㈠ 超濾離心管離心蛋白時離心幹了怎麼辦
不建議用離心管離蛋白。最好還是膜處理比較好。
蛋白會粘附在渣里，只有用緩沖液再潤洗咯。
㈡ 超濾膜的清洗保存
超濾膜清洗的方法主要有兩點要注意：一是必須事先弄清楚污染物的組成及污染性質。二是如能用清水沖洗，應盡量用清水沖洗。只有當清水沖洗達不到理想效果時，才考慮用化學清洗方法。為此超濾膜的清洗，又可分為物理清洗法和化學清洗法兩種。
1、物理清洗法：在這方面用的最多最普遍的就是水力沖洗法。它又可因水力沖洗方向的不同，分為逆向沖洗、反沖洗和正洗沖洗。
(1)逆向沖洗：用原水沖洗膜內和進水端面的雜質。
(2)反沖洗：用超濾水從膜塊表面的污染物沖鬆散、剝落，分別從進水口和濃縮口排出(可加酸、鹼或次氯酸鈉等葯品加強清洗效果)。
(3)正洗沖洗：用原水沖洗膜內和端面的雜質，按運行狀態將超濾膜清洗干凈。
2、化學清洗法：
根據膜表面污染物質的種類，選擇適當的化學葯品與之進行溶解、氧化或其他化學反應達到去除的目的。常用的化學葯品的選擇必須根據膜材料的性質選擇，如酸類、鹼類、氧化劑、殺菌劑、表面活性劑以及加酶洗滌劑等。進行方法與正常超濾過程相同，清洗液自原液入口處進入，濃縮液及超濾液全部返回清洗液容器，循環後排放，以凈水洗凈即可。
超濾膜的保存
1、短期保存：超濾膜如暫停使用時(少於10天時間)應對超濾膜殺菌反沖洗一次，在反沖洗水中加入殺菌劑後再將超濾膜的進水閥、排放閥和調節閥關閉，保持超濾膜的密封和滅菌作用。
2、長期保存：超濾膜如長期停止使用時(超過10天)，先對超濾膜進行殺菌反沖洗一次，然後在超濾膜內注入保護液後密封保存。
㈢ 超濾管3kd是3kd的都下去嗎
3KD指的是截留分子量
截留分子量（MWCO:molecular weight cutoff）是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能，又稱作專切割分子量。
由於屬直接測定超濾膜的孔徑相當困難，所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時，就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能，稱為膜的截留分子量。實際上，所使用的物質並非絕對的球形，由於試驗條件的限制，所測定的截留率也有一定的誤差，所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截，一般來說希望3KD的產品全部透過，需要選擇截留分子量更大的膜，比如5KD
㈣ 超濾離心管怎麼使用
蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。
㈤ 求助：第一次使用超濾離心管應該怎麼處理
可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。
㈥ 大家用過的超濾管怎麼保存
超濾膜組件的維護（四川禹華環保）要點：
一、短期停機的情況下：停機2-3天以內，請內在膜組件內部充水容的狀態下停機；如果達一周左右時，請注入濃度為50mg/L的次氯酸鈉溶液；
二、 長期停機的情況下：膜組件要先經過次氯酸鈉葯洗後，再注入濃度為1.5%的亞硫酸氫鈉溶液。
三、置於陰涼處，不能脫水存放；低於零度時要加甘油防凍；
㈦ 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理
可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。
㈧ 反滲透膜要停用一段時間，怎麼保護就這么放著好嗎需要注意些什麼，才能保證膜的壽命不受影響。
反滲透膜停用保護措施
膜元件短期保存應如何保護
因芳香族聚醯胺反滲透膜與含有殘余氯的水接觸將給膜元件造成無法修復的損傷，所以在對反滲透設備及管路進行殺菌、化學清洗或封入保護液時應保證配製葯液的水中不含任何殘余氯。如果有殘余氯存在，要使用亞硫酸氫鈉還原殘余氯，並保持足夠的接觸時間以保證還原完全。
短期保存方法適用於ro膜停止運行5～30天的反滲透系統。此時反滲透膜元件仍安裝在 RO 系統的壓力容器內。保存操作的具體步驟如下
① 用給水沖洗反滲透系統， 同時注意將氣體從系統中完全排除。
② 將壓力容器及相關管路充滿水後，關閉相關閥門，防止氣體進入系統。
③ 每隔5天按上述方法沖洗一次。
膜元件長期停用保護措施
如果反滲透膜停用30天以上，膜元件仍安裝在壓力容器中的反滲透系統。
應該進行如下保護：
① 清洗反滲透系統中的膜元件。
② 用反滲透產出水配製殺菌液，並用殺菌液沖洗反滲透系統。殺菌劑的選用及殺菌液的配製方法可參見膜公司相應技術文件或與膜公司當地代表處聯系以獲取有關技術建議。
③ 用殺菌劑充滿反滲透系統後，關閉相關閥門使殺菌液保留於系統中，此時應確認系統完全充滿。
④ 如果系統溫度低於27℃，應每隔30天用新的殺菌液進行第②、③步的操作；如果系統溫度高於27℃，則應每隔15天更換一次保護液 （殺菌液）。
⑤ 在反滲透系統重新投入使用前，用低壓給水沖洗系統1h，然後再用高壓給水沖洗系統 5～10min，無論低壓沖洗還是高壓沖洗時，系統的產水排放閥均應全部打開。在恢復系統至正常操作前，應檢查並確認產品水中不含有任何殺菌劑。
㈨ 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦
1、選擇合抄適的超濾管，主要考慮襲MWCO和濃縮體積，最常見的是Ultra-15（10kD）。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。
注意，一定要等離心機達到目的轉速之後，方可離開
離心機，否則離心機出問題時，無法第一時間處理，後果不可預測！膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。