Ⅰ 液相色譜法中應該怎麼解釋組分的洗脫順序
使用高效液相色譜儀進行分析時,常用兩種洗脫方式,一種為等度洗脫,另一種為梯度洗脫。
用等度洗脫進行色譜分離時,由不同溶劑構成的流動相的組成,如流動相的極性、離子強度、pH值等,在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進行色譜分離時,在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動相組成會連續或間歇地改變,其間可調節流動相的極性,改善樣品中各組分間的分離度。
使用梯度洗脫時,也會使干擾分離的強保留雜質組分在較短的時間內從柱中清楚,使色譜柱保持干凈狀態,以進行下一次的分析。梯度洗脫一般是指流動相的組成隨分析時間的延長呈現線性變化,即線性梯度洗脫,可用於反相和正相高效液相色譜儀及離子對色譜法。
(1)液相色譜過濾完為什麼要超聲擴展閱讀:
注意事項:
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
2、流動相過濾後要用超聲波脫氣,脫氣後應該恢復到室溫後使用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
4、使用緩沖溶液時,做完樣品後應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然後用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鍾以上,以充分洗去離子。對於柱塞桿外部,做完樣品後也必須用去離子水沖洗20mL以上。