㈠ 生物緩沖劑HEPES和PIPES的區別是什麼
PIPES的pH緩沖范圍是6.1-7.5，不溶於水，溶於NaOH水溶液。PIPES不同於含二（2-羥乙基）氨基基團的緩沖劑（如Bis-tris，Bicine），與多數金屬離子不能形成穩定配合物，適用於含有金屬離子的溶液體系中的緩沖劑。根據已有的研究結果，PIPES可被應用於使用磷酸纖維素色譜純化微管蛋白，用於凝膠過濾法純化重組GTP結合蛋白ARF1和ARF2，作為緩沖液從大腸桿菌中結晶轉酮酶。另外，由於PIPES能形成自由基，因此不適合應用於氧化還原體系。在陽離子交換色譜法，應當使用低濃度的PIPES緩沖液，這是因為PIPES具有相對較大的離子強度，而且其pKa值具有濃度依賴性。
HEPES
HEPES的pH緩沖范圍是6.8-8.2，溶於水，不與金屬離子形成穩定的配合物，多數情況下，不會干擾生物化學過程，HEPES常用於各種類型生物體的細胞培養基中；在蛋白質研究中，PIPES常用作陽離子交換色譜法中結合緩沖液的組分和洗脫液；在DNA研究中，PIPES用作磷酸鈣和DNA沉澱物形成體系的緩沖液，AFM以及電穿孔實驗中的緩沖液。另外，HEPES對DNA和限制酶之間的反應有一定干擾，也不適合用於Lowry氏法測定蛋白質含量。 綜上所述，PIPES和HEPS均屬於Good』s緩沖劑，都不能和金屬離子形成穩定的配合物，適合於含有金屬離子的溶液體系。但它們之間也具有一定的差異性，溶解性方面，PIPES不溶於水，而HEPES具有良好的水溶性；緩沖范圍方面，PIPES偏酸性到中性，HEPES偏中性到鹼性，這主要是由於兩者的結構差異決定的，PIPES有兩個磺酸基，HEPES含有一個磺酸基和羥基。另外，PIPES和HEPES在某些體系應用中有一定限制。因此，我們在選擇上述緩沖劑的時候，需要綜合考慮實驗體系的適合性以及兩者性質的差異性。這樣您在采購這個Good』s緩沖劑的時候是不是能更好的找准您所需要的產品。德晟也會給您一個准確的定位。
㈡ 如何選擇離子交換層析的離子交換劑和緩沖液
這個就要看你要純化的樣品的具體性質來定啦，如果是處於摸索條件的間斷，可以嘗試最常用的Tris緩沖液。。
㈢ 過離子交換柱時，pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液
如果不限定純化方法，可以考慮親和層析或離子交換，但根據你問題的意思，是選定離子交內換。
此時就容要考慮你蛋白的等電點了，如果等電點在你穩定pH之上，就用陽離子交換柱：
設計陽離子交換層析：將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running buffer。同時裝柱，平衡，然後上樣，平衡，洗脫（因為你的pH不穩定，建議鹽洗脫），收峰。得你的蛋白；
如果你的等電點在穩定pH之下，就用陰離子交換柱，其步驟如上，只是改變柱子類型。
㈣ 在經離子交換器處理後的水測硬度須不須要加氨緩沖液
緩沖溶液的特點是：在緩沖溶液中加入少量的酸、鹼，溶液的pH幾乎不發生變化。使用緩沖溶液，當然是為了維持溶液的pH在一定的范圍內，不使其發生很大的變化。測定水硬度時，需要用氨性緩沖溶液調節pH值。
㈤ 簡述離子交換色譜法
離子交換色譜法(ion exchange chromatography,IEC)
離子色譜分析法出現在20世紀70年代，80年代迅速發展起來，以無機、特別是無機陰離子混合物為主要分析對象。
離子交換色譜利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力差異來實現分離。離子交換色譜的固定相一般為離子交換樹脂，樹脂分子結構中存在許多可以電離的活性中心，待分離組分中的離子會與這些活性中心發生離子交換，形成離子交換平衡，從而在流動相與固定相之間形成分配。固定相的固有離子與待分離組分中的離子之間相互爭奪固定相中的離子交換中心，並隨著流動相的運動而運動，最終實現分離。
表達式
離子交換色譜的分配系數又叫做選擇系數，其表達式為：
K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}
