1. sumo融合蛋白的純化時掛在Ni親和柱上時是不是就還可以加sumo蛋白酶酶切，還是必須洗下來以後才能酶切
不是絕對的，兩種方法其實都差不多。
但是柱切和洗脫後酶切還是有不同的。
柱切內比較方便，酶切容之後直接收流穿的部分就是目的蛋白。缺點是在洗脫之前不知道蛋白產量，可能努力了半天什麼都沒有，而且有些蛋白不穩定，可能在柱切過程中沉澱在柱子上了。
洗脫後再切，比較直觀的檢測初步富集的蛋白量，再決定加多少酶，而且能直觀的檢測酶切效率，確定是酶切之後要多一個去標簽的過程。
2. 疏水柱為何掛不上蛋白，求解！
如果掛不上柱，表明不適合，更換其他柱子。 我的概念中不是所有蛋白都適合專使用屬疏水層析！ 如果你嘗試的過程中表現的非常不錯，恭喜你，疏水層析後一般都會獲得純度非常高的蛋白。如果掛不上柱，表明不適合，更換其他柱子。 我做的幾個蛋白除了鈣調素能 ... 主要糾結在一點蛋白都沒掛上，連咋的都沒tianliut(站內聯系TA)請問你用的柱子體積是多大的？你的樣品的體積和濃度？我覺得最有可能是樣品被稀釋過多倍數造成的。建議換小體積的柱子或增大樣品量。mssj300130(站內聯系TA)其實pH對疏水柱還是有一定影響的，只是大部分情況下我們傾向於在中性環境下去掛柱，如果你的pH低於5的話，疏水性是會變強的，另外可以嘗試一個硫酸鈉，一般來講硫酸納，1M左右吧，再高可能溶解不到了，還有就是你在上柱前嘗試過加一步硫胺沉澱嗎，例如說25%左右的
3. 帶gst標簽的蛋白以包涵體形式表達，復性後仍不能掛柱，為什麼
因為是融合蛋白，GST標簽蛋白和目的基因蛋白融合在一起形成了一個更大的蛋白。
4. 貨車不好掛柱和空檔怎麼辦
手動擋汽車等紅燈時間較短就可以踩住剎車掛一檔就行。假如時間較長可以提上手剎,掛空擋。開自動擋汽車等紅燈時,如果紅燈時間短
5. 過年不掛柱子了。怎麼處理
過年不掛柱子了。嗯，也可以去做一切其他的事。比如掛個紅燈籠。掛一個綵帶。這也是非常好的。
6. 商鋪空調外機能不能掛在牆柱頭上
空調外機只要掛的地方牢固都可以掛，你說的牆柱子上只要房屋主人允許也不影響通行是可以掛的。
7. HIS蛋白純化後，沒有蛋白，是蛋白沒有掛柱，還是蛋白掛在柱子上沒有下來，有什麼好的解決方法嗎。。。
在親來和純化中，his標簽常常源會遇到這種問題， 沒有收集到蛋白可能是蛋白溜走了，沒有收集到，可能使樣品的緩沖液不正確，尤其針對pH值，或者是his標簽沒有暴露出來，因此沒有掛住，或者可以用WB檢測一下HIS是否還在，更多his親和純化的相關問題，可見文章，總結的比較實際有用，希望對你有所幫助，http://wenku..com/view/521ff9cec281e53a5902ff27
8. His-taq純化蛋白不掛柱子，可能的問題是什麼求高人指點。
有這么幾個來可能
1、你western檢測的到目標蛋源白的標簽嗎？如果你的目標蛋白折疊的時候將你的HIS標簽包裹進了蛋白內，HIS抗體是檢測不到的。因此，即使你表達出來目標蛋白，沒有標簽怎樣能掛上呢？
2、你的WASHBUFFER即洗雜蛋白的緩沖液的咪唑濃度過高，將目的蛋白沖洗了下去，待你洗脫的時候發現什麼都沒有掛上了。
9. PI9.8的重組蛋白怎麼掛不柱子啊TRIS-HCL PB 緩沖體系下SP CM Q DEAE都不柱啊問題出在哪裡 請哪位指教
您好！PI9.8建議用CM柱就行，使用pH6-7的PBS，掛不上直接穿透的話你測一下樣品的電導，看專是否里屬面有鹽沒除干凈。如果實在不行，你換顆粒大一點的填料，羥基磷灰石也行。
網路教育團隊【海納百川團】為您解答。
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10. 鎳柱純化蛋白沒有掛柱是什麼原因
可能有多種原因導致 蛋白不掛柱子。
例如：
因為His標簽被包到了蛋白三維結構裡面。鎳介質無法接觸His 標簽；
純化工藝不利於結合作用發揮，例如咪唑；
蛋白不穩定，標簽掉落。
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