6 1g~5g

碘值的测定
操作步骤
1.称取干燥过滤的试样W（准至0.0002g，称样量参见下表）注入洁净干燥的500ml碘价瓶中；
2.加20ml氯仿溶解试样，准确移入25ml韦氏液，加入10ml2.5%乙酸汞溶液，立即加塞，混匀后，在20±5℃条件下，置暗处静置3min；
3.到时立即加入20ml15%碘化钾溶液和100ml蒸馏水，用0.1mol/L硫代硫酸钠溶液滴定溶液呈浅黄色时，加入1ml淀粉指示剂；
4.继续滴定至紫色消失为止，同时做空白试验。

碘值（gI/100g） 样品重量（g） 检测结果允许差
10左右（如椰子油） 1.0000g-1.5000g 0.2
30~50（如硬44棕榈油） 0.5000g-0.6000g 0.3
50~65左右 （24棕榈油） 0.4000g-0.5000g 0.3
80~90（如橄榄油、茶籽油） 0.3000g-0.3500g
0.5
100左右（如花生油） 0.2500g-0.3000g
0.5
130左右（大豆油、葵花子油）0.2000g-0.2500g
0.5
180左右（亚麻籽油） 0.1000g-0.1500g 0.8

棕榈油不同品种碘值
油品品种 碘值（gI/100g）
F5度棕榈油 ≥68.5
F8度棕榈油（散装用） ≥65-66
F8度棕榈油（小包装用） ≥66
F10度棕榈油 ≥64.5
F12度棕榈油 ≥63
F14度棕榈油 ≥63
F18度棕榈油 ≥58.5-59
F23度棕榈油 ≥50-50.5
F24度棕榈油 ≥51
IV70棕榈油 ≥68.3-70

不同油品碘值国家标准
油品品种 碘值（gI/100g）
大豆油 124-139
椰子油 7.0-12.5
花生油 86-107
葵花籽油 118-141
菜籽油 94-126
棉籽油 100-115
米糠油 92-115
油茶籽油 83-89
玉米油 107-135
芝麻油 104-120

滑动熔点测定法
1、样品前处理：将清洁干燥的样品加热到高于其熔点10℃~20℃，维持15分钟；
2、取洁净干燥的毛细玻管3支，分别吸取试样达10mm高度（不得过长或过短）；
3、用冰块使样品速冻；
4、放入烧杯中，在冰箱的冷冻室（-10℃~-15℃）中，放置1-2小时（具体参照下表）；
5、到时取出，用橡皮筋将3只管紧扎在温度计上，使试样与水银球相平，将试样和温度计悬挂在事先备好的烧杯水浴中（水浴的初始温度要求比试样熔点低10~20℃），使水银球浸入水中正中间；
6、将烧杯置于电加热磁力搅拌器上加热，同时开动搅拌；
7、控制水温的上升速度，使其速度为每分钟约2℃，试样在熔化前发生软化现象（半透明状态，大约距离熔点8~10℃）时，控制水温的上升速度，使其速度为每分钟约0.5℃。
试样熔点估计值(℃） 冷冻时间（hr） 水浴初始温度(℃)
≤10 2 尽量接近0
10-18 2 2-4
22左右 2 10左右
30左右 1.5 15左右
35-40 0.5-1 20左右
50左右 0.5 25-30

水分及挥发物的检测
1.用已恒重过的称量皿，称重记为W0；
2.取混匀试样约10g（准确至0.0001g），记为W；
3.在105±2℃温度下烘120min，取出在干燥器中冷却至室温，称重W1；
4.每个样品均须做平行实验。

注意
在烘箱中，称量皿的盖子要打开，否则水分不易挥发出去；
出烘箱之前，称量皿的盖子须盖好，否则会发生倒吸现象，导致结果偏小甚至为负值。

油脂的附带成份、品种很多，对油脂的质量有很大的影响，不利于储存。主要可分为以下三类：
1、 不溶性固体杂质：包括泥沙、饼粕残渣、金属、纤维等固体杂质；还包括在精炼过程中形成的不溶性物质，如油脚、皂脚、白土、催化剂及冷却结晶而析出的蜡脂等。
2、 胶溶性杂质：主要是脂肪酸、甾醇、生育酚、磷脂、色素、维生素、棉酚、蜡、谷维素、黄曲霉毒素等。
3、 挥发性杂质：包括水分、醇类、烃类溶剂、臭味组分等。 \

