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deae陰離子交換柱

發布時間:2022-05-01 23:08:28

⑴ DEAE纖維素陰離子交換柱,看到很多地方講到流穿模式,什麼叫做流穿模式呢

流穿模式指的是樣品沒掛柱,都留下來了。

⑵ 急!急!如何裝陰離子交換柱,使用時候出現氣泡怎麼除去謝謝

可以用適量的有機溶劑潤洗一下層析柱,柱子體積較小的話就用玻璃棒攪勻排除一下氣泡。

不管是干柱和濕柱,都要加層析液,不能要求一開始就沒有氣泡的。要用洗脫劑不停的洗脫,就是用配置好的試劑一邊一邊對柱子進行洗脫,這樣不但可以消除氣泡,還可以使硅膠充分沉降,讓層析效果更好。等柱子沒有氣泡後在上樣用洗脫液進行層析。

若柱中留有氣泡或各部分松緊不勻(更不能有斷層)時,會影響滲透速度和顯色的均勻。去除就是用玻璃棒攪拌,趕走氣泡。

(2)deae陰離子交換柱擴展閱讀:

水溶液中一些陽離子進入了反離子層,而原來的反離子層中的陽離子進入了水溶液。這種在正常濃度下,反離子層與水溶液之間的各向同性離子交換稱為離子交換作用。

離子交換主要發生在擴散層與正常水溶液之間。由於粘土顆粒表面通常帶有負電荷,離子交換主要是陽離子交換,所以又稱陽離子交換。離子交換嚴格遵循等價定律,即進入反離子層的陽離子等價於從反離子層排開的陽離子等價。

⑶ 如果蛋白質等電點是6.2,用deae柱子,應選用多大ph值上柱子

如果蛋白質等抄電點是6.2,用DEAE柱子襲,應選用8.0左右的pH值上柱子
DEAE是陰離子交換柱,當環境pH高於蛋白質等電點的時候,蛋白質可以結合上陰離子柱。考慮到要穩定的結合一般選擇的環境pH要高於等電點值1.5左右。同時考慮維持蛋白質的穩定,環境pH一般選擇偏中性的值。

⑷ DEAE CL-6B 陰離子交換層析柱分離 β葡萄糖苷酶,酶一直洗脫不下來怎麼辦.提高ph有用嗎

可以考慮上升洗脫液離子強度,但保證蛋白質不變性
另外讓目標蛋白與介質結合的力度小一些; 改變環境的酸鹼度,更換介質,更換緩沖液等

⑸ 陰離子交換柱能去除水中的什麼

作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離子。混合物通過陰離子交換柱,陰離子可以被吸附從而與其他物質分開,一般來說,陰離子交換柱的吸附劑應該呈陽性。

⑹ 用過的sephadex G-25層析柱和DEAE纖維素離子交換柱再生的方法為什麼不一樣

飛秒檢測發現sephadex G-25層析柱填料是葡聚糖交聯的凝膠柱,G-X, X:(1)交聯度。X越小,交聯度越大,網孔越小,適用於分離低分子量產品,反之亦然。(2)吸水量。為凝膠得水值的10倍.例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克.凝膠柱使用一次後,必須反沖疏鬆一次,平衡後再使用。若使用數次,就需要再生處理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡,然後用蒸餾水洗至中性備用。若實驗完畢,將再生後的凝膠在布氏漏鬥上用蒸餾水洗滌抽干,再用95%乙醇洗兩次,在60℃烘箱中烘乾,回收保存。
DEAE-纖維素為二乙氨乙基纖維素,是陰離子交換劑。基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱;若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌,其順序為:0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定(洗必泰),陽離子交換劑可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。
兩種填料的抗酸鹼性和抗腐蝕性能不同。

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