『壹』 常用滅菌方法有哪些
常用滅菌方法主要包括:高壓蒸汽滅菌法、乾熱滅菌法、濕熱滅菌法、化學試劑滅菌法及過濾除菌法。
以下是對這幾種滅菌方法的詳細解釋:
高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌法是最常用的滅菌方法之一。該方法利用高溫高壓的蒸汽環境,使微生物內部的酶活性破壞,從而達到滅菌的目的。這種方法適用於多種醫療用品的消毒,如敷料、器械等。其優點在於效果可靠,操作相對簡便。
乾熱滅菌法
乾熱滅菌法主要是通過高溫烘烤或灼燒的方式,使微生物蛋白質變性凝固,從而達到滅菌效果。此方法適用於一些耐高溫的物體或設備的滅菌,如實驗室中的玻璃器皿、金屬器械等。但操作時需要特別小心,避免燙傷和火災風險。
濕熱滅菌法
濕熱滅菌法是通過加熱並增加物體內部壓力,使微生物在較高的溫度和壓力下迅速死亡。這種方法常用於葯品、生物製品等的生產過程中的滅菌操作。與高壓蒸汽滅菌法相比,濕熱滅菌法的溫度通常較低,但對物品的濕度控制較為嚴格。
化學試劑滅菌法
化學試劑滅菌法是通過化學消毒劑的作用,破壞微生物的細胞結構或代謝過程,達到滅菌目的。常用的化學消毒劑包括酒精、過氧化氫等。這種方法適用於一些不耐高溫的物品的消毒,但需要注意選擇合適的消毒劑,避免對物品造成損害。
過濾除菌法
過濾除菌法是一種通過過濾介質去除液體中的微生物的方法。此方法常用於制葯工業中無菌產品的生產,特別是針對一些小分子物質的除菌操作。通過選擇合適的濾膜和過濾設備,可以有效地去除液體中的微生物,保證產品的無菌性。
以上就是常用的滅菌方法及其簡要解釋。不同的滅菌方法適用於不同的場景和物品,在實際應用中需要根據具體情況選擇合適的滅菌方法。
『貳』 請問制備培養基時如何過濾除菌
1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種,高壓除菌及.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比,高壓滅菌的工作強度小,成本較低,但易造成營養成分的流失,而且在多次加樣(無菌谷氨醯胺溶液,無菌碳酸氫鈉溶液等)過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1~0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌,並且已成為培養基除菌的發展方向,它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌
某些培養基(如MEM)可進行高壓滅菌,例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉,一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺)可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi,15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失,不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果,滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾,正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染,可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器(如Zeiss濾器)或立式微孔濾器(Millipore、Pall)除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼,中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時,先要用培養用水將濾膜充分潤濕,在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都要包好(可用牛皮紙、紗布、無紡布等);高壓滅菌後,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後,要打開濾器,檢查濾膜是否完整,如果濾膜破裂,需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積,因為濾膜的折疊,膜面積顯著增大,液體處理量大,而且不容易發生堵塞現象。