杂质的检测
1.称量皿及定量滤纸恒重，记为W0。
3.连接真空装置，将恒重的滤纸放在不锈钢漏斗上；
3.称取混匀试样10~20g（W）于烧杯中，加入20~25ml石油醚搅拌使试样溶解，倾入漏斗中；
4.用石油醚将烧杯中的杂质干净地洗入漏斗内，再用石油醚约30ml分三次抽洗杂质，（每次须完全抽干）洗至无油迹为止；
5.将带杂质的滤纸小心取下，放入恒重的称量皿中送入105±2℃烘箱中烘1小时，取出放在干燥器中冷却至室温后称重，记为W1。

毛棕DOBI的测定
1.将待测油样充分熔化并搅拌均匀后，称取0.1g
（精确至0.0001g）于25ml容量瓶中，用正己烷溶解并稀释定容。将该溶液倒入石英比色皿中，以纯的正己烷作为参比液，在分光光度计中分别检测其在446nm和269nm处的吸光度。
2.如果溶液浓度仍较大，则可用移液管移取2ml溶液置于10ml容量瓶中，稀释并定容。再以正己烷作为参比液，在分光光度计中分别检测其在446nm和269nm处的吸光度。如果DOBI过高，则可进一步稀释后检测。

皂化值的检测
1.称取混匀试样1g（W，准确至0.001g）于250ml蒸馏烧瓶中；
2.用移液管准确添加25ml KOH－甲醇，加3粒沸石，摇动；
3.同时准备空白；
4.连接回流冷凝管，煮沸回流2小时，至溶液不分层；
5.用10ml中性甲醇冲洗回流冷凝管；
6.添加20ml（空白40ml）中性甲醇，趁热用标准溶液HCL滴定至红色消失。

不皂化物的检测
1.称取混匀试样5g（W，准确至0.001g）于250ml蒸馏烧瓶中；
2.加50ml KOH乙醇溶液几粒沸石，连接冷凝管回流1小时至澄清透明后用100ml水，从顶部加入旋摇；
3.冷却后转移至分液漏斗中，用100ml乙醚冲洗烧瓶，盖塞好振摇1min，静置分层，将下层皂化4.液放入第二只分液漏斗中；
5.用100ml乙醚再提取2次（相同方法）；
6.合并乙醚提取液，加水40ml轻轻旋摇；
7.用40ml 0.5mol/L氢氧化钾溶液和40ml水洗两次；
8.用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止；
9.将乙醚液转至恒重的烧瓶中W1；
10.用索氏抽提器回收乙醚，将残留物于105℃烘箱中1小时；
11.冷却称重，直至恒重为止；
12.将恒重后的残留物溶于30ml中性异丙醇中，用0.05mol/L KOH滴定至粉红色。

磷含量的检测
1.称取10g试样（准至0.001g）于坩埚中（如果试样磷脂含
量比较大如毛豆油、 毛菜油称样量要缩小，如称5g），加氧
化锌0.5g；
2.在电炉上加热炭化后(炭化必须完全，无大量黑烟产生为
止) ，送入500~600℃的马弗炉中灼烧灰化2小时，至灰白
色；
3.冷却至室温后加入热盐酸（1:1）10ml熔解灰份，并加热微
沸5min；
4.将溶解液过滤移入100ml的容量瓶中，用热蒸馏水冲洗坩
埚和滤纸，冷却滤液至室温；
5.用50% KOH中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸（1:1）使氧
化锌沉淀全部溶解后， 再滴2滴；
6.冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度摇匀，为处理液；
7.吸取10ml处理液于50ml比色管中；
8.加入0.015%硫酸联氨8.0ml，加2.0ml钼酸钠稀硫酸溶液，
加塞，摇匀；
9.置于沸腾的水浴中加热10min,取出冷却至室温；
10.用水稀释至50ml充分摇匀；
11.同时做空白试验（除了不含试样外，其他部分相同）；
12.10min后，在650nm下用1cm比色槽比色，电脑自动测定
含磷量P

残皂量的检测
1.称取10g~20g左右（准确至0.01g）试样加入50ml溴酚蓝丙酮，振荡，若油中有皂则上层液为蓝色或绿色
2.用0.01mol/L盐酸标准溶液滴定至黄色，30s不变蓝色或绿色为止。

