① 求助:豆粕中真蛋白的測定
1、原理 硫酸銅在鹼性溶液中,可將蛋白質沉澱,且不溶於熱水過濾和洗滌後,可將純蛋白質和非蛋白質含蛋物分離,再用凱氏定蛋法測定沉澱中的蛋白質含量。 2、儀器設備 (1)燒杯:200ml。 (2)定性濾紙。 (3)其他設備與粗蛋白質測定法的相同。 3、試劑及配製 (1)100g/L硫酸銅溶液:分析純硫酸銅(CuSO4•5H2O)10g溶於100mL蒸餾水中。 (2)25g/L氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶於100mL蒸餾水中。 (3)10g/L氯化鋇溶液:1g氯化鋇(BaCl•H2O)溶於100mL蒸餾水中。 (4)2moL/鹽酸溶液。 (5)其他試劑預一般粗蛋白測定法的相同。 4、測定步驟 准確稱取試樣1g左右(精確到0.0001g),置於200mL燒杯中,加50mL蒸餾水,加熱至沸,加入20mL硫酸銅溶液,20mL氫氧化鈉溶液(加入以上兩種溶液多要緩慢,且要邊加入邊攪拌),用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上,用傾斜過濾(用定型濾紙),然活後用60~80℃熱蒸餾水洗滌沉澱5~6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液,直至不生成白色沉澱為止。將沉澱和濾紙放在65℃烘箱乾燥2h,然後全部轉移到凱氏燒瓶中,消化後進行定蛋測定。 5、結果計算 同粗蛋白測定。
② 飼料中真蛋白的檢測方法,盡可能詳細說明步驟
飼料中純蛋白質的測定 一、測定原理 硫酸銅在鹼性溶液中,可將蛋白質沉澱,且不溶於熱水,過濾和洗滌後,可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉澱中的蛋白質含量。 二、儀器設備 (1)燒杯:200mL。 (2)定性濾紙。 (3)其它設備與粗蛋白質測定性相同。 三、試劑及配製 (1) 100g/L硫酸銅溶液:分析純硫酸銅(CuSO4 5H2O)10g溶於100mL水中。 (2) 25g/L氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶於100mL水中。 (3) 10g/L氯化鋇溶液:1g氯化鋇(BaCl2 H2O)溶於100mL水中。 (4) 2mol/L鹽酸溶液。 (5) 其它試劑與一般粗蛋白質測定法相同。 四、測定步驟 准確稱取試樣1g左右(精確至0.0001g),置於200mL燒杯中,加50mL水,加熱至沸,加入20mL硫酸銅溶液,20mL氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1小時以上,用傾斜過濾(用定性濾紙),然後用60-80℃熱水洗滌沉澱5-6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液,直到不生成白色硫酸鋇沉澱為止。將沉澱和濾紙放在65℃烘箱乾燥2小時,然後全部轉移到凱氏燒瓶中,消化後進行氮測定。 五、結果計算 同粗蛋白質測定。
③ 定性濾紙使用注意事項有哪些
一般情況下,定性濾紙使用都不會在高溫下進行過濾的,這個溫度有一個限度只要不超過就行了,別外不要過濾熱的濃硫酸或硝酸溶液熱的酸性可以破壞定性濾紙的過濾效果。
一般採用自然過濾,利用濾紙體和截留固體微粒的能力,使液體和固體分離。
定性濾紙在過濾機器中的使用,濾紙的機械強度和韌性都較盡量少用抽濾的辦法過濾,如必須加快過濾速度,為防止穿濾而導致過濾失敗,在氣泵過濾時,可根據抽力大小在漏斗中疊放2~3層濾紙,在用真空抽濾時,在漏.先墊一層緻密濾布,上面再放濾紙過濾。
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④ 定性濾紙與定量濾紙在過濾時有什麼區別
過濾過程中沒有區別。區別在於定量濾紙有穩定的灰分值,可以用於分析中的熾灼殘渣指標或者沉澱分析。定性濾紙不行。
⑤ 真蛋白是怎麼定義的怎麼測定
真蛋白是生物學上的概念,是相對與粗蛋白而言的1、粗蛋白質是含氮物質的總稱。2、真蛋白指純蛋白質。3、粗蛋白質包括真蛋白質和含氮物(氨化物)。4、測定方法:粗蛋白質的測定以測總含氮量為定。 真蛋白質的測定以測總蛋白質含量為定。
⑥ 國家標准檢測蛋白質含量測定方法
蛋白質含量測定方法就是檢測元素的含量,像三聚氰胺的問題,就是通過增加N的含量使「蛋白質」含量提高的。
國家標准檢測蛋白質含量的方法叫做凱氏定氮法,食物中的蛋白質在催化加熱條件下分解,導致氨和硫酸結合產生硫酸銨。 鹼蒸餾採用無硫,硼酸吸收,用硫酸或鹽酸標准滴定溶液滴定,根據酸耗計算氮含量,再乘以轉化系數,即蛋白質含量。
具體操作步驟如下:
1.樣品處理
精確稱量0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸收10-20ml液體樣品(約30-40mg氮當量)。將其轉移至乾燥的100毫升或500毫升氮氣固定瓶中,加入0.2克硫酸銅,6克硫酸鉀和20毫升硫酸,輕輕搖動,在瓶口放置一個小漏斗,將瓶子傾斜石棉網上有45度角,有小孔。