其中[RX + ]表示與離子交換樹脂活性中心結合的離子濃度，[X + ]表示游離於流動相中的離子濃度
分離原理
離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC）以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。
陽離子交換:
陰離子交換:
式中"－－"表示在固定相上，Kxy和Kzm是交換反應的平衡常數，Z+和X-代表被分析的組分離子。M+和Y-表示樹脂上可交換的離子團。
離子交換反應的平衡常數分別為：
陽離子交換：
陰離子交換：
平衡常數K值越大，表示組分的離子與離子交換樹脂的相互作用越強。由於不同的物質在溶劑中離解後，對離子交換中心具有不同的親合力，因此具有不同的平衡常數。親合力大的，在柱中的停留時間長，具有高的保留值。
固定相
離子交換色譜常用的固定相為離子交換樹脂。目前常用的離子交換樹脂分為三種形式，一是常見的純離子交換樹脂。第二種是玻璃珠等硬芯子表面塗一層樹脂薄層構成的表面層離子交換樹脂，第三種為大孔徑網路型樹脂。它們各有特點，例如第二種樹脂有很高的柱效，但它的柱容量不大；第三種樹脂適用於非水溶液中物質的分離，因為它們的孔徑和內表面積大，不需要用水溶脹，便可滿意地使用。
典型的離子交換樹脂是由苯乙烯和二乙烯基苯交聯共聚而成：
其中，二乙烯基苯起了交聯和加牢整個構型的作用，其含量決定了樹脂交聯度大小。交聯度一般控制在4％～16％范圍內，高度交聯的樹脂較硬而且脆，也較滲透，但選擇性較好。在基體網狀結構上引入各種不同酸鹼基團作為可交換的離於基團。
按結合的基團不同，離子交換樹脂可分為陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂。陽離子交換樹脂上具有與樣品中陽離子交換的基團。陽離子交換樹脂又可分為強酸性和弱酸性樹脂。強酸性陽離子交換樹脂所帶的基團為磷酸基（一），其中和有機聚合物牢固結合形成固定部分，是可流動的能為其他陽離子所交換的離子。
陰離子交換樹脂具有與樣品中陰離子交換的基團。陰離子交換樹脂也可分為強鹼性和弱鹼性樹脂。
陰離子交換樹脂屬強鹼性，它是由有機聚合物骨架和一季胺鹼基團所組成，它帶有正電荷。而與相反的是可以移動的部分，它能被其它陰離子所交換
流動相
離子交換色譜的流動相最常使用水緩沖溶液，有時也使用有機溶劑如甲醇，或乙醇同水緩沖溶液混合使用，以提供特殊的選擇性，並改善樣品的溶解度。
離子交換色譜所用的緩沖液，通常用下列化合物配製：鈉、鉀、被的檸檬酸鹽，磷酸鹽，甲酸鹽與其相應的酸混合成酸性緩沖液或氫氧化鈉混合成鹼性緩沖液等。
㈥ 離子交換樹脂用緩沖液平衡，為什麼又用緩沖液沖洗
恢復樹脂的原來的存在狀態，使樹脂再生利用。
㈦ 離子交換法等電點7.4抗體用什麼緩沖液
離子交換法等電點7.4抗體用。
㈧ 某蛋白質等電點為8.14,如採用離子交換色譜法來純化,如何選擇填料和緩沖體系
我的話，第一步會選擇pH7.0-7.4左右過陰離子交換，讓大多數雜蛋白（大多數雜蛋白pI在6左右）、核酸、色素等雜質結合，收集流穿液，此時蛋白溶液的純度和澄清度會大大提高，再校pH7.0或更低pH過陽離子交換進行純化。講究一點的話，在緩沖選擇上可以區分一下陰陽離子緩沖，多數情況影響不大，不必糾結。
㈨ 用離子交換法純化蛋白如何選定緩沖液
也可以用AEC，主要以流穿模式做。sspxiaoji(站內聯系TA)用陽離子交換柱，可以考慮pH6.0-7.0的緩沖液，因內為容大部分蛋白質的等電點在這附近，帶電荷少，這樣容易穿透除去其他雜蛋白。而你的目的蛋白PI在11，掛柱應該比較牢固。但是有個問題需要注意，PH離你的目標蛋白PI太遠，有可能導致掛柱後難以洗脫。
㈩ 蛋白純化陰離子交換，緩沖液帶什麼電荷
既然是陰離子交換，就要讓目標蛋白帶負電，那麼緩沖液PH就要大於等電點。緩沖體系的選擇也很重要，一般用TRIS-HCl，特別是弱陰離子柱不可選用帶負電強的磷酸鹽緩沖液，否則上樣液中被交換的將是磷酸根而不是目標蛋白。一般用NaCl平衡後上樣進行離子交換，然後再用較強的陰離子洗脫。