皂脚的检测
1、取一恒重过的烧杯（100ml）称重，W0；
2、去皮后，称取混匀试样约1-3g（依据试样稠度来估计，稀的皂脚称样量大些）于烧杯中，称重W；
3、放入烘箱中烘干水份，约须2小时；
4、取出，于干燥器中冷却至室温后，称重W1；
5、从干燥器中取一恒重过的抽提瓶，称重W2；
6、加入适量丙酮浸泡，用玻璃棒搅拌溶解，将萃取液滤入抽提瓶中；
7、重复步骤6，直至丙酮萃取液基本呈无色；
8、将盛放丙酮萃取液的抽提瓶安装到抽提装置上，在80℃水浴中（水浴
锅 提前适当时间打开升温）进行丙酮回收；
9、丙酮回收基本干净后，取出抽提瓶，关闭水浴锅；
10、用干净抹布擦除抽提外壁所附杂质后，放入105±1℃烘箱，烘1小
时后取出放在干燥器中冷却。
11、冷至室温后，取出称重W3。

累死我了！！！全吧。求最佳答案~

Ⅸ 取精制后的粗盐少许(约1g)放入试管里,加入蒸馏水6∼8ml振荡溶解实��

纯化
粗盐，实验步骤：溶解，过滤，蒸发
2玻璃棒效果：当
（版1）中溶解权并搅拌以加速溶解。当比索（2）过滤，排水。当比索（3）蒸发，搅拌使其受热均匀。

三，过滤几点需要注意的：一，二低，三经
4，点蒸发注意：玻璃棒搅拌，加热蒸发滤液。

取少量粗盐放入烧杯中，加水，用玻璃棒搅拌，粗盐，直到浑浊的海水后完全溶解已经沿着玻璃棒放入过滤器安装，然后将得到的滤液在蒸发皿中加热，出现了大量的固体，向滤液，停止加热。

Ⅹ 测定糖的含量的方法有哪些

糖的测定方法
一般有四种方法：
1、 直接滴定法。

原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。

2、 高锰酸钾滴定法。

所用原理同直接滴定法。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。

4、蒽酮法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。

综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。

（一） 直接滴定法

Ⅰ、原理

v 一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。

Ⅱ、仪器和试剂
1．仪器
酸式滴定管，可调电炉（带石棉板），250ml容量瓶。
2．试剂

1. 盐酸。

2. 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。

3. 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

4. 乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

5. 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。

6. 葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）。

7. 果糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的果糖。

8. 乳糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的乳糖。

9. 转化糖标准溶液：准确称取1.0526g纯蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5ml盐酸（1+1），在68℃~70℃水浴中加热15min，放置至室温定容至1000ml，每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。

Ⅲ、实验步骤
1．样品处理
⑴ 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约2.50～5.00g固体样品（吸取25～50ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。边摇边慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。）

⑵ 酒精性饮料：吸取100ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入250ml容量瓶中，加水至刻度。

⑶ 含多量淀粉的食品：称取10.00～20.00g样品，置于250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200ml上清液于另一250ml容量瓶中，慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

⑷ 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后备用。（注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。）

2. 标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。）

3. 样品溶液预测：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。） 当试样溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗试样溶液的体积控制在与标定碱性酒石酸酮溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10ml左右。当浓度过低时则采取直接加入10ml样品溶液，免去加水10ml，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10ml试样溶液中所含还原糖的量。

4. 样品溶液测定：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。

5. 计算
样品中还原糖的含量（以某种还原糖计）按下式计算。
X=〔A/(m×V/250×1000)〕×100
式中：X--样品中还原糖的含量(以某种还原糖计)，单位 g/100g；
A—碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位 mg；
m--样品质量，单位 g；
V--测定时平均消耗样品溶液的体积，单位 ml；
计算结果保留小数点后一位。

注意：

滴定结束，锥形瓶离开热源后，由于空气中氧的氧化，使溶液又重新变蓝，此时不应再滴定。

（二）高锰酸钾滴定法

v 原理 将样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。

（三）硫酸苯酚法

Ⅰ、原理

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。

Ⅱ、试剂

1． 浓硫酸：分析纯，95.5%

2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。

3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）

4． 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。

5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。

8． 6mol/L 盐酸

Ⅲ、操作。

1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

2．样品含量测定：

①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意：总的溶液不要超出10毫升。（既不要超出离心管的容量）。

②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。）

③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。

④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。

Ⅳ、注意

（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。

（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。

（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。

（4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之间。比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。

（四）蒽酮法

Ⅰ、实验原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖，而且可以测所有的寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应。所以，用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

Ⅱ、试剂：

蒽酮试剂，0.20 g蒽酮溶入100 mL 95%浓硫酸中，冰箱保存；

Ⅲ、方法：

样品2.0 mL加5.0 mL蒽酮试剂，混匀，然后水浴煮沸10 min，取出冷却至室温，在620 nm处测定其吸光度，根据标准曲线计算水样中糖的浓度。（标线以葡萄糖为标样）