加熱小火後,內容物碳化,泡沫完全停止,加強火力,保持瓶內液體稍微沸騰,直至液體呈藍綠色澄清透明,然後繼續加熱0.5小時。取出並冷卻,小心加入20毫升水,冷卻,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗凈氮氣瓶,洗凈液放入容量瓶中,然後用水沖洗至刻度,混勻備用。
取相同量的硫酸銅,硫酸鉀和濃硫酸作為試劑進行空白試驗。然而,這種方法很危險,很難在實驗室中證明。大多數實驗室都有一個消化器,可以一次處理16個以上的樣品和一個可以自行設定溫度的呼吸機。它更安全,更可操作。
(6)真蛋白的測定中過濾使用定性濾紙擴展閱讀
除了凱氏定氮法以外,標準的測量方法還有:
分光光度法
食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解,分解產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨,在pH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液中與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色的3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1,4-二氫化吡啶化合物。在波長400nm 下測定吸光度值,與標准系列比較定量,結果乘以換算系數,即為蛋白質含量。
燃燒法
樣品在900~1200℃下燃燒。在燃燒過程中,產生混合氣體。 諸如碳,硫和鹽的干擾氣體被吸收管吸收,氮氧化物被還原成氮。 形成的氮氣流由熱導檢測器(TCD)檢測。
⑦ 飼料中真蛋白的檢測方法
凱氏定氮法 網上沒找到,就自己打了一份
飼料中純蛋白質(真蛋白)的測定
一、測定原理
飼料蛋白質經沸水提取並在鹼性溶液中被硫酸銅沉澱。過濾和洗滌後,可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉澱物中的蛋白質含量。
二、儀器設備
(1)燒杯:200ml
(2)定型濾紙
(3)其他設備與粗蛋白質測定法相同
三、試劑與配製
(1)100g.L-1硫酸銅溶液;分析純硫酸銅(5水硫酸銅)10g溶於100ml水中
(2)25g.L-1氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶於100ml水中
(3)10g.L-1氯化鋇溶液:1g氯化鋇溶於100ml水中
(4)2mol.L鹽酸溶液
(5)其他試劑與粗蛋白質測定法相同
四、測定步驟
准確稱取試樣1g左右(精確至0.0001g)置於200ml燒杯中,加50ml水中,加熱至沸。
加入20ml硫酸銅溶液,20ml氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上。用定性濾紙過濾,然後用60~80攝氏度熱水洗滌沉澱5或6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾紙,直至不生成白色硫酸鋇沉澱為止。將沉澱和濾紙放在65攝氏度烘箱乾燥2h,然後全部轉移到凱氏燒瓶中,按半微量凱氏定氮法進行氮的測定。
⑧ 用凱氏定氮法能檢測出真蛋白質嗎如果能其測定方法具體步驟
凱氏定氮法測的是樣品中的有機氮含量,而除了蛋白質中的氮是有機氮外,還有很多有機物中的氮也是以氨基(-NH3)、亞氨基(-NH-)等有機氮形式存在的,因此只有在已知被測物由蛋白質組成的情況下,才能使用凱氏定氮法來定量蛋白質含氮量。具體測定方法網上很多,在這里不贅述。
⑨ 為什麼「在葉綠體中提取和分離色素時,要用定性濾紙過濾研磨液。」這句話不對
因為是用單層尼龍布來過濾研磨液的。用濾紙會把色素吸收掉。
⑩ 怎樣快速檢測魚粉真蛋白
檢測真蛋白
粗蛋白質只反映魚粉中所有含氮物質的含量,而不能反映其中真蛋白(即純蛋白)的含量。所以通過測定真蛋白的含量,利用真蛋白與粗蛋白含量之比(即真蛋白的比率),可以判斷魚粉中是否摻入水溶性非蛋白含氮物質。
在魚粉粗蛋白含量符合產品規定時,魚粉真蛋白的比率應不小於80%,當測得魚粉真蛋白比率小於80%,該魚粉中摻有水溶性非蛋白物質。
魚粉真蛋白的測定方法:稱取0.5克左右的樣品(精確至0.0002克)於250ml燒杯中,加入50
m蒸餾水煮沸,加入10%的硫酸銅溶液20ml,邊加邊攪拌,再加入2.5%的NaOH溶液20ml,靜置1小時或靜置過液,沉澱物以中速定性濾紙過濾,用70℃以上的熱蒸餾水反復洗殘渣,直至濾液無SO2-4(取5%氯化鋇試液5滴滴於表面皿,加2mol/L鹽酸1滴,滴入濾液,在黑色背景下觀察,無白色沉澱)。將濾紙與殘渣包好,在65-75℃下,烘乾,將烘乾的試樣連同濾紙一起放入燒瓶